武汉核移植纺锤体揭示卵母细胞关键结构

纺锤体观测仪在补救ICSI中的应用

我们知道，成熟的卵母细胞排出***极体。IVF加入精子后，精子会穿透层层障碍**终进入卵子，随着时间的推移，卵子的纺锤体会将染色单体拉向两极，进而排出第二极体，再往后大约加精后9-16小时，雌雄原核会出现，而原核的出现才是受精的标志。但是对于那些没有受精的卵子，到了原核出现的时间窗，发现没有受精时再去补救ICSI，往往错过了卵子的比较好受精时间，因为没有受精的卵子会在体外老化，即使受精，胚胎的发育潜能也很低。所以，我们在加精后的4-6小时，通过观察第二极体的排出来初步判断是否受精，**的增加了那些受精障碍患者的受精率，也避免了卵子的老化。

当然，偶尔也会出现错误补救。文献报道对IVF受精后的未排出第二极体的卵母细胞进行ICSI补救，实验组用纺锤体观测仪观察并统计纺锤体的数目，82.7%含有一个纺锤体，17.3%含有两个纺锤体，并对含有一个纺锤体的卵母细胞进行补救ICSI；而对照组并未用纺锤体观测仪观察纺锤体，只对未排出第二极体的卵母细胞进行补救ICSI。结果发现，使用纺锤体观测仪观察纺锤体的数目能显著提高正常受精率，降低多原核受精比率。 纺锤体在细胞分裂中的功能受到严格的时间和空间控制。武汉核移植纺锤体揭示卵母细胞关键结构

冷冻与解冻过程中涉及多个环节，包括温度控制、时间控制、冷冻保护剂的添加与去除等。这些环节中的任何一步操作不当都可能导致纺锤体损伤。因此，需要不断优化冷冻与解冻技术，以减少对纺锤体的不良影响。近年来，研究者们通过不断尝试和优化冷冻保护剂的配方，取得了进展。例如，甘油、二甲基亚砜（DMSO）等渗透性保护剂被用于哺乳动物卵母细胞的冷冻保存中，它们能够迅速降低细胞内水分含量，减少冰晶形成。同时，一些非渗透性保护剂如蔗糖、海藻糖等也被发现对纺锤体具有一定的保护作用。昆明无损观察纺锤体Oosight Meta纺锤体在细胞分裂中的精确调控是生物体维持遗传稳定性的关键。

对于因疾病、年龄或其他原因可能失去生育能力的女性来说，MI期纺锤体卵冷冻技术提供了一种有效的生育能力保存方式。通过冷冻保存MI期卵母细胞并在适当的时候进行解冻和受精操作，可以实现生育愿望的延续。在辅助生殖技术中，MI期纺锤体卵冷冻技术可以用于提高试管婴儿的成功率。通过选择质量优良的MI期卵母细胞进行冷冻保存并在需要时进行解冻和受精操作，可以筛选出更具发育潜能的胚胎进行移植。MI期纺锤体卵冷冻技术还可以与遗传病筛查技术相结合，通过检测卵母细胞中的遗传物质来筛选出健康的胚胎进行移植。这有助于降低遗传病在后代中的发病率，提高出生人口的质量。

哺乳动物卵母细胞的纺锤体由微管组成，这些微管结构精细且高度动态，对温度、渗透压和机械力等外界因素极为敏感。在冷冻过程中，纺锤体容易因冰晶形成、渗透压变化或机械损伤而遭到破坏，导致染色体分离异常，进而影响卵母细胞的发育潜力和受精后的胚胎质量。选择合适的冷冻保护剂是减少纺锤体损伤的关键。然而，不同浓度的冷冻保护剂对纺锤体的影响各异，且不同哺乳动物种类之间也存在差异。因此，需要通过大量实验来优化冷冻保护剂的配方，以大限度地保护纺锤体的完整性。纺锤体微管的动态变化受到细胞周期蛋白的调控。

纺锤体生成

      在含中心体的细胞中，纺锤体的生成开始于细胞分裂前初期 - 即在细胞核膜分解(Nuclear Envelope Breakdown, NEB)之前。初期的结构为两个**的以中心体为核的星状体(asters)。当细胞核膜分解后，染色体和星状体发生一系列复杂的互动反应。**终结果为所有的染色体在纺锤体的**(赤道板,)排列整齐，每两条染色体有一个着丝点，每一个着丝点被一束极性相同的微管（通常称为纺锤丝）附着。此时细胞处于分裂中期，纺锤体生成完毕。实验证明，中心体在这个过程中的作用不是必需的。动物细胞在中心体被激光捣毁后仍旧能够筑构纺锤体，但其位置通常不在细胞的大致几何中心，其后的胞质分裂也会受严重影响。纺锤体 [1]

       在不含中心体的细胞中，纺锤体的生成是由染色体本身主导的。此过程由一小分子量的GTP连接蛋白（Ran GTPase）控制。细胞核分解后，纺锤丝由染色体周围生成。其后这些纺锤丝会在动力分子与为微管动力的合作影响下自动排列为极性相反大致数目相同的两组。每组的极性相对于一组着丝点。同时在微管远端的动力蛋白 dynein 会将这些微管束集中到一点，形成纺锤极区(Spindle Polar Zone)。与此同时，染色体会自动在赤道板排列整齐。纺锤体生成完毕。 纺锤体由微管组成，其动态变化调控着细胞分裂的进程。美国辅助生殖纺锤体兼容大部分显微镜

纺锤体的形成与细胞骨架的重构密切相关。武汉核移植纺锤体揭示卵母细胞关键结构

纺锤体是卵母细胞在减数分裂过程中形成的一种微管结构，负责精确分离染色体。然而，纺锤体对环境温度、渗透压等外部条件极为敏感，在冷冻保存过程中容易发生损伤，导致染色体分离异常，进而影响卵母细胞的发育潜力和受精后的胚胎质量。因此，如何有效监测和评估冷冻过程中纺锤体的变化，成为纺锤体卵冷冻研究的重要课题。纺锤体实时成像技术的出现，为这一问题的解决提供了可能。纺锤体实时成像技术主要利用高分辨率显微镜结合荧光标记技术，对卵母细胞内的纺锤体进行实时、动态的观察和记录。常用的荧光标记方法包括使用绿色荧光蛋白（GFP）标记微管蛋白，以及利用特定抗体对纺锤体相关蛋白进行染色。通过这些方法，研究者可以清晰地观察到纺锤体的形态、位置、动态变化等信息，从而准确评估冷冻过程中纺锤体的稳定性和完整性。武汉核移植纺锤体揭示卵母细胞关键结构

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