江西CD63外泌体慢病毒

时间:2023年02月01日 来源:

    在这项研究中,研究人员检测了内皮细胞衍生的EV对缺氧-葡萄糖剥夺(OGD,模拟人类中风的神经元缺血再灌注损伤)后的神经元的影响。在人脐带内皮细胞(HUVEC)-神经元共培养测定中,研究发现HUVEC减少了OGD下神经元的凋亡,并且这种作用被外泌体释放抑制剂GW4869削弱。纯化的EV可被神经元内化并减轻OGD作用下的神经元凋亡。miRNA-1290在HUVEC衍生的EV中高度富集,并在OGD下负责EV介导的神经元保护。OGD可以增强体外培养的神经元对EV的摄入。对EV摄入受体的表达检测结果显示,在OGD处理的神经元和中脑动脉阻塞(MCAO)的小鼠中,caveolin-1(Cav-1)表达上调。抑制神经元中的Cav-1表达能够减少EV的摄入,并抑制了OGD下EV介导的神经元保护。HUVEC衍生的EV可减轻MCAO诱导的体内神经元凋亡。这些发现表明,缺血可能会上调神经元中Cav-1的表达,从而增加神经元对EVmiRNA-1290的摄入,醉终通过减缓凋亡来保护神经元。 外泌体是由细胞分泌而来的微小囊泡,直径约为30-200 nm,密度在1.13-1.21g/ml,具有杯状形态、双层膜结构。江西CD63外泌体慢病毒

细胞外囊泡(EVs)因其生物相容性、大小适宜、体循环中保存时间长和低免疫原性等优势,在生物医学应用中得到了普遍的应用。研究发现EV比普通的细胞膜囊泡更有优势。EV的优势在于,由于其表面的跨膜蛋白(如MHC复合物)数量减少,它们的免疫原性低于其宿主细胞膜,具体的多少取决于它们的细胞来源。凋亡小体、微泡和外泌体是根据EV的生物成因进行分类的。当胞内体的膜向内萌发形成外泌体时,就产生多泡体(MVB)。当MVBs与质膜融合时,外泌体被释放到细胞外空间。一旦从细胞表面释放出来,外泌体能够与细胞外基质相互作用,或在微环境内外引发反应。将RNA和蛋白质引入外泌体,并将其定向到身体特定区域的方法仍在开发中。外泌体被认为是一种合适的药物传递系统,因为蛋白质和遗传物质都可以装载到其中。脑脊液外泌体融合实验外泌体的异质性可以根据其大小、含量(载物)、对受体细胞的功能影响以及细胞来源来区分。

    外泌体的异质性包括:大小异质性、含量异质性、功能异质性和细胞来源异质性。尺寸不等可能是由于MVB界膜内陷不均匀,导致液体和固体的总含量不同,外泌体可能包含由不同大小范围定义的亚群。大小异质性也会导致不同量的外泌体含量;微环境和细胞固有的生物学可能影响外泌体的含量及其生物学标志物。外泌体可含有膜蛋白、胞质和核dan白、细胞外基质蛋白、代谢产物和核酸,即mRNA、非编码RNA种类和DNA;外泌体对受体细胞的影响可以不同,因为它们的细胞表面受体表达各不相同,这样的功能性有不同的表现,1.诱导细胞存活,2.诱导细胞凋亡,3.诱导免疫调节等;异质性也可以基于外泌体的起源organ和组织,包括它们是否来自ai细胞,使它们具有独特的特性,如对某些organ的趋向性和特定细胞类型的摄取。所有这些特征的组合将有可能引起更高阶的复杂性和外泌体的异质性。

    研究认为,在外泌体中可以发现少量的DNA,这种DNA可以对检测血清外泌体中CA相关突变有价值,外泌体中特定的miRNA或miRNA组可能在CA的检测中提供诊断或预后潜力。外泌体中的致ai和抑aimiRNA可能具有较高的诊断价值,因为它们在ai细胞和正常细胞之间的差异表达,可能增强它们在早期诊断中的有用性,致aiKras被报道在外泌体中差异富集miR-100,循环中外泌体miR-21升高与胶质母细胞瘤和胰腺ai、结直肠ai、结肠ai、肝ai、乳腺ai、卵巢ai和食管ai相关,尿源性外泌体miR-21升高与膀胱ai和前列腺ai相关。其他与多种CA类型相关的外泌体致aimicroRNA包括miR-155、miR-17-92簇和miR-1246。在脑、胰腺、结直肠、结肠、肝脏、乳腺、前列腺和食管ai;口腔鳞状细胞ai;以及淋巴瘤和白血病中观察到上调。tumour抑制miRNA,包括miR-146a和miR-34a,与肝脏、乳腺、结肠、胰腺和血液恶性tumour相关。 示踪病毒使用CD81作为生物标记,通过将CD81与荧光蛋白偶联,带荧光的膜蛋白会在表达至外泌体膜上。

    细胞分泌携带细胞源标记的细胞外囊泡(EV)与周围细胞进行通信。细胞外囊泡调节从细胞间信号传导到废物管理的生理过程。然而,当衰老细胞(SnC)分泌EVs时,EVs这种新近被认为与衰老相关的分泌表型(SASP)因子可以引起邻近细胞的炎症、衰老诱导和代谢紊乱。与其他可溶性SASP因子不同,尚未研究源自SnC的EV(包括小型EV(sEV))的生物物理特性。在这项研究中,sEVs是从人IMR90肺成纤维细胞体外衰老模型中提取的。使用基于原子力显微镜的定量纳米力学技术、表面电位显微镜和拉曼光谱绘制了它们的生物力学特性。源自SnC的sEV表面稍硬,但它们的核xin比非衰老细胞(non-SnC)分泌的sEV的核xin更软。变形和刚度之间的这种反比关系,分别归因于囊泡内遗传和蛋白质材料浓度的降低以及带正电的SASP因子在囊泡表面的吸附,分别被发现是SnC衍生的独特特征细胞外囊泡。我们的研究结果表明,SnC衍生的sEV的生物力学特性不同于非SnC衍生的sEV,并提供了对其形成和组成潜在机制的深入了解。 对分离提取的外泌体进行鉴定的经典方案有:NTA分析、电镜分析、蛋白标志物鉴定等。江西组织外泌体

外泌体被包裹在坚硬的双层膜中,双层膜保护外泌体的内容物,使外泌体能够在组织中长距离移动。江西CD63外泌体慢病毒

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