河南外泌体载药研究进展

天然来源的外泌体含有众多内源性脂质、蛋白及核酸类物质,其自身句有一定的成药潜力,例如间充质干细胞来源的外泌体在组织修复领域获得了巨大成功。当外泌体用作递送载体时,一般还需人为装载药物。理想的载yao方法不jin要实现较高的载药效率,还应保留外泌体和药物的功能和完整性。目前,在不破坏外泌体膜完整性的情况下将药物有效载入到外泌体中仍是一个巨大挑战。现有的载yao方法可分为分泌前载药法和分泌后载药法。分泌前载药法通常将亲代细胞与药物共孵育(一般需要加转染试剂),使药物进入细胞质,细胞质中的药物通过主动或被动的方式被分选到外泌体中,然后通过合适的提取方法即可获得载药的外泌体。分泌后载yao方法是目前常用的外泌体载药策略,通常需要先分离提纯外泌体,再将药物载入其中。外泌体载带miR一26a、miR一200b等可用于抗中流、糖尿病性创伤、肠纤维化的zhiliao。河南外泌体载药研究进展

传统药物往往存在水溶性差、易被人体快速qing除、生物相容性差、体内分布不理想和向细胞渗透能力低等缺陷，这些问题在一定程度上限制了它们的临床应用。药物投递系统就是要解决上述一个或多个问题以达到增加药物的安全性和效果的目的。在外泌体载药中，外泌体作为药物载体进行药物运输有独特的优势，主要体现在:(1)当使用自源外泌体时，外泌体引起的有害免疫反应极低;(2)外泌体在人血液中的稳定性好;(3)向细胞转运“货物”的效率高;(4)外泌体运载药物时句有一定的靶向性;(5)外泌体直径在40～100nm之间，因此可以很好地利用增强渗透滞留(EPＲ)效应，有选择性地渗入到中流或者炎症组织部位。内蒙古外泌体载药rna的综述外泌体载药后可以绕开Ｐ－糖蛋白，明显降低药物进入细胞后的外排作用。

外泌体作为纳米级内源性载体囊泡，具有低免疫原性，可以利用天然独特的来源透过细胞屏障；为球形空心结构，不需要设计结构而装载药物；为细胞间通信介质而用于递送药物；对外泌体修饰可获得靶向性，提高药物递送的效率。但外泌体产量一直比较低，已有研究基于Fe2O3与聚乳酸⁃乙醇酸共聚物的生物可降解纳米颗粒（NPs）提高外泌体产量，用LPS刺激THP-1巨噬细胞也会增加外泌体产量。由于外泌体的得率较低，载药时应考虑药物性质选择合适的载yao方法，以达到外泌体的合理运用。

外泌体直接载yao方式包括皂苷处理法、孵育法、冻融循环法、超声法和挤出法等。皂苷处理法指共培养外泌体、药物和皂苷溶液，然后通过透析膜、色谱柱纯化得到载药外泌体的方法。孵育法指药物和外泌体在适宜的条件下共培养。冻融循环法是经过冷冻、融化过程使外泌体包裹药物。超声法利用超声波使药物进入外泌体中，挤出法利用挤出机实现外泌体载带药物。其中皂苷辅助药物装载方法是直接载yao方式中常用的一种载yao方式。上述方法也存在一些缺点：孵育法操作简单，但载药量低；冻融循环法、超声法和挤出法对仪器的要求高，且可能会破坏外泌体的质膜结构造成药物泄露，终造成载药量不理想。间充质干细胞外泌体既有作为载药载体的特性，还有MSC的多种生物学功能，本身也可以作为“药物”使用。

大分子蛋白类药物可以通过以下方法进行外泌体载药。Haney等人采用常温下共孵育、加入皂素后孵育、反复冻融、超声、挤出等多种不同的方法将过氧化氢酶包载到外泌体中。结果显示，外泌体通过超声和挤出两种方式句有较高的载药量，分别为26.1％和22.2％，通过被动扩散方式的载药量jin为4.9％，但当加入句有透皮促进作用的皂素后，外泌体的载药量会明显提高至18.5％。值得注意的是，外泌体的载药量不jin与载yao方式有关，也取决于药物的性质、外泌体脂质的组成，而且不同的载yao方式也会影响细胞对外泌体的摄取。HEK293FT来源外泌体与脂质体融合为杂交外泌体，可装载并传递靶向RunX2的CRISPR/Cas9系统至间充质干细胞中。湖南外泌体载药hplc

装载miＲ-17-92团簇的间充质干细胞外泌体处理中风大鼠，其神经学功能得到改善。河南外泌体载药研究进展

疏水性的小分子药物如紫杉醇、紫衫酚、阿霉素（DOX）、姜黄素等可以通过与分离纯化的外泌体共孵育，将药物负载到外泌体中。这种方法的载药量往往较低，通过高效液相色谱检测紫衫醇的载药量一般为7.2％，DOX的载药量一般为11.2％。为了达到高效负载药物的目的，研究人员采用了电穿孔、挤出、辅助超声、低渗透析等一系列载yao方式将疏水性卟啉化合物载入到外泌体中。研究结果显示，电穿孔法、挤出、超声、低渗透析等一系列载yao方式都可以提高卟啉化合物的载药量。尤其是超声和低渗透析方法可以提高卟啉化合物的载药量到11倍。河南外泌体载药研究进展