湖南外泌体TEM

妊娠期间胎盘可释放外泌体到全身循环系统，参与妊娠期间母胎界面的免疫调节、子宫螺旋动脉重塑和胎盘屏障的形成等重要事件调控，在正常妊娠过程维持中发挥重要作用。而很多妊娠并发症，如子痫前期等胎盘功能紊乱相关疾病的发生，很可能与胎盘来源外泌体异常密切相关。目前外泌体分离方法主要包括：多步差速离心、蔗糖密度梯度离心、试剂盒沉淀、免疫磁珠分选、色谱法、过滤离心等方法。其中，多步差速离心是制备外泌体的经典方法，该方法是根据外泌体的沉降系数差速离心将其分离出来，然而妊娠期母血清中除含有胎盘组织释放的外泌体，还包括许多其他种类细胞释放的外泌体，如树突状细胞、淋巴细胞等，且血清中可能还存在一些大小类似的物质混杂其中，这些因素都会影响胎盘来源外泌体的分离纯化。在裸鼠模型中皮下注射人脐带血间充质干细胞来源外泌体，可增加体内和梗死区周新生血管，保护心脏功能。湖南外泌体TEM

利用蛋白质免疫印迹和酶联免疫吸附分析技术可以对外泌体标志性蛋白质进行定性定量分析。其中蛋白免疫印迹是外泌体的经典表征手段之一，操作时往往需要细胞裂解液作为阴性对照。常用的外泌体标志性蛋白质包括四跨膜蛋白质CD63、CD81、CD9、中流易感基因101蛋白(TSG101)、水通道蛋白2(AQP2，尿液中)和凋亡诱导因子6相互作用蛋白(Alix)等，内参蛋白质可以是肌动蛋白(βActin)或甘油醛－3-磷酸脱氢酶，阴性对照蛋白可以是阻抑素(PHB，线粒体标志蛋白)或钙联结蛋白Calnexin。在酶联免疫吸附析法中，外泌体裂解液通过固载有抗体的固相基质，随后与检测抗体共孵育。两种方法均存在操作繁琐、耗时长的问题，相比较而言，酶联免疫吸附分析法比蛋白质免疫印迹法更加快速，适用于高通量分析。河北外泌体分离在选择外泌体作为中流诊断与预后监测的分子标志物时应考虑到中流异质性的发生机制。

间充质干细胞存在于骨髓、脂肪、脐血、牙髓、滑膜液等部位，是一种能够自我更新的多功能干细胞。间充质干细胞通过旁分泌的形式发挥其生理功能，而外泌体作为一种细胞间传递信息的介质，在间充质干细胞的功能行使中发挥了重要作用。研究发现间充质干细胞来源的外泌体能够修复组织损伤、抑制中流生长和调节免疫响应，具有zhiliao心肌梗死、自身免疫疾病、阿尔兹海默症等疾病的潜力。另外，也有研究显示间充质干细胞来源的外泌体会促进某些中流生长。

唾液中包含来自于唾液腺上皮体外细胞的外泌体，Michael等从唾液中提取外泌体，并对唾液外泌体中的miRNA进行分析，发现此类miRNA有望作为成为唾液腺疾病的生物标志物。Wu等成功从汗液中提取得到外泌体，并进行蛋白质组学分析，在汗液外泌体中鉴定到1062种蛋白质，其中包含多种抗jun肽和免疫因子，表明汗液外泌体参与皮肤免疫。Liu等从患有阿尔兹海默症患小鼠的脑脊髓液中提取得到外泌体，并与野生型小鼠进行对比，发现实验组miR-193b明显下调。外泌体的形成始于细胞内陷，成熟于多囊泡胞内体，终于膜融合。

Knepper等通过对透射电镜得到的200个囊泡进行粒径分析，结果表明尿液中外泌体的粒径分布约为35～40nm，磷脂双分子层厚度约为直径的1/5～1/10。透射电镜结合免疫金标记法能够得到外泌体表面特征分子的信息，有助于揭示外泌体的产生机制与来源。动态光散射(dynamiclightscattering，DLS)和纳米颗粒跟踪分析(nanoparticletrackinganaly[1]sis，NTA)都是利用光学手段获得囊泡粒径分布的方法。两者的不同之处在于动态光散射通过检测散射光的强度计算得到颗粒粒径，而纳米颗粒跟踪分析通过追踪单个粒子的运动轨迹计算得到样品浓度、粒径分布等信息。外泌经核内体途径产生，在一些类似核内体的质膜区域也可形成，但核内体起源是定义外泌体的常用标准。河北外泌体分离

目前，天然或者工程化修饰的外泌体被视为一种理想工具用于zhiliao一些难治性中流。湖南外泌体TEM

外泌体携带的与疾病进展紧密关联的分子标志物可用于疾病进展的监视、检测和诊断, 是一种潜在的非侵入性生物标志物。由于外泌体本身可以作为抗原提呈小泡, 且有较长的循环半衰期, 可用于免疫学相关研究, 同时, 源自ai细胞的外泌体可以被工程化, 发挥免疫刺激作用, 可作为中流疫苗应用于ai症的免疫zhiliao。此外, 外泌体稳定而广fan地分布在qi官和组织中, 具有低免疫原性、高耐受性等特点, 且良好的膜渗透性可使其通过血脑屏障, 因此可用作组织和qi官特异药物输送系统, 兼有高输送效率和低副作用。因此, 外泌体适合用作药物载体递送zhiliao剂(如阿霉素或姜黄素), zhiliao性miRNA、siRNA等核酸和蛋白质, 运送至靶位点后实现靶向zhiliao。湖南外泌体TEM

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