生殖疾病动物模型建模

    IgA肾病小鼠模型一、目的建立IgA肾病小鼠模型，并观察模型的生化及病理指标特点。二、试剂耗材1、酸化水：盐酸调灭菌水；2、蓖麻油+CCl4：5:1配制；3、LPS：生理盐水配制；4、血清白蛋白BSA：800mg/kg用量，灭菌水配制；三、方法：小鼠BSA+CCl4+脂多糖LPS诱导法1、20g小鼠牛血清白蛋白BSA(800mg/kg)隔天灌胃1次，配制160mg/ml，灌胃100ul/只，持续8周；2、同时皮下注射蓖麻油和CCl4（5:1），1次/周，持续8周；3、分别于第6、8周以（）尾静脉注射LPS，1次/周；4、每两周取24h尿液一次观察尿蛋白及红细胞；5、每日观察精神、饮食、大小便，第9周处死，取血和肾、肝做相应检查；6、取尿液后2000r/min离心10min，取上清用全自动生化仪检测尿蛋白肌酐比值，镜下观察尿沉渣中有无红细胞。上海东寰为您提供完善的小鼠动物疾病模型。生殖疾病动物模型建模

动物模型名称：胆管结扎致肝胆管性肝硬化大鼠模型2、实验动物种属：SD大鼠3、实验动物性别：雄性4、实验动物年龄：5周5、实验动物体重：200~220g6、实验动物环境：SPF级1、实验方法：用胆管结扎法。大鼠按10mg/kg体重腹腔注射3％戊巴比妥钠麻醉，腹部皮肤消毒，无菌操作沿腹部正中线剪开腹腔，分离出胆管，在胆管近端和远端2处结扎胆管。手术后正常饲养28天。28天后解剖取肝脏进行组织病理学检查。2、检测标准：肝脏病理切片镜下小胆管伴纤维组织增生积分按程度为0-3分：0分：无明显病变；1分：呈局灶性分布，受累面积在30%以下者；2分：呈多灶性分布，受累面积在30%-70%之间者；3分：呈弥漫性分布，受累面积在70%以上者。杨浦区疾病动物模型建模说明书疾病动物模型建模怎么做？

麻醉小鼠，仰卧固定于实验台上，颈部去毛后酒精消毒，切开皮肤，逐层暴露气管，将1mL注射器经两气管软骨环间隙朝向心端刺入气管，回抽无阻力，则注入博莱霉素5mg/kg/L（对照组注入等量的生理盐水）。手术完毕后迅速将动物直立、旋转，使药液在肺内分布均匀，动物清醒后常规饲养。4.2模型鉴定及后续检测：肺纤维化模型发展时间：给药后第7天肺组织大多呈重度肺泡炎改变，肺泡腔及肺间质内有大量中性粒细胞浸润，部分肺泡腔破坏或消失，肺间隔内成纤维细胞和增生，与正常肺组织对比差别明显；给药后第14天，肺纤维化开始形成。巨噬细胞、中性粒细胞等炎性细胞明显减少，成纤维细胞增多，肺泡间隔明显增厚，有胶原沉积。给药后第28天，多数小鼠发生弥漫性肺间质纤维化，肺间质被胶原纤维和成纤维细胞替代，肺泡壁破坏，肺大泡形成，但仍可见炎性细胞浸润。

用PBS冲洗沉淀物，然后用Diff-Quik染色液染色，在光学显微镜下进行细胞分类，观察计数计数中性粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞。5.2.4肺损伤后的组织病理观察：取左肺4%多聚甲醛固定，然后将肺组织常规脱水，石蜡包埋，切片（厚度为5μm），HE染色。HE染色肺组织学评价可以直观的反应肺损伤的程度，ALI组织病理学主要表现为肺泡中性粒细胞及红细胞的渗出，肺泡壁透明膜的形成。HE染色后可在低倍镜下观察到整个左肺组织的炎症细胞浸润、水肿以及损伤，评估肺部损伤分布情况；而高倍镜下则可以对肺泡结构进行辨认，对肺损伤程度进行评估和评分。评分方法：取6个视野进行出血及水肿评分。0分：没有损伤1分：<25%的损伤面积2分：25%~50%的损伤面积3分：50%~75%的损伤面积4分：>75%的损伤面积小鼠疾病模型研究也是人相关疾病药物研发的起点。

    动物购买的途径、安置的地点，饮食管理（一般实验室会有动物房，也可以从其他地方购买），动物免疫证明、伦理证明需要提前准备好。实验相关的试剂和药物：比如造模药物和器械，动物干预所需药物，阳物选择及购买（有些药物购买很困难，必须通过特殊程序才能买到）。如果涉及到有创操作，要提前准备好物（建议提前购买），手术器械。需要了解自身实验平台能完成哪些技术（常见的有组织病理染色、WesternBlot、PCR等），实验仪器是否需要预约使用。如果需要外送生物公司检测，需要提前联系好商家，以及了解清楚样本如何获取，如何运输。饲养动物及干预动物购买后需要将时间节点提前规划好，比如，周需要做什么？测量体重？观察饮食？测量需要的指标？中间有无特殊操作？比如灌胃、测量体重、做CT检测、取血？……第几周取材？取材需要哪些组织？预实验方案就要提前设计清楚以上内容。取材及样品准备取材需要提前到动物房禁食、称体重、取出动物、手术器械的消毒、组织固定所需要的试剂和EP管，WesternBlot和PCR所需要的样本储存条件。比如冻存管、EP管，是否需要冰块？是否需要液氮？取材当天需要多少人？是否需要请人帮忙？如果所需要取出的样本较多，建议大家请人一起帮忙。必须真正了解研究者感兴趣且需要的小鼠疾病模型。镇江视觉疾病动物模型建模

大量的遗传变异可作为研究人类疾病的借鉴。生殖疾病动物模型建模

实验动物年龄：成年5、实验动物体重：160-200g6、实验动物环境：SPF级1、实验方法：热力致皮肤损伤法。麻醉大鼠，根据体重腹部备皮，然后固定于实验台上。将大鼠移近加热纯净水的烧杯，将纱布条浸入热水中，待水温恒定于99℃时，取出纱布，立即平铺于待烫部位，于纱布接触大鼠皮肤后开始计时。致伤3s为浅II°烫伤，致伤10s为深II°烫伤。2、检测标准：a.皮肤大体观察：致伤3s大鼠局部皮肤发红、轻微水肿。愈合后毛发生长良好，有少量红褐**素沉着，皮肤轻微挛缩，表皮光滑；致伤10s大鼠局部皮肤发白、水肿。愈合后毛发生长良好，皮肤瘢痕形成，表面粗糙不平。b.皮肤组织病理学观察：致伤3s大鼠表皮层次尚清楚，细胞明显肿胀、变性，层次结构尚清楚，细胞核结构不清；致伤10s大鼠表皮细胞部分脱落，结构不清，明显变性、坏死，部分细胞已溶解生殖疾病动物模型建模