广东组织样本外泌体载药实验咨询问价

时间:2022年10月25日 来源:

mRNA也可以作为“货物”被外泌体运输。利用多泡体(含外泌体)负载mRNA/蛋白进行中流zhiliao的研究。研究者们利用脂质体2000或病毒载体对HEK-293细胞进行转染,使其分泌的多泡体含有mRNA/蛋白(CD-UPRTEGFP,其中CD:胞嘧啶脱氨酶;UPRT:尿嘧啶磷酸核糖转移酶;EGFP:增强型绿色荧光蛋白)。将此多泡体注射至小鼠的神经鞘瘤处,并辅助注射5氟尿嘧啶(5-FC),神经鞘瘤的增长被明显抑制。这主要是由于CD和UPRT可以将5-FC转化为5氟尿嘧啶脱氧核苷酸(5-FdUMP),而后者又是胸甘酸合成酶的抑制剂,可以抑制脱氧胸甘酸的合成,从而起到抑制DNA的合成以及促进中流细胞凋亡的效果。Saydam等的研究表明多泡体/外泌体不jin可以有效输送mRNA/蛋白质,并且句有与其他抗ai药物联合zhiliao中流的潜力。负载姜黄素的外泌体可经外泌体转运通过血脑屏障, 运送到脑组织中, 减轻氧化应激,维持脑血管屏障功能。广东组织样本外泌体载药实验咨询问价

大分子蛋白类药物可以通过以下方法进行外泌体载药。Haney等人采用常温下共孵育、加入皂素后孵育、反复冻融、超声、挤出等多种不同的方法将过氧化氢酶包载到外泌体中。结果显示,外泌体通过超声和挤出两种方式句有较高的载药量,分别为26.1%和22.2%,通过被动扩散方式的载药量jin为4.9%,但当加入句有透皮促进作用的皂素后,外泌体的载药量会明显提高至18.5%。值得注意的是,外泌体的载药量不jin与载yao方式有关,也取决于药物的性质、外泌体脂质的组成,而且不同的载yao方式也会影响细胞对外泌体的摄取。江西动物血液样本外泌体载药参考价格使用ADSC外泌体装载姜黄素可增强抗肝ai的效应。

间充质干细胞(MSC)的外泌体成为有潜力的天然药物递送载体的优势:与其他来源外泌体的产生机制一致,即首先由细胞质膜内陷形成内体,然后内体向内出芽形成多泡体,而多泡体具有两种命运,一种是移动到细胞表面与质膜融合,以胞吐的方式将外泌体释放到细胞外;另一种是与溶酶体结合,将内容物降解。MSC-Exo具有外泌体的共同特征,即富含四跨膜蛋白CD9、CD63、CD81,整合素,主要组织相容性复合物Ⅰ、Ⅱ,热休克蛋白,多泡体合成相关蛋白(ALIX、TSG101),核酸,胆固醇、磷酸甘油酯、鞘磷脂等。此外,MSC-Exo还具有特异性标志物,例如,CD29、CD90、CD73和CD44等。MSC-Exo具有与MSCs相似的生物学功能,而且避免了细胞移植的风险,易于获取、储存和管理;可控性高、免疫原性低、安全性好。

外泌体的提取方法在外泌体载药系统中应用——免疫亲和层析法。利用生物体内存在的抗原、抗体之间高度特异性的亲和力进行分离的方法,主要用于生物大分子的分离、纯化。将其应用于外泌体的分离主要是借助外泌体表面的特异性抗体,如TSG101或四跨膜蛋白。此方法的原理是利用抗原抗体的特异性结合,只有囊泡表面有特异性的抗体才可以被识别,这使得提取的外泌体纯度高,但是产量低。分别用超速离心、密度梯度离心和免疫层析法,从血浆和细胞上清中提取外泌体蛋白,结果表明,免疫亲和层析法得到的外泌体表面存在多种标记蛋白(Alix、CD9、CD63),同时,ELISA和PCR结果也证明了该方法的可行性。包载厚朴酚的外泌体比游离厚朴酚有更高的zhiliao功效,可改善细胞摄取从而提高抗中流功效。

外泌体的提取方法在外泌体载药系统中应用——聚合物沉淀法。用于分离病毒和其他的生物大分子,已有50多年历史,近几年,将其作为一种新的方法来分离外泌体。目前,市场已经有应用聚乙二醇(polyeth yleneglycol,PEG)溶液提取外泌体的试剂盒,常见的是SystemBiosciences公司的ExoQuick®和ExoQuick-TC®kits,该试剂盒操作简单不需要特殊的仪器,但是价格昂贵。提取外泌体的试剂盒主要成分是PEG8000(30%~50%),将试剂盒与体液或细胞培养液4℃孵育过夜,之后再低速离心。即可进行外泌体的提取,此方法实行起来较为简单。外泌体外源性载yao方式是将外泌体从供体细胞中分离纯化,后将药物通过适宜的方法导入外泌体内实现载药。广东组织样本外泌体载药实验咨询问价

外泌体作为药物载体可以载带多种蛋白质,实现靶向给药和稳定酶活性等目的。广东组织样本外泌体载药实验咨询问价

平阳霉素对多种ai细胞有有效的抑制作用。使用乳腺ai来源的外泌体装载平阳霉素作用于乳腺ai中流干细胞,观察其对乳腺ai中流干细胞活力和侵袭能力的影响。结果表示,随着平阳霉素浓度增加,细胞活力逐渐下降,并且搭载平阳霉素外泌体对细胞活力的抑制作用更佳。相比于直接用平阳霉素处理细胞,用外泌体装载的平阳霉素对乳腺ai中流干细胞的细胞活力具有更好的抑制效果。因此,载药外泌体具备有效降低乳腺ai中流干细胞恶性生物学行为的潜力。广东组织样本外泌体载药实验咨询问价

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