陕西EDTA胰酶

胰酶分装冻存时要注意什么？胰酶分装时尽量分装成多瓶，并遵守3次左右用完和只装2/3体积的原则。因为冷冻保存时体积会膨胀，多次使用同一瓶胰酶反复冻融会降低消化效果并增大污染的可能性。5、怎么才能判断胰酶消化完全？注意：不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才表示消化好了。一般肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙状移动就可以了，就应该停止消化。6、胰酶适用于哪些细胞消化？它的消化效果与哪些有关呢？胰酶适用于消化细胞间质较少的软组织和传代细胞，如胚胎、上皮、肝、肾等组织，但对纤维性组织和较硬的*组织效果较差。胰酶的消化效果主要与pH值、温度、胰酶浓度、组织块大小和硬度有关。EDTA是乙二胺四乙酸，一种金属螯合剂。陕西EDTA胰酶

细胞消化胰酶的配制对一般细胞0.25%胰酶(胰蛋白酶，Trypsin)配方：100mlPBS,0.25g胰酶步骤：1先配100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2·12H2O/2.9gPO4HNa2,0.2gKCl,0.2gPO4H2K溶于1000ml蒸馏水)2称胰酶0.25g3加入PBS中，低速搅拌〈4h冰浴中,或者4℃过夜低速搅拌0.5h冰浴中4调PH7.45仍在冰浴中6过滤，分装，-20℃保存，4℃短期内用完tip:低速很重要，机械搅拌对酶是一种冲击，如果起沫，酶就变性了。低温，防止酶失活对难消化的细胞：在上述配方中，加入0.02g的EDTA(0.02%)tip:因为EDTA可以络合Ca2+，增加消化效力中国澳门EDTA胰酶0.25%胰酶细胞消化液(含有EDTA，含酚红)消化细胞时间不宜过长。

细胞传代消化时所用胰酶的浓度越高是越好 贴壁细胞的消化：  常用的消化方法主要有酶消化法、离子螯合剂、物理法和冷冻法。其中**常用的是酶消化法。酶消化法：贴壁干细胞酶消化传代时通常采用两种方式：1、加入胰酶等干细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；2、加入胰酶后，镜下观察待干细胞开始脱落时，弃去胰酶，加入培养液并分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对干细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的干细胞先脱落。

0.25%胰酶是细胞生物学中常用的一种生物试剂，下面汇总一下胰酶使用过程中常见的一些问题。

胰酶的使用浓度是多少？胰酶浓度：常用0.25%胰酶+0.02%EDTA作为消化液。

胰酶的保存胰酶可在-20℃下保存一年。随着时间延长，胰酶的消化能力减弱。胰酶可分装冻存，在使用前从-20℃冰箱取出。尽量避免在4℃长期保存。胰酶使用的时候要注意什么？（1）在使用胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。（2）胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长，否则细胞铺板后生长状况会较差。 胰酶细胞消化液(Trypsin-EDTA Solution)含0.25%胰酶和0.02%EDTA。

胰酶和双抗怎么保存？

胰酶和双抗怎么保存？

胰酶和双抗怎么保存？

双抗的保存:双抗通常情况下在-20°C保存一年。由于该试剂在4°C下长期存放是不稳定的，分装后在-20°C下避光保存。青霉素在2-8°C存放时间不应超过4天，链霉素相对稳定一点，在2-8°C可以存放30天左右。双抗从冻融后基本成分已开始降解。胰酶的保存：胰酶可在-20°C下保存一年。随着时间延长，胰酶的消化能力减弱。胰酶可分装冻存，在使用前从-20°C冰箱取出。尽量避免在4C长期保存。 胰酶4℃保存，一年有效；-20℃可保存更长时间。河北国产胰酶供应商

胰蛋白酶属于其中一种活性成分，主要用于促进消化吸收。陕西EDTA胰酶

    在组织细胞的体外培养和原代细胞培养中的组织细胞分散（将组织块制备成单个细胞悬液）以及传代细胞培养中，贴壁生长细胞的消化分散均要使用组织细胞消化液。常用的消化液为胰蛋白酶(Trypsin)，EDTA等。胰蛋白酶是一种丝氨酸水解酶，它能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基侧切段，水解细胞间的蛋白质，破坏细胞间的连接，从而使组织或贴壁细胞离散成单个细胞。胰酶分散细胞的活性与组织或细胞的特性、胰酶浓度、温度和作用时间有关，在℃时，胰酶的作用能力**强，因此使用胰酶时，应把握好浓度、温度和时间，以免消化过度造成细胞损伤。一般常用胰酶的工作浓度为，而半贴壁细胞或对胰酶敏感的细胞常采用低浓度（）的胰酶进行细胞消化。由于EDTA能够螯合Ca2+和Mg2+，从而破坏细胞连接促进细胞的解离，因此在胰酶溶液中常常会加入一定量的EDTA混合使用，以增强解离效果。但是对于EDTA可能会干扰后续的测试分析时，推荐选择不含EDTA的消化液。本产品含有(Trypsin)，溶于无钙镁平衡盐溶液中，经过滤除菌，可以直接用于培养细胞和组织的消化。为改良型，除了具有方便快速、稳定安全、细胞状态好等特点之外，消化时间更短，消化效果媲美进口产品，特别适用于难消化的细胞。 陕西EDTA胰酶