口碑好的EdU细胞增殖检测试剂盒供应商

时间:2024年02月02日 来源:

这一类细胞增殖用荧光标记采用温和的点击实验方案,准确且兼容各种抗体实验方案,整个实验可在30分钟内完成,在结果的数据丰富程度方面,堪比多重分析方法。此外,该方法适用于培养的细胞或组织切片,可用流式细胞术分析检测EdUFlowCytometryKit594(BCK-FC594-100);可进行HCS分析或进行细胞裂解液微孔板检测EdUHTSKit594(BCK-HTS594-20);也可适用于培养中的细胞,或通过注射方法进行实验的小动物样本,进行体内成像分析InVivoEdUClickKit594(BCK594-IV-IM-M)、流式细胞检测或HCS高通量检测。(共有488、555、594、647四种荧光染料可选)。上海EdU细胞增殖检测试剂盒的发展趋势。口碑好的EdU细胞增殖检测试剂盒供应商

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EdU细胞增殖检测试剂盒通过基于EdU与荧光染料的特异性共轭反应,把荧光集团标记到新合成的含有EdU的DNA上面,这样就可以进行高效快速的检测出DNA复制活性,广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复等方面的研究。传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法需要DNA变性、抗原修复、抗原抗体过夜孵育等复杂繁琐的操作步骤。而EdU检测方法不需要剧烈的DNA变性,只需温和的细胞固定化和透化处理,能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点,操作步骤更加快速、灵敏和准确。EdU与胸腺嘧啶(T)结构非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗体的1/500,在细胞内很容易扩散,无需DNA变性(酸解、热解、酶解等),可有效避免样品损伤,而且无需抗原抗体反应,能在细胞和组织水平更快速便捷地反映DNA复制活性。天津正规EdU细胞增殖检测试剂盒价格EdU细胞增殖检测试剂盒如何发挥重要作用?

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BrdU法和BeyoClick™EdU法检测原理的比较。A.BrdU法需使用大分子的BrdU抗体,由于空间位阻,双链DNA须变性后才能使BrdU抗体与BrdU结合。法使用小分子标记的叠氮化物(Azide),无需DNA变性,操作更便捷,兼容性好,检测结果更加稳定可靠。本试剂盒检测快速。相对于BrdU法,本试剂盒采用BeyoClick™EdU法检测新合成的DNA,所需时间缩短。经本试剂盒处理后,增殖的细胞呈棕色,可以用普通光学显微镜进行观察。HeLa细胞用本试剂盒检测细胞增殖的效果参见图3。图3.HeLa细胞用本试剂盒检测细胞增殖的效果图。无EdU组观察不到棕色染色(左侧一列);EdU(10μM)孵育2小时组有明显的棕色染色(中间一列);而用10mM的DNA合成抑制剂羟基脲(Hydroxyurea)提前预处理0.5小时后,棕色染色减弱,说明DNA合成被抑制后,EdU的掺入被抑制(右侧一列)。

EdU染色(a)通过用10:1去离子水稀释10x反应缓冲液进行配制1xEdU反应缓冲液;(b)按照溶解200mg缓冲添加剂溶于1ml去离子水的比例称取适量的粉末进行溶解,即为可用的缓冲添加剂的浓度,建议现用现配;注:缓冲添加剂为白色粉末,较难准确称量,称量范围可稍微放宽,但是不应超过±20%,且该粉末较易氧化,使用后请旋紧管盖,如试剂出现棕黄色,则需报废或更换。(c)按照以下的表格进行染色反应液的配制:该产品是采用成像检测方法对贴壁细胞进行检测,适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。非贴壁细胞可在孵育EdU后进行细胞涂片处理,固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。也可以应用于流式细胞仪检测。EdU细胞增殖检测试剂盒的发展前景如何呢?

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EdU上的乙炔基能与生物素标记的叠氮化物(Biotinlabeledazide)通过一价铜离子的催化发生共价反应,形成稳定的三唑环,该反应非常迅速,被称作点击反应(Clickreaction),其反应原理参见图1。通过点击反应,新合成的DNA会被相应的生物素探针所标记,从而可以使用适当的检测设备检测到增殖的细胞。EdU检测法中的点击反应(Clickreaction)原理图。生物素或荧光探针等标记的叠氮化物(LabeledAzide)与掺入到细胞DNA中的EdU,在铜离子的催化发生共价反应,形成稳定的三唑环,终使细胞DNA标记上生物素等探针。你知道EdU细胞增殖检测试剂盒的特点吗?北京正规EdU细胞增殖检测试剂盒购买

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    避免反复冻融。如短时间内需多次重复使用,请于4℃避光保存,有效期半年。使用前须知该试剂是采用成像检测方法对贴壁细胞进行检测,适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。非贴壁细胞可在孵育EU后进行细胞涂片处理,固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。实验准备1、盖玻片2、1×PBS()(用DEPC水配置)3、含TritonX-100的PBS(用DEPC水配置)4、甘氨酸溶液(2mg/ml)(用DEPC水配置)5、培养板或培养皿实验参考96孔板48孔板24孔板12孔板6孔板EU培养基100μl200μl300μl500μl1ml染色反应液100μl200μl300μl500μl1ml实验步骤(以96孔板,HK2贴壁细胞为例)细胞培养取对数生长期细胞,以每孔4×103~1×105细胞接种于96孔板中,培养至正常状态。EU标记1、将细胞完全培养基中按照500:1的比例加入EU溶液,制成2×EU标记培养基;2、提前将2×EU标记培养基预热,然后等体积加入到细胞原有培养基中,获得1×EU溶液,其中EU的终浓度为500μM;注:1)我们不建议替换全部培养基,因为这样可能会影响细胞增殖的速度;2)配置好的培养基建议现用现配,用量以没过细胞为宜;3、每孔加入300μl含EU培养基孵育细胞2小时,弃培养基。口碑好的EdU细胞增殖检测试剂盒供应商

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