山东咨询EdU细胞增殖检测试剂盒哪家好

时间:2024年02月18日 来源:

EdU细胞增殖分析试剂采用click化学技术,可为新合成的DNA检测与定量提供比传统BrdU方法更的替代物。当在DNA合成过程中掺入修饰的核苷EdU(5-乙炔基-2-脱氧尿苷)时,可以通过快速的“click化学”反应检测到它,并且对细胞的破坏作用小。点击化学相比于BrdU具有更简便、更快速、更易操作的优点。与使用溴脱氧尿苷(BrdU)检测法不同,Click-iTEdU检测法不是基于抗体,因此并不需要DNA变性以检测掺入的核苷。此外,Click-iTEdU可以与R-PE、R-PEtandems和GFP等荧光蛋白复用提高效力。当您平行比较这些方法时,Click-iTEdU和InvitrogenClick-iTPlusEdU在测定细胞增殖方面的优势是显而易见的。上海东寰告诉您EdU细胞增殖检测试剂盒的应用范围。山东咨询EdU细胞增殖检测试剂盒哪家好

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本试剂盒使用便捷、兼容性好。本试剂盒只需常用的多聚甲醛固定和TritonX-100穿透,就可以使叠氮化物探针有效进入细胞并发生点击反应,不会影响细胞形态,不会影响基于抗体的免疫荧光和免疫组化检测,也不会影响DNA的荧光染色(如PI染色检测细胞周期、DAPI或Hoechst染料检测细胞核)。而BrdU法为了使大分子的BrdU抗体进入细胞并与DNA上的BrdU结合,需要对双链DNA进行变性处理(如酸变性、热变性或者DNase消化等),这种变性可能会影响细胞形态,影响后续的免疫荧光和免疫组化检测、DNA的荧光染色等。BrdU法和BeyoClick™EdU法检测原理的比较参见图2。北京EdU细胞增殖检测试剂盒价格EdU细胞增殖检测试剂盒哪家好?上海东寰告诉您!

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这几种方法尽管都不是检测DNA合成的,但被用于替代[3H]thymidine掺入法。CFDASE法(C0051、C1031)基于细胞荧光示踪的原理能检测到单个的增殖细胞,但由于每增殖一次荧光减弱一半,在荧光显微镜下较难区分荧光减弱一半的细胞,检测灵敏度不是很高,通常*适用于流式细胞仪检测。在进行科学研究时,上述这些基于细胞活性或CFDASE的方法可以作为EdU法的补充性检测方法。EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine),中文名为5-乙炔基-2-脱氧尿苷,是一种新型胸苷(胸腺嘧啶脱氧核苷,thymidine)类似物,EdU可以在DNA合成过程中替代胸苷掺入到新合成的DNA中。

    4%多聚甲醛固定液或冷**固定液(-20℃预冷20min)。d,封闭液。e,/LPBS缓冲液。2、染色方法a,取出培养有细胞的盖玻片,用洗2-3遍。b,加入4%多聚甲醛试问固定30minc.加入的Tritonx-100,37℃,5min,PBS洗两次,5min/次d.加入含、1%BSA的PBS中室温封闭30min-1h。e.去封闭液,直接加入一抗,37℃孵育1h或4℃过夜。抗体以mo/LPBS稀释(理想的抗体浓度需经试验而定)。,10min/次g.加入FITC-二抗或TRITC-二抗,37℃,孵育1h。,10min/次,用滤纸吸干。(PBS配制)封片。j.免疫荧光显微镜下观察,或于4℃避光保存。免疫荧光双标记方法免疫荧光的双标记是指同时标记细胞内两种蛋白质分子,当怀疑某种配体与已知受体结合后可用此方法加以证明。此方法稍微复杂一些,应注意所用的一抗是来自不同种属动物的两种特异性抗体(例如:A抗体为多克隆抗体,来自家兔;B抗体为单克隆抗体,来自小鼠)。其次,两种二抗所带荧光素的发射光不应重叠,且尽量远离,通常可以选择FITC和TRITC、Alex488和TRITC、FITC和Cy5,或Cy3和Cy5等来组合。通常情况下,染色时两种一抗可以同时孵育,然后可以同时孵育两种二抗。但当染色结果一种颜色非常弱,而另一种颜色比较强时,应考虑先孵育颜色较弱的二抗。上海东寰告诉您EdU细胞增殖检测试剂盒的运用方式。

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    EU新生RNA检测试剂产品简介细胞内新生RNA的变化是评价细胞活性的重要指标。EU(5-Ethynyl-Uridine)是一种尿嘧啶核苷类似物,能够在细胞RNA转录时期代替尿嘧啶(U)掺入新合成的RNA分子中,然后通过基于EU与荧光染料的特异性共轭反应,把荧光集团标记到新合成的含有EU的RNA分子中,这样就可以进行较快的的荧光检测RNA的转录活性。本试剂盒将直接测定细胞内新生RNA的变化。传统的检测新生RNA的方法为以放射性同位素标记RNA等方法然后进行Southernblot进行检测。但是这种方法需要放射性同位素标记及后续的复杂操作步骤。利用EU标记新生RNA的检测方法不需要剧烈的RNA变性,只需温和的细胞固定化和透化处理,能够较好地保护细胞形态、RNA整体结构及细胞内抗原识别位点,操作步骤更加便捷、灵敏和准确,能在细胞水**映新生RNA转录活性的状况。该试剂只需要简单的操作步骤,适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜以及高内涵筛选仪进行新生RNA的转录活性。试剂组分产品编号试剂浓度试剂量C01901EU溶液1000×40μl细胞固定液1×15ml反应缓冲液10×1ml催化剂溶液25×400μlTAMRA红色荧光溶液400×25μl缓冲添加剂粉末200mgHoechst×20μl运输及保存方式蓝冰运输。-20℃避光长期保存。EdU细胞增殖检测试剂盒应用再哪些地方?口碑好的EdU细胞增殖检测试剂盒

你知道EdU细胞增殖检测试剂盒的特点吗?山东咨询EdU细胞增殖检测试剂盒哪家好

EdU与胸腺嘧啶(T)结构非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗体的1/500,在细胞内很容易扩散,无需DNA变性(酸解、热解、酶解等),可有效避免样品损伤,而且无需抗原抗体反应,能在细胞和组织水平更快速便捷地反映DNA复制活性。该产品是采用成像检测方法对贴壁细胞进行检测,适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。非贴壁细胞可在孵育EdU后进行细胞涂片处理,固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。也可以应用于流式细胞仪检测,就可以进行高效快速的检测出DNA复制活性,广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复等方面的研究。山东咨询EdU细胞增殖检测试剂盒哪家好

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