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世界卫生组织(WHO)《人类精液及精子—宫颈粘液相互作用实验室检验手册》于1980年***出版，以满足临床与科研对人类精液标准化检测程序日益增长的需求。该手册是人类精液实验室检查和处理程序及方法的标准操作指南，旨在提高精液分析的质量和提高不同实验室结果的可比性。在过去40年里，该手册进行了4次修订与补充(1987年、1992年、1999年和2010年)，内容涉及精液检查的标准化操作程序、精子功能、精浆生化、精液处理与冷冻以及质量保证等，已成为国际公认的标准，被世界各地临床和实验室***使用。中国卫生部已在2003年将其纳入人类辅助生殖技术规范。WHO《人类精液检查与处理实验室手册(第5版)》精液参考值的数据是来自全球3大洲8个国家的前瞻性、多中心临床研究的结果，通过循证医学研究获得的精液参数参考值具有里程碑式意义。自2010年出版以来成为WHO很受欢迎的出版物之一，即使在**近几年其下载量也在稳步增长。它是男科实验室及全球范围内开展精液分析操作的其他实验室、医院和研究机构使用的标准操作手册。该手册在国际大会、科学会议、以及WHO合作中心、专业学会和其他学术机构的培训项目中进行了***传播。截止到2021年，已被3000余篇同行评议论文和评论引用。精子分析仪能分析与精子运动功能相关的各种参数。广州CASA精子分析W.H.O 4

人类精子冷冻保存和储存：增加了冷冻样本的安全性、精液冷冻保存方案、快速液氮熏蒸冷冻、冷冻精液的解冻、玻璃化冷冻等内容，更具可操作性。本手册对人类精子的冷冻保存提出了具体建议：将样本分管分罐分开储存；对使用的材料和留存标本建立定期核验程序；所有储罐都应有液位监控报警系统，以监测温度和液氮液位，传感器应连接警报器，可通过实验室人员的终端进行提醒。新证据表明，玻璃化冷冻是冷冻保存精液的一种有价值的方法。该方法的原理是将小体积样本与无污染液氮直接接触并快速冷冻，可以防止冰晶的形成，并减少精子的渗透性损伤。在麦管玻璃化冷冻(无菌玻璃化冷冻)中，也可以使用封闭系统，不需要无菌的液氮。计算机辅助精子分析W.H.O 4精子分析仪的出现简化了检验流程，提高了诊断的可靠性，对于提升男性生殖健康领域的Z疗效果具有重要作用。

[临床意义]1. 若数日未**、且精液量少于1.5ml者为不正常，说明精囊或前列腺有病变；若精液量减至数滴，甚至排不出，称为无精液症，见于生殖系统的特异性***，如结核、淋病和非特异性炎症等。2．若精液量过多(一次超过8ml)，则精子被稀释而相应减少，有碍生育。二、颜色检查[正常参考值]灰白或乳白色，久未**者可呈浅黄色。[临床意义]1．黄色或棕色脓样精液：见于精囊炎或前列腺炎等。2．鲜红或暗红色血性精液：见于生殖系统的炎症、结核和**等。三、粘稠度和液化检查[正常参考值]粘稠胶冻状，30分钟内自行液化。[临床意义]1．精液粘稠度低，似米汤样，可因精子量减少所致，见于生殖系统炎症。??2．液化时间过长或不液化，可抑制精子活动而影响生育，常见于前列腺炎症等。四、精子活动率检测[正常参考值]正常精子活力一般在Ⅲ级(活动较好，有中速运动，但波形运动的较多)以上，**后1小时内有Ⅲ级以上活动能力的精于应＞0.60。[临床意义]如果0级(死精子，无活动能力，加温后仍不活动)和Ⅰ级(活动不良，精子原地旋转、摆动或抖动，运动迟缓)精子在0.40以上，常为男性不育症的重要原因之一。

男科实验室中通常所指的质量包含三个方面：实验室内部质量、医生处置的质量以及结果的质量［3］。1．实验室内部质量与**分析有关的实验室内部质量主要是工作人员的素质和所采用仪器的质量。工作人员应经过特殊的培训‚仪器必须处于正常状态、确保准确的结果‚操作应符合规程［4］。CASA系统本身的质量难于评定。硬件‚如显微镜、影像摄影机和计算机经检查便可确定其可靠性。但软件并非如此‚软件中存在不确定的因素‚算法是软件中**重要的部分‚通常制造者保守这些秘密；因此‚有关软件的数学上、信息性的、统计学的或生物测量方面的检查实验室难于进行。HAMILTON THORNE精子分析仪可分析参数，直线性（LIN）‌：曲线轨迹的直线性。

前沿性检查：目前不作为生育力低下男性初步评估的常规方法。这一部分包括了非常专业化的、主要用于研究的方法和其他新兴检测技术。有研究认为，氧化应激可能是影响人类精子功能和妊娠结局的重要因素；新的证据也表明了精子DNA完整性和染色质组装与生育力的关系。前沿性检查一节中详细介绍了精子氧化应激和活性氧实验、精子染色质检测(苯胺蓝和色霉素A3染色)的具体实验操作及讨论。手册重写了计算机辅助精子分析(CASA)部分，强调了CASA对于检测精子浓度的局限性与质控要求，增加了CASA检测精子超活化运动的内容。对精子跨膜离子流和转运的功能分析，可更好地了解男性不育因素和男性生殖***疾病。为此，手册新增了检测精子跨膜离子流和转运的内容。该设备的设计紧凑，占用空间小，适合不同规模的实验室使用。香港鱼精子分析DCL

精子分析仪参数，精子头侧摆幅度（ALH）‌：精子头关于其平均路径的侧向位移幅度。广州CASA精子分析W.H.O 4

CASA系统虽然有诸多优点，但是很多因素都会影响到CASA仪器的使用及准确性。CASA系统进行**分析应注意以下几点：3.1标本的采集与制作（1）采集前禁欲2�7天，禁欲时间过长、过短对**质量都有一定影响。（2）容器要清洁。（3）特殊情况下，*可使用专门为采集**设计的无毒性避孕套，普通的乳胶避孕套因含有损害精子活力的物质不可使用。（4）注意保温（20�37℃），并于30分钟内送检验科。（5）标本置于37℃水浴.精子运动参数具有温度敏感性，因此要求计数池应于分析仪恒温板上预温。（6）密切注意**液化的情况，确保液化时间准确，因**样本随放置时间的延长，精子活动力及活动率有减少的趋势。标本液化后取混匀样本**1滴滴在样品池中间，然后进行分析。（7）检测精子活动力，标本密度应控制在2×106/ml到50×106/ml之间。具有高密度（如高于50×106/ml）精子的标本，通常会增加碰撞的频率，并可能由此出现错误的结果。在这种情况下，建议用同源精浆稀释标本。广州CASA精子分析W.H.O 4