上海原代细胞转染试剂作用

用LipoD293™体外DNA转染试剂（Ver.II）（上图）和受欢迎的品牌产品Invitrogen公司的293fectin™（下图）转染pEGFP-C1质粒到HEK293细胞中。转染24小时后，细胞的尼康Eclipse荧光显微镜DIC成像图（左侧）和荧光成像图（右侧）。对悬浮HEK293F产生蛋白质效率的比较30毫升的293F细胞分别使用LipoD293™试剂、293fectin、Xfect和Fugene6等转染试剂按照生产商的标准转染步骤将pEGFP-6xHis质粒导入细胞表达，用量为LipoD293™试剂，20微克，所有其他三种转染试剂均使用30微克质粒DNA。并更换培养基，继续培养24 h后收取细胞，用PBS洗涤3次以上，以备RNA抽提。上海原代细胞转染试剂作用

基于磷酸钙成分的转染试剂，其主要作用原理是与DNA通过沉淀反应形成磷酸钙-DNA复合物，粘附到细胞膜表面，借助内吞作用进入细胞质。pH值，钙离子浓度，DNA浓度，沉淀时间，细胞孵育时间乃至各组分加入顺序都可能对结果产生影响，因此实验条件摸索和优化时间较长，且重复性不佳。基于脂质体的转染试剂包括中性脂质体和阳离子脂质体两种。中性脂质体是利用脂质膜包裹DNA，借助脂质膜将DNA导入细胞膜内。目前应用比较***的是带正电的阳离子脂质体转染试剂，DNA并没有预先包埋在脂质体中，而是带负电的DNA自动结合到带正电的脂质体上，形成DNA-阳离子脂质体复合物，从而吸附到带负电的细胞膜表面，经过内吞被导入细胞。此方法操作简单，重复性好，在体外转染中有很高的效率，但具有一定的细胞毒性，可能会干扰细胞的代谢。且活性受血清影响，需要去除血清。上海原代细胞转染试剂作用无论有无血清、***存在均可获得很高的转染效率。

罗氏X-TremeGENE便是新一代转染试剂的佼佼者，升级版的多组分混合试剂，兼具极高转染效率和极低细胞毒性，在超过350株真核细胞株中获得了高效转染的验证，尤其针对难转染细胞株亦有出色表现。图1.两种试剂对CHO-K1细胞转染带GFP标记的质粒，A和C是转染后荧光显微图，B和D是明场显微图.与竞争产品比较，X-tremeGENEHP表现出更优的转染效率更低的细胞毒性图2.不同试剂在含血清的培养基中对四种很难转染的细胞株进行转染，X-tremeGENEHP试剂远优于其他试剂超过350种细胞株的高效转染验证还有一个好消息X-TremeGENE转染试剂正在进行8折促销哦快去抢购吧~

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两种试剂对CHO-K1 细胞转染带GFP标记的质粒，A和C是转染后荧光显微图，B和D是明场显微图. 与竞争产品比较，X-tremeGENE HP表现出更优的转染效率更低的细胞毒性

不同试剂在含血清的培养基中对四种很难转染的细胞株进行转染，X-tremeGENE HP 试剂远优于其他试剂

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默克自2015年成为罗氏生化试剂的全球***代理，可以提供从细胞培养和功能分析、基因机理研究到蛋白机理研究的完整方案： 转染试剂实现了更高的有效***细胞/未转染细胞比率，超过其他RNAi试剂。

图7.对注射了Invivofectamine3.0试剂的小鼠样品进行血液化学分析。将Invivofectamine3.0试剂与靶向FVII的AmbioninvivosiRNA的复合物分别以1mg/kg[1],3mg/kg[3],或未处理[U]的剂量注射入小鼠体内。在注射后2、24及48小时收集血液样品，并通过临床化学检测方法对数个生物标志物(Antech)进行评估。结果表明在使用Invivofectamine3.0试剂进行转染的每个个体间所检测的生物标志物的水平与未注射该试剂的个体相比并没有***差异。除了以上两种于siRNA的转染试剂，还有通用型转染试剂Lipofectamine™2000，Lipofectamine™3000和Neon™转染系统也可以用于siRNA转染连续细胞系具有无限增殖的潜能，通常要比原代或有限细胞更易处理.上海原代细胞转染试剂作用

将EntransterTM-R4000稀释液和agomir稀释液充分混合.上海原代细胞转染试剂作用

图5.Invivofectamine3.0试剂与靶向FVII的siRNA在单次静脉注射后可在肝脏中引起剂量反应的敲低现象。Invivofectamine3.0试剂与靶向FVII的AmbioninvivosiRNA以0.02到2mg/kg的剂量进行注射。随后分离血清并检测FVII蛋白的水平（Biophen显色检测）。持续敲低能力在单次注射后可观察到更长的敲低时间图6.使用三种不同浓度的靶向FactorVII(FVII)的siRNA研究剂量效应。siRNA分子与Invivofectamine3.0试剂形成复合物后分别以1、0.5、及0.25mg/kg的剂量进行注射。在第2、5、9、16、23及30日收集血清，并使用显色法对血清进行分析以确定FVII蛋白的敲低效果。低毒性上海原代细胞转染试剂作用