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时间:2022年07月30日 来源:

2、HEPES缓冲液HEPES是一种非离子两性缓冲液,其在pH7.2~7.4范围内具有较好的缓冲能力,常用在体外诊断、DNA/RNA提取、脂质体药物等方面。①HEPES缓冲液优点:在开放式培养或细胞观察时能维持较恒定的pH值,并对细胞无毒性作用。②HEPES缓冲液缺点:在高浓度时对一些细胞可能有毒,与其他缓冲剂相比成本略高。二、Tris-HCl缓冲液与HEPES缓冲液的应用1、Tris-HCl缓冲液的应用Tris常用于蛋白或者核酸的缓冲液,其在电泳缓冲液中与甘氨酸构成缓冲体系,稳定电泳过程中的pH,由于其具有弱碱性,水溶液的pH在10.5左右,可通过添加HCl或者NaOH制备不同pH的缓冲液,根据缓冲理论,Tris缓冲液的有效范围通常是pH7.0-9.2之间。此外,Tris还可以制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物(磷霉素等)的中间物,在化妆品、医药、涂料以及合成中均有应用。应用于体内时,Tris作为一种不含钠的氨基缓冲碱,在体液中与H2CO3结合,生成碳酸氢盐。因此它能缓冲酸,而且能降低CO2张力,有纠正急性呼吸性酸中毒和代谢性酸中毒双重效果,其作用较碳酸氢钠快而强。了解更多氨丁三醇相关资讯,敬请关注AVT!福建药用辅料TRIS批发

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实际应用中各缓冲对组成的缓冲溶液都有比较好的缓冲范围。在实际生产过程中,如果选择的缓冲溶液缓冲范围与预期偏差较大,使用大量强酸/强碱或许可以强行将溶液pH调至预期值,但此时溶液体系的缓冲容量已消耗殆尽,无法起到应有的缓冲保护效果,对制剂产品后续的加工及长期储存稳定性造成影响。因此,要用好缓冲溶液,需对不同的缓冲溶液有具体的了解。以下介绍几种常见的缓冲溶液及用途,为大家深入理解缓冲溶液提供参考。艾伟拓氨丁三醇黑龙江登记号TRIS了解更多氨丁三醇相关资讯,敬请关注艾伟拓。

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制剂研发、医学检测,药物生产与保存以及分析实验等,几乎都需要缓冲溶液的参与才能正常进行,同时所需要的缓冲液又各有不同。因此对于制剂研发人员来说,只有掌握缓冲溶液的相关知识及用途,才能正确地根据实际需要选择一定浓度和pH值的缓冲溶液来使用。在选择缓冲溶液时,既要考虑它的毒性、稳定性、有效的缓冲范围,还要考虑所选缓冲溶液是否与主体物质反应、对主体物质的干扰性以及是否与主药发生配伍禁忌等。经过上述分析,在四种常见缓冲体系中,Tris-HCl缓冲溶液和HEPES缓冲液是较为理想的生物缓冲剂,在抗体药物,mRNA疫苗,脂质体药物等生物制剂中均有所应用,但都有一定的限制,制剂开发时需进行充分考量及比对。

该公司的研究指出,在携带mRNA的LNP生产过程中,需要使用不同手段降低加合物的生成,这可能带来多种益处,包括改善产品保质期,让产品能够在更高的温度下储存,并且维持产品的活性和制造批次之间的一致性。比如,Moderna指出使用Tris缓冲液可以减少加合物的生成,允许mRNA产品在2-8℃环境下的长期储存。相关反应机理概括如下:①已知核酸碱基可以与醛类物质发生反应②LNP组分中,可电离脂质的叔胺氮被氧化,形成大量N-氧化物③在酸性缓冲液中,N-氧化物降解生成二级胺和醛④醛类物质与mRNA分子的碱基发生反应(反应机理详见①),影响mRNA分子的稳定性及蛋白翻译水平。⑤TRIS作为一种醛类清除剂,可以与生成的醛类物质反应,降低mRNA碱基与醛类物质发生反应值得一提的是,TRIS作为甲醛清除剂,已有较为***的应用,且不限于生物医药领域。更多tris相关资讯,敬请关注艾伟拓!

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使用Tris缓冲液时的注意事项:1.Tris缓冲液的pH值受温度和浓度影响很大,因此在配制过程中要考虑使用环境;2.Tris在一定程度上与各种分子反应,包括RNA酶抑制剂,醛,酶,DNA以及常见金属如Cr3+,Fe3+,Ni2+,Co2+和Cu2+等,可以和重金属一起作用,但在有些系统中也起抑制作用;3.易吸收空气中的CO2,配制的缓冲液要注意盖严密封;4.对某些pH电极发生一定的干扰作用,需使用与Tris缓冲溶液具有兼容性的电极;5.Tris不适用于二喹啉甲酸(BCA)测定;6.吸入,摄入,皮肤吸收可造成伤害,操作时需戴好手套和护目镜。除了Tris-HCl之外,Tris还有多种衍生缓冲液:TBS=Tris-HCl+NaCl+KCl,常用于清洗免疫染色的组织或WesternBlotting中的蛋白印迹膜等;TBST=Tris-HCl+NaCl+tween20,做WesternBlotting中常用的一种洗膜缓冲液;TE=Tris-HCl+EDTA,对DNA的碱基有保护性,常被用于DNA的稳定和储存;TAE=Trisbase+乙酸+EDTA,是大片段DNA短时间电泳时***使用的缓冲系统;TBE=Trisbase+硼酸+EDTA,适用于长时间DNA电泳,对较小片段分离效果较好。福建药用辅料TRIS批发

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