浙江外泌体载药

外泌体载药系统一直是众多研究者关注的焦点。体内研究中, 利用鼠淋巴瘤细胞来源外泌体运载姜黄素, 干预脂多糖 (LPS) 引起的感ran性休克小鼠模型, 结果显示负载姜黄素的外泌体能明显抑制小鼠肺组织中CD11b+Gr-1+ 髓样免疫抑制细胞的募集, 表现出kang炎作用, 单纯使用姜黄素则对CD11b+Gr-1+ 细胞无明显效果。而对比姜黄素不同载体对LPS 诱发小鼠感ran性休克模型的zhiliao效果发现, 外泌体作为载体较脂质体载体zhiliao的小鼠存活率更高, 这可能与外泌体更易进入Gr-1+ 细胞相关。在小鼠模型中利用外泌体装载姜黄素和过氧化氢酶可证明其在神经保护方面的作用。浙江外泌体载药

利用外泌体进行体内药物递送时必须考虑以下因素：①外泌体和细胞之间相互作用的模式是否与所递送的zhiliao剂作用机制一致，是否会对所递送的zhiliao剂功效有所影响；②外泌体广fan参与了机体的生物过程，大量的外源性外泌体的存在可能会破坏内源性外泌体介导的细胞间通讯；③一些尚不明了甚至未知的机制可能会导致不良副作用，如外泌体表面蛋白质的脱靶信号转导，还有其他如ai基因和病毒miRNA，或朊病毒颗粒以及外泌体纯化过程中未能去除的可溶性颗粒因子等物质在外泌体中一起递送，均有可能产生不良副作用。提示纯化方案中采用严格的质控与安全性分析使这些复杂的影响因素小化，对体内和体外研究至关重要。江苏胎牛血清外泌体载药外泌体载yao方法-共孵育方法适用于亲脂类药物。

补阳还五汤 (BYHWD) 临床多用于中风、冠xin病等心脑xue管疾病, 以口服用药为主, 但有效物质吸收性较差。有研究利用大鼠MSC来源外泌体作为BYHWD有效成分的载体, 在采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型中进行腹膜注射, 结果显示负载BYHWD的外泌体组能激huo血管内皮生长因子 (VEGF), 上调miR-126表达, 并抑制miR-221/222表达, 促进缺血区新生血管的形成, 减轻缺血性脑损伤。其中miR-126能通过PI3K信号通路激huoVEGF与成纤维细胞生长因子从而介导血管生成, 而miR-221/222句有抗血管生成的作用。说明负载BYHWD的外泌体能通过调节相应miRNAs, 促进缺血区脑血管生成, 改善缺血症状。

通过体外实验结果得出，负载miＲ-132的间充质干细胞外泌体能够明显增加内皮细胞的管腔样结构;在体内实验中，外泌体预处理的人脐静脉内皮细胞具有更强的血管生成能力。此外，在小鼠缺血心脏中植入的包载miＲ-132的外泌体明显增强了梗塞周围区域新血管生成并保护了心脏功能。心肌梗死后，移植MSCs的zhiliao作用也可能是由负载miＲ-125b-5p的外泌体改善自噬流实现的。有研究利用重组腺病毒介导miＲ-486基因修饰MSCs，结果发现，其能够提高MSC-Exo中miＲ-486的水平，而且发现高表达miＲ-486的MSC-Exo具有促进心肌细胞增殖、迁移以及抑制心肌细胞凋亡的作用，有望成为心脏再生修复的新策略。外泌体载药后可以绕开Ｐ－糖蛋白，明显降低药物进入细胞后的外排作用。

抗ai症药物——阿霉素(DOX)已经成功被载入外泌体中，并对其抗中流作用进行了研究。在运输DOX的研究中，Wei等选择了已经在临床上使用的未成熟的树突细胞作为母代细胞，通过化学转染使其分泌的外泌体表面含有Lamp2b，这种蛋白可以与αv整合蛋白特异性iＲGD肽结合，使外泌体对DOX的运输句有靶向性。将对iＲGD肽靶向的外泌体和未经靶向性处理的外泌体用DiＲ染料标记，并分别静脉注射入移植了人乳腺ai细胞的小鼠体内，观察到靶向的外泌体在注射30min后已经出现在中流组织处，在注射2h后外泌体的含量高，而未经靶向性处理的外泌体在注射后主要集中在肝脏，几乎很少到达中流组织处，说明对iＲGD肽靶向的外泌体句有很好的靶向性。抗中流药物运输载体对中流的靶向性至关重要，靶向性强的载体可以大限度地把药物运输到中流处，发挥药物的作用。负载DOX的iＲGD肽靶向性外泌体对中流的抑制效果远优于单纯的DOX。药物载入到外泌体中的方式可分为两种，即外源性载yao方式和内源性载yao方式。天津动物组织样本外泌体载药实验咨询问价

外泌体外源性载yao方式是将外泌体从供体细胞中分离纯化，后将药物通过适宜的方法导入外泌体内实现载药。浙江外泌体载药

外泌体的提取方法在外泌体载药系统中应用——梯度密度离心法。外泌体的密度在1.1~1.19kg·L-1之间,因此,可以采用密度梯度离心法来分离外泌体。该方法是将超速离心结合蔗糖密度梯度或蔗糖垫结合,原理是先除去非囊泡物质,再通过梯度密度浓缩提取外泌体,该方法可以得到相对较为纯净的外泌体。传统的梯度密度方法通常需要离心16h,但是2012年,研究者使用了62~90h才分离出某些确切囊泡,因此,该方法可能不足以沉淀所有的外泌体。如果离心时间不充足,污染物质可能和外泌体保持在相同的密度层,特别是这个密度范围又比较宽。浙江外泌体载药