广州腹水外泌体

    接受抗逆转录病毒诊治的HIV感ran者出现慢性炎症的一个可能解释是，由于一种称为“训练有素的免役力”的现象，骨髓细胞反应过度。在这里，我们证明源自醉初用含有HIV-1蛋白Nef(exNef)的细胞外囊泡处理的单核细胞的人单核细胞来源的巨噬细胞，在没有exNef的情况下分化，在脂多糖刺激后释放增加水平的促炎细胞因子。这种效应与涉及炎症和胆固醇代谢途径的基因的染色质变化以及脂筏的上调有关，并被甲基-β-环糊精、他汀类药物和脂筏相关受体IGF1R抑制剂阻断。来自注射了exNef的小鼠以及移植了来自注射了exNef的动物的骨髓的小鼠的骨髓来源的巨噬细胞在受到刺激时会产生升高水平的肿瘤坏死因子α(TNF-α)。这些现象与exNef诱导的训练有素的免役力一致。 精ye经过长达30年的–80 °C冷冻保存, 其外泌体的形状、物理性质、 核酸蛋白含量和种类都无明显变化。广州腹水外泌体

研究采用蔗糖密度梯度离心联合2次PEG6000沉淀，极大地降低了外泌体的提取成本，且获得的外泌体不仅表达外泌体公认的标志蛋白分子，同时也表达胎盘特异性蛋白分子，证明通过这种方法获得的外泌体是胎盘来源外泌体。通过蔗糖密度梯度离心后得到的外泌体沉淀经蛋白质SDS-PAGE胶电泳，银染后可见各蛋白分子条带清晰可见，动态光散射分析粒径，结果显示获得的外泌体颗粒粒径大部分分布于28-91nm之间，与文献报道外泌体颗粒大小相一致。胎盘外泌体经过PKH67荧光染料染色后，与细胞共孵育，荧光显微镜下观察外泌体具备进入细胞的活性，进一步验证了我们应用此种改良的分离方法可有效的获得胎盘来源的外泌体。本研究通过蔗糖密度梯度离心联合2次PEG6000沉淀成功分离得到母体血清中胎盘来源外泌体，并从蛋白标志分子、电镜、粒径及分布、进入细胞活性四方面对其进行了鉴定，为研究妊娠期间胎盘外泌体在正常妊娠及胎盘源性并发症中的作用奠定了基础。黑龙江血清外泌体鉴定外泌体介导的分化在zhiliao组织损伤中发挥着重要作用。

    细胞衍生的小细胞外囊泡(sEV)具有抗ai作用。然而，应加强它们的抗ai潜力以提高临床适用性。在此，我们从通过柔性接头在质膜上表达IL2的工程化JurkatT细胞生成了IL2-tetheredsEVs(IL2-sEVs)，以诱导自分泌效应。IL2-sEVs在不影响调节性T(Treg)细胞的情况下增加CD8+T细胞的抗ai能力，并下调黑色素瘤细胞中的细胞和外泌体PD-L1表达，导致它们对CD8+T细胞介导的细胞毒性的敏感性增加.它对CD8+T细胞和黑色素瘤细胞的作用是由几种IL2-sEV驻留microRNAs(miRNAs)介导的，它们的表达被IL2的自分泌作用上调。在miRNA中，miR-181a-3p和miR-223-3p显着降低了黑色素瘤细胞中的PD-L1蛋白水平。有趣的是，miR-181a-3p在抑制Treg细胞活性的同时增加了CD8+T细胞的活性。IL2-sEVs抑制携带黑色素瘤的免疫活性小鼠的肿瘤进展，但不抑制免疫缺陷小鼠的肿瘤进展。IL2-sEVs与现有抗ai药物的组合通过降低体内PD-L1表达显着提高了抗ai疗效。因此，IL2-sEVs是潜在的CA免疫诊治剂，可通过重新编程miRNA水平来调节免疫细胞和ai细胞。

除了siRNA和miRNA，mRNA也可以作为“货物”被外泌体运输。研究表明，在移植了人肺中流的小鼠模型的血液和唾液中分离出来的外泌体含有中流细胞特异性的mRNA，而被爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)感ran的细胞分泌的外泌体中也含有EBV的潜伏期mRNA。因而，外泌体的这种运载mRNA的能力引起了中流研究者们的注意。近期，Saydam等率先报道了利用多泡体(含外泌体)负载mRNA/蛋白进行中流zhiliao的研究。研究者们利用脂质体2000或病毒载体对HEK-293细胞进行转染，使其分泌的多泡体含有mRNA/蛋白(CD-UPRT EGFP，其中CD:胞嘧啶脱氨酶;UPＲT:尿嘧啶磷酸核糖转移酶;EGFP:增强型绿色荧光蛋白)。将此多泡体注射至小鼠的神经鞘瘤处，并辅助注射5氟尿嘧啶(5-FC)，神经鞘瘤的增长被明显抑制。不同肝脏疾病中，细胞分泌的外泌体所携带的核酸和蛋白组分之间存在差异。

外泌体运输的基因类药物也可以是miRNA，miRNA是一类非编码的内源性RNA，主要用于调节转录后的基因表达。miRNA主要通过与mRNA的未翻译的区域(UTRs)结合起到抑制基因表达和降解mRNA的作用。与siRNA不同，miRNA抑制mRNA的表达不需要完美的碱基配对，因此每种miRNA可以抑制多种蛋白质的表达，而每种siRNA只针对一种蛋白质。miRNA的运载也存在着种种挑战:miRNA体内稳定性差、生物分布不理想、易被体内酶降解以及容易引起副反应等。越来越多的研究表明外泌体也是体内运载miRNA的优良载体，并且利用外泌体运输miRNA的zhiliao方法已经在许多疾病模型中得以应用。细胞外小泡主要包括凋亡小体、微泡和外泌体三类，而外泌体是目前人们广fan关注的一类细胞外小泡。湖北血浆外泌体染色

在裸鼠模型中皮下注射人脐带血间充质干细胞来源外泌体，可增加体内和梗死区周新生血管，保护心脏功能。广州腹水外泌体

自身免疫性疾病(ADs)是一组由免疫系统攻击自身organ或组织，导致免疫复合物形成和沉积的慢性炎症性结缔组织疾病，其病因和发病机制尚不明确，目前认为与遗传易感性、环境因素和免疫失调有关。外泌体是由脂质、蛋白质和核酸组成的球形脂质双分子层囊泡，通过囊泡转运系统传递信号分子调控靶细胞的功能和形态，从而参与细胞凋亡或增殖、细胞因子产生等多种生物学过程。近年来，大量研究表明外泌体主要通过调节靶细胞的功能来介导细胞间的通讯，促进ADs的发sheng发展。相反，得益于外泌体特殊的生物学特性，例如膜结合能力强，稳定性好，避免免疫排斥反应等，它还可以用作ADs的生物标志物和药物递送载体，在ADs的诊断和诊治中具有一定的应用价值。   广州腹水外泌体

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