唾液外泌体蛋白质组学
将诊疗性RNA加载到细胞外泌体中——RNA疗法与锌指或CRISPR疗法相比具有明显的优势,因为RNA通过内源性细胞通路以瞬时方式发挥作用并且是可编程的,因此相对容易针对特定疾病进行工程改造,并且通常不具有免疫原性。已经发现和研究了具有生物学功能和诊疗潜力的各种RNA生物型,例如小干扰RNA(siRNA),从而导致了新型诊疗药物的开发。RNA可用于赋予短期瞬态和长期表观遗传沉默,这是基于目标,例如,靶向基因启动子可以诱导转录基因沉默。值得注意的是,基于mRNA的疫苗现在也被有效地用于对抗COVID-19大流行。然而,尽管诊疗性RNA可以快速改变和产生,但它们必须达到预期目标才能有效。例如,Pfizer-BioNTechCOVID-19疫苗中使用了脂质纳米颗粒(LNP)并用于诊疗针对肝脏的多发性神经病,但这些方法可能具有细胞毒性,在循环中不稳定,并且不适合输送到其他组织。此外,基于RNA的药物的细胞和亚细胞递送也是一项艰巨的挑战,只有不到1%的有效载荷到达细胞的胞质溶胶。潜在地,将这些RNA包装到天然携带RNA的细胞外泌体中,可能是一种更安全且更具生理针对性的方法。因此,已经进行了多种尝试以将RNA整合到细胞外泌体中并优化包装和释放效率。 依靠外泌体模拟物代替外泌体进行药物运输可以有效解决外泌体产量不足、提纯耗费时间的问题。唾液外泌体蛋白质组学
外泌体的生物发生的研究相对较多,但仍有许多细节有待阐明,特别是如何利用外泌体产生的不同机制来产生异质的囊泡亚群。外泌体摄取的方式也得到了相对较好的探索,许多不同的途径涉及囊泡的大量内化。目前比较大的未知数是外泌体如何穿越供体和受体细胞之间的物理间隙的细节,以及一旦内化,外泌体的货物如何以能够发挥功能的方式传递利用。此外,需要强调的是,生物货物的水平转移不应总是被视为外泌体分泌的主要功能,也应考虑外泌体其他功能(包括受体细胞表面的信号传导、营养支持、过时细胞材料的清厨和间质液或细胞外基质的调节),但这些仍然相对缺乏研究。体液外泌体small RNA测序外泌体大小不均的原因可能是由于MVB的限制膜不均匀内陷,导致流体和固体的总含量不同。
外泌体与免疫反应、病毒致病性、妊娠、心血管疾病、CNS系统相关疾病和CA进展有关。外泌体递送到受体细胞的蛋白质、代谢产物和核酸有效地改变了它们的生物学反应。这种外泌体介导的反应可能是疾病促进或抑制。外泌体在调节复杂的细胞内通路中的内在特性推进了其在许多疾病的诊治控制中的潜在效用,包括神经退行性疾病和CA。外泌体可以被改造成递送不同的诊治有效负荷,包括短干扰RNA、反义寡核苷酸、化疗药物和免疫球蛋白。外泌体的脂质和蛋白质组成可影响其药代动力学特性,其天然成分可能在增强生物利用度和醉小化不良反应中发挥作用。外泌体除了具有诊治潜力外,还具有帮助疾病诊断的潜力。它们在所有的生物体液中都有报道,通过生物体液的采样(液体活检)很容易获得外泌体复杂物质的组成。基于外泌体的液体活检突出了其在诊断和确定CA和其他疾病患者预后方面的潜在效用。疾病进展和诊治反应也可以通过外泌体的多组分分析来确定。
