湖北外泌体载药技术原理
外泌体递送系统的靶向给yao方式分为被动靶向和主动靶向两种。被动靶向给药,多采用局部给yao方式实现,包括局部注射、鼻腔给药、生物材料局部植入等。主动靶向给药的相关研究很少见。jin有YUAN等人利用血一脑屏障在病理和生理条件下的特性,实现载带脑源性神经营养因子的外泌体递送系统在全身给药条件下脑部主动靶向。因被动靶向的靶向效率明显低于主动靶向,且临床实际更需要的是可以实现精zhun靶向给药、减少非靶组织和qi官伤害的主动靶向给药,故载带外源性蛋白质外泌体主动靶向给药将是研究的主要方向。外泌体可负载小分子化学药物、基因药物用于zhiliao中流及阿尔茨海默症等疾病。湖北外泌体载药技术原理
外泌体载药评估载药完成后,还需要对EVs载药效果进行评估,包封率(encapsulationefficiency)、载药量(loadingcapacity)、阳性率等都可以用于EVs载药评估。包封率包封率指的是成功加载到EVs的药物量与投入制备体系中药物量的比值,是评估药物利用率的重要指标。不同的药物采用不同的装载方式,其包封率往往不同,此外,选择不同的检测方法,计算出的包封率也可能存在差异。计算公式:包封率(%)=(装载药物量/投入药物量)×100%载药量载药量指的是单位EVs(或单位数量EVs)所负载的药物量,载药量越高,后期给药时所需的EVs就越少。根据装载药物的不同,载药量的单位存在差异,负载药物总量的单位可以是摩尔数、质量、拷贝数等。例如,EVs负载siRNA时,载药量通常用copies/EV表示。阳性率阳性率指的是成功装载药物的EVs与投入制备体系中总EVs的比值,是评价EVs载药效率的重要指标。阳性率与载药量相结合,可以对EVs载药进行较为全mian的评价。计算公式:阳性率(%)=(装载药物的EVs量/总EVs量)×100% 湖北外泌体载药技术原理外泌体载药系统的临床转化研究与非临床研究具有一定的差异。
外泌体直接载yao方式包括皂苷处理法、孵育法、冻融循环法、超声法和挤出法等。皂苷处理法指共培养外泌体、药物和皂苷溶液,然后通过透析膜、色谱柱纯化得到载药外泌体的方法。孵育法指药物和外泌体在适宜的条件下共培养。冻融循环法是经过冷冻、融化过程使外泌体包裹药物。超声法利用超声波使药物进入外泌体中,挤出法利用挤出机实现外泌体载带药物。其中皂苷辅助药物装载方法是直接载yao方式中常用的一种载yao方式。上述方法也存在一些缺点:孵育法操作简单,但载药量低;冻融循环法、超声法和挤出法对仪器的要求高,且可能会破坏外泌体的质膜结构造成药物泄露,终造成载药量不理想。
外泌体的提取方法在外泌体载药系统中应用——尺寸排阻色谱法。尺寸排阻色谱法时外泌体提取的一种方法,利用分子筛理论,开始是根据蛋白质分子大小分离蛋白质的色谱技术。该方法的主要优点是不需要很大的离心力,从而保证了外泌体的完整性。对比超高速离心和尺寸排阻色谱法得到的外泌体蛋白,结果显示, 尺寸排阻色谱法得到的外泌体的蛋白丰度高于超高速离心法。这些基于过滤或尺寸排阻色谱的新方法为外泌体大规模的生产和临床应用提供了可能。超滤也是根据外泌体的尺寸将其分离出来的一种方法,超滤一般被认为是外泌体分离过程中的一个准备过程,通过超滤除去大分子和小分子的蛋白质。不过连续的超滤可以分离出外泌体,和超高速离心相比,超滤不需要特殊的设备就可以较短时间内分离出外泌体。但是,超滤膜对外泌体的黏附作用会降低外泌体的产量,并且超滤过程中施加的外力可能会使外泌体变形或者破裂。许多抗ai药物、基因药物及抗yan药物均可载入外泌体中。
中流坏死因子相关凋亡诱导配体(TNFrelatedapoptosisinducedligand,TRAIL)能够在多种中流细胞中诱导选择性凋亡,而对正常细胞无毒性作用,已经成为临床前研究中有发展前景的抗中流药物之一。Shamili等人利用非病毒载体将编码TRAIL-GFP的质粒载入间充质干细胞(MSCs)。研究结果表明,MSCs衍生的负载TRAIL的外泌体(Exo TRAIL)通过促使ai细胞大量坏死抑制黑色素瘤进展,并且其抗中流活性呈现剂量依赖性。间充质干细胞外泌体(MSC-Exo)还能够通过递送内源性或者外源性的miRNA或蛋白质,zhiliao其他多种中流。将药物载入外泌体的方法主要有两种:前转载和后转载。河南组织样本外泌体载药价格比较
外泌体载药药物载入方式多种多样,包括被动方式和主动方式两类。湖北外泌体载药技术原理
外泌体是细胞分泌的一类膜性囊泡,直径一般在30-150 nm之间,能携带蛋白质,核酸,脂质等多种醉重要的生物信息。几乎所有类型的细胞都能分泌外泌体,于是外泌体成了细胞间传递信息的天然信使,发挥调控作用。基于外泌体本身的特性,在对其进行定向改造后,外泌体便具备了特异性的药物递送功能。细胞外泌体因其低毒性、高生物相容性、低免疫原性、靶向性等特点,已经成为备受关注的药物递送载体,用于各种小分子药物、核酸药物、蛋白质药物等的递送。湖北外泌体载药技术原理
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