江西细胞外泌体染色PKH67/PKH26

全自动外泌体荧光检测分析系统能够对>50 nm的外泌体进行全方面的表征，无论是粒径尺寸、粒径分布还是外泌体的亚型均可在一次测试中得到。并且所用来测试的样本无需进行纯化，避免因纯化带来的样本偏差。分析不同大小和不同尺度的外泌体亚群，在CD171过表达系统中，100 nm以上的外泌体只表达了CD171。通过抗体捕获的模式，全自动外泌体荧光检测分析系统能够量化含有不同标记物的外泌体亚群，并对不同种群的外泌体进行特异性计数和分析。整个过程无需纯化，并且线性范围可跨越3个数量级。抗体亲和法和密度梯度离心法，虽然可以提取到高纯度的外泌体，但不能提取完整外泌体。江西细胞外泌体染色PKH67/PKH26

随着外泌体的功能逐渐被发现，近年来，应用这些功能的医治法也在被开发出来。例如，血液中的成纤维细胞所释放的外泌体，可以促进角质形成细胞的移动和增殖以及血管新生来促进伤口愈合。有报导指出，外泌体内miRNA参与促进血管新生、抗症性和促进胶原蛋白沉淀等一系列过程。从症状患者树突状细胞释放的外泌体中，含有各种症状细胞来源的蛋白质，可以强化杀伤性T细胞对症状细胞的特异性反应。利用此功能的抗种瘤免疫疗法，目前正处于初期临床研究阶段。江西细胞外泌体染色PKH67/PKH26确认外泌体生理作用的单独方法就是明确外泌体的释放机制，通过促进或压制释放机制。

从生物体液中分离外泌体的各种方法已经被开发出来，主要根据外泌体的大小、密度、免疫特性等特点进行操作。分离出高纯度的外泌体是我们后续开展外泌体研究的关键步骤，目前差速超速离心是外泌体分离方法中公认的“金标准”，也是分高文章中主选的分离方法。外泌体提取在短时间（一周之内）使用，可以放在4度保存，如果长时间保存可以放在-20度或-80度保存。也可以将外泌体进行分装，分别放在-20度或-80度。外泌体检测方法：外泌体分离之后，需要经过一系列鉴定才能确定分离的是外泌体。鉴定方法从物理特征到表面分子标志物，多角度进行鉴定。

几乎所有类型的细胞都可以分泌外泌体，同时外泌体也普遍存在于体液中，包括血液、眼泪、尿液、唾液、乳汁、腹水等。目前研究发现外泌体中富含核酸（microRNA、lncRNA、circRNA、mRNA、tRNA等）、蛋白、胆固醇等。外泌体的表面marker主要有CD63、CD81、CD9、TSG101、HSP27等。目前对于外泌体的鉴定主要有四种方法：透射电子显微镜（TEM）、Nanosight、Western Blot、流式细胞术。近年来，随着外泌体研究的不断深入，它的应用已经涉及种瘤医治领域、医学基础和免疫领域、寄生虫领域；临床研究上已涉及心血管系统、内分泌代谢系统等。外泌体其纯度与超离心法和PEG沉淀法提取外泌体做比较。

各种细胞粘着分子在外泌体膜表面表达，由其决定外泌体被运输往哪一种细胞，期望开发利用该特征的新型DDS。外泌体在体液中十分稳定，同时外囊泡所含的蛋白质和RNA被外泌体的脂质双层膜所包被也不会分解。另外在从体液中提取外泌体后，体液可长期稳定保存，因此外泌体有望成为临床检测的新型疾病生物标记。外泌体与各种疾病的相关性被检测出，特别是血液中释放的病细胞来源的外泌体，其与正常细胞来源外泌体在结构分子上的差异倍受瞩目，并作为症状早期诊断技术，应用于与症状进展相关的研究。甚至人们期望将尿液中的外泌体作为肾脏、前列腺疾病、膀胱疾病的新型诊断标记，髓液中的外泌体作为脑内种瘤和神经退行性疾病的新型标记物。活内的外泌体动态（哪个外泌体迁移至何处）也会成为今后需要努力研究的重要课题。江西细胞外泌体染色PKH67/PKH26

1983年，外泌体初次于绵羊网织红细胞中被发现。江西细胞外泌体染色PKH67/PKH26

外泌体的提取主要包括以下几种方式：一是超速离心法，这是目前外泌体提取常用的方法 。此种方法得到的外泌体量多，但是纯度不足，电镜鉴定时发现外泌体聚集成块， 由于微泡和外泌体没有非常统一的鉴定标准，也有一些研究认为此种 方法得到的是微泡不是外泌体 。二是过滤离心， 这种操作简单、省时，不影响外泌体的生物活性 ，但同样存在纯度不足的问题。三是密度梯度离心法， 用此种方法分离到 的外泌体纯度 高，但是前期准备工作繁杂，耗时，量少。江西细胞外泌体染色PKH67/PKH26