外泌体是生物来源的膜结合纳米级囊泡,已知含有各种分子,例如蛋白质、脂质和核酸,它们有助于外泌体介导细胞间通讯的能力。人工纳米颗粒在药物输送中的醉新障碍,包括低细胞摄取、免疫系统激huo和组织障碍,已促使科学家将外泌体设计为药物输送载体。尽管外泌体具有稳定性、生物相容性、低免疫原性和跨越生物屏障的能力等固有特性,但仍需要开发能够将诊治材料有效装载到外泌体中的技术。在这里,我们介绍了一种简单的肽装备技术,可以在温和的装载环境中增强外泌体的货物装载潜力。具体而言,一种已知的细胞穿透肽YARA,源自人类免疫缺陷病毒-1转录反式激huo因子,与哺乳动物microRNAmiR-21-5p共价结合。然后将缀合物YARA-miR-21-5p与从间充质干细胞或ai细胞中分离出来的外泌体一起孵育,以进行加载。YARA-miR-21-5p的外泌体加载具有时间依赖性,并且通过孵育证明miR-21-5p的外泌体加载效率提高了倍。在有效的细胞摄取后,负载的外泌体迅速将YARA-miR-21-5p递送到哺乳动物细胞中。相对于未加载的外泌体和游离的YARA-miR-21-5p,加载的外泌体显着增强了人和小鼠成纤维细胞的增殖、迁移和侵袭,这是伤口愈合的重要步骤。 干细胞外泌体因在上皮组织的增殖、迁移、再生、炎症和瘢痕控制等方面的作用。
三阴性乳腺ai(TNBC)标准护理诊治临床指南推荐将免疫检查点抑制剂(ICI)与蒽环类药物联合使用的策略。尽管如此,一些基本的临床原则仍有待阐明以实现良好的诊治效果,包括CA归巢传递效率和顺序间隔制度。tumour来源的细胞外囊泡(TDEV)作为tumour内细胞间通讯的载体,可以包裹诊治剂和tumour。然而,TDEVs中的PD-L1过表达导致体内循环过程中的全身免疫抑制,醉终抑制瘤内T活性。在本研究中,CRISPR/Cas9编辑的Pd-l1KOTDEV-融合蒽环类多柔比星(DOX)脂质体具有高药物包封率(97%),可将DOX同源递送至乳腺ai细胞以****原性反应并诱导PD-L1在tumour中过度表达。通过设置使tumour对ICIs敏感的阶段,用二硫键连接的PD1交叉锚定的TDEVs纳米凝胶以一tian的间隔连续诊治可以在tumour中持续释放PD1,引发高比例的效应T细胞介导的原位和在携带4T1的TNBC小鼠模型中没有脱靶副作用的转移性tumour。这种TDEV串联增强化学免疫诊治策略具有高效的CA归巢传递能力和优化的顺序间隔机制,为在临床水平上开发用于TNBC诊治的化学免疫诊治制剂奠定了坚实的基础。 外泌体miR-151a可以预测GBM对替莫唑胺的化疗反应,且有希望成为难治性GBM的zhiliao靶点。上海组织外泌体western blot
外泌体表面具有特定的蛋白标志物,其内含物也极为丰富。唾液外泌体蛋白质组学
胆管ai(CCA)是一种致命性疾病,通常在无法切除的晚期才被发现。目前,还没有有效的诊断方法或生物标志物可以高可信度地早期检测CCA。分析从液体活检中获取的tomour来源的细胞外泌体为实现这一目标提供新的机会。在这里,报告了一种先进的纳米等离子体传感技术,称为FLEX(荧光放大细胞外囊泡传感技术),用于灵敏和稳健的单外泌体分析。在FLEX测定中,外泌体被捕获在等离子体金纳米孔表面上,并针对CA相关生物标志物进行免疫标记以识别t外泌体。底层等离子体金纳米孔结构然后放大外泌体的荧光信号,这是单个外泌体水平的有效放大过程。FLEX外泌体分析揭示了细胞外泌体及其标记水平的普遍异质性。FLEX还检测到由于信号微弱而无法通过传统外泌体荧光成像检测到的小型t外泌体。tomour标志物(MUC1、EGFR和EPCAM)在CCA中被识别,这种标志物组合用于检测临床胆汁样本中的t外泌体。FLEX测定法检测到CCA,曲线下面积为,明显优于目前的临床标志物。灵敏准确的纳米等离子体外泌体传感技术有助于早期CCA诊断。 唾液外泌体蛋白质组学
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