TE-1完全培养基配方

    大鼠主动脉内皮细胞完全培养基由精心优化，经过长期测试，本产品可保持大鼠主动脉内皮细胞的生长状态。大鼠主动脉内皮细胞完全培养基已包含大鼠主动脉内皮细胞生长所需的各种成分，无需添加任何成分，可直接用于大鼠主动脉内皮细胞的体外培养。大鼠主动脉内皮细胞完全培养基成分包含基础培养基、血清、双抗、细胞生长需要的其他添加物，经过近千种各类细胞严格的培养验证。完全培养基包含常规完全培养基、原代细胞完全培养基、细胞系培养基，包含细胞生长需要的各种氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐离子等营养物质，可保持细胞的生长状态。心肌主动脉是供给心脏血液的动脉。主动脉内皮细胞分离自正常大鼠心肌主动脉，呈单层扁平分布。内皮细胞或血管内皮是一薄层的专门上皮细胞，由一层扁平细胞所组成。它形成血管的内壁，是血管管腔内血液及其他血管壁（单层鳞状上皮）的接口。内皮细胞是沿着整个循环系统，由心脏直至少的微血管。培养操作1.取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。2.待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。 菩禾生物医药是细胞、原代细胞、培养皿、培养基等产品生产加工的公司，拥有完整、科学的质量管理体系。TE-1完全培养基配方

    2)优点和缺点血清是非常复杂的混合物，成分多样，含有各种生理平衡的分子量差别很大的生物分子，有的对细胞生长有促进作用，如含有携带、矿物质、微量元素和脂类物质的转运蛋白等。血清能够提供细胞贴壁因子和扩散因子。血清中含有起稳定作用和的因子，能够维持培养基的pH值并抑制蛋白酶直接或间接的酶解。但是血清的加入也带来了很多问题：(1)血清的成份可能有几百种之多，目前对其准确的成份、含量及其作用机制仍不清楚，尤其是对其中一些多肽类生长因子、和脂类等尚未充分认识，这给研究工作带来许多困难；(2)血清都是批量生产，各批量之间差异很大，而且血清保存期至多一年，因此，要保证每批血清的相似性极为困难，从而使实验的标准化和连续性受到限制。 TE-1完全培养基配方为了避免诱导过程中MSCs出现漂浮现象，建议对成骨诱导使用的培养器皿表面进行明胶包被。

    关于EDTA：细胞培养液中是不可能含有EDTA的，EDTA会螯合Ca2+和Mg2+，而钙镁离子是细胞贴壁和正常生长所必须的。而消化细胞用的胰酶中一般含有EDTA，目的是螯合掉培养基中的这两个离子，防止钙镁离子抑制胰酶活性，以便胰酶将细胞消化下来。添加剂和双抗通常浓度为100X（100倍工作浓度）。血清的添加比例有0%（不添加），1%（5mL），2%（10mL），5%（25mL），10%（50mL）几种。【大多数实验室使用的完全培养基配置方法为：450~500mlDMEM培养基+50mlFBS（胎牛血清）+5ml双抗】次使用时先将-20℃保存的添加剂、双抗、FBS转移到4℃溶解后，在灭菌后的百级洁净等级环境中操作，所使用的容器和移液耗材均需要进行过无菌处理。首先将解冻的FBS、添加剂和双抗进行分装，平均分装成5-10份，留下本次配制所需要的量，剩余的继续放回-20℃保存，之后按需取用融化后配制完全培养基，避免反复冻融。

    无机盐：维持培养基渗透压平衡，参与细胞的代谢活动。主要有Na+、K+、Ca2+、Mg2+等。Na+是细胞外液中主要的阳离子，对维持渗透压的恒定有决定性的作用。K+主要分布在细胞内液，细胞内K+对于某些酶是必需的，并在调节细胞内环境的酸碱平衡上也有极重要意义。Ca2+在细胞外液中的作用是将组织内部细胞之间相互粘着，在细胞内参与许多重要的细胞生理活动，如传导、参与肌肉细胞收缩等。在悬浮培养时，为了减少细胞的聚集和附着，要减少Ca2+的浓度。Mg2+是构成细胞间质的重要成分，对于细胞间相互稳定结合有很重要的意义。磷的化合物对细胞物质代谢和生理功能调控有重要作用。其他成分：肽、核苷、嘌呤等。可帮助细胞的克隆化培养及维持某些特殊细胞系的生长。，营养缺乏容易引起细胞凋亡，新生牛血清中所含大部分营养成分可以通过化学成分明确的营养物质如氨基酸维生素等成分组合取代。低血清培养基营养成分大优于基础培养基，需添加1％～5％新生牛血清，而对细胞生长、增殖、形态、活性和功能没有影响甚至有所改善。 菩禾生物会根据客户提供的配方，对原材料的品名正确性，是否结晶水、是否成盐等，进行核实确认。

    储存条件及保质期】应贮存在-10℃~-20℃，避免反复冻融；有效期为24个月。【操作步骤】贴壁细胞传代培养：1.提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内。2.吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞。3.加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶。4.加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡。5.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。 菩禾生物医药的诚信、实力和产品质量获得业界的认可。欢迎各界朋友莅临参观、指导和业务洽谈。TE-1完全培养基配方

生产工艺：我司默认50L以下手工灌装，50L以上自动生产线灌装，配制用水全部为注射用水。TE-1完全培养基配方

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