河北发展酵母文库报价

时间:2022年07月29日 来源:

目前,欧易生物负责该水稻转录因子文库的维护和保存工作,并对广大水稻科研工作者提供转录因子筛选服务。如去年欧易生物助力中国科学院分子植物科学***创新中心的王二涛老师应用该文库对水稻-丛枝菌根进行了深入研究,成功构建了水稻-丛枝菌转录调控网络,结果发表于《Cell》封面。截至文章发表,该文库已收录了1683个水稻转录因子,隶属于54个家族,覆盖预测的水稻转录因子总量的70%。文库中水稻转录因子的a基因信息来源于PlantTFDB和KOME数据库。文库载体使用pGADT7,酵母菌株使用Y187,每一个转录因子菌株**保存于96孔板中。酵母文库构建的目的酵母的做法。河北发展酵母文库报价

酵母双杂交实验表明,PtMADS11 与 PtDAL1 之间存在直接的相互作用(图 C),并通过 BiFC、GST pull-down 得以证实(图 D-E)。为进一步研究在年龄信号调控中的作用机制,分别构建了过表达PtDAL1和PtMADS11的拟南芥。与对照相比,过表达PtDAL1***提前了拟南芥的营养-生殖时相转换(图A),证实PtDAL1在生殖起始和控制花***建立起到了关键作用。过表达PtMADS11植株在短日照下表现出早开花和花序结构过早终止,表明PtMADS11在开花调节和花序内分生组织命运起到调控作用。在拟南芥中利用年龄调控通路不同节点关键基因突变体进行功能互补实验,结果显示过表达PtDAL1可以恢复由于过表达miR156导致的开花延迟,但ft缺失会导致PtDAL1失活,PtDAL1过表达也不能恢复soc1-1-2突变体的表型,表明PtDAL1依赖或处于FT/SOC1的上游。而过表达PtMADS11可以恢复由过表达miR156或ft缺失导致的开花延迟,表明PtMADS11对开花的调控不依赖于miR156或FT。河北发展酵母文库报价酵母单杂交技术是在酵母双杂基础上发展而来的一种研究核酸。

酵母文库实验:本研究发现了一个硝酸盐响应的 BTB/TAZ 蛋白 MdBT2,它参与调节硝酸盐介导的苹果植株生长。利用酵母双杂交、蛋白质 pull-down、BiFC 实验证实,MdBT2 可以与一个 DELLA 蛋白 MdRGL3a 互作,这种互作是 MdRGL3a 蛋白经由 26S 蛋白酶体途径的泛素化及降解所必需的。此外,异源表达 MdBT2 部分回复了 MdRGL3a 过表达所导致的拟南芥生长抑制。综上表明,MdBT2 可以通过降低 DELLA 蛋白 MdRGL3a 的丰度促进硝酸盐介导的植物生长。实验室培养显示,培养 45 天,苹果幼苗的高度和生物量随硝酸盐浓度的增加而增加(图 A-C)。

进行了酵母双杂交文库的筛选,结果显示钙依赖的种子特异性蛋白激酶SPK可以与OsNF-YB9相互作用,分段截取互作验证显示OsNF-YB9的N端是互作所必须的(图a-b),并通过双荧光分子互补实验、BiFC、体外GST-pulldown实验得以证实(图c-e)。亚细胞定位显示SPK主要在细胞质中表达,OsNF-YB9在细胞质和细胞核中都有表达,共表达SPK和OsNF-YB9***促进了OsNF-YB9的入核(图f),表明SPK和OsNF-YB9的相互作用可能促进了OsNF-YB9从细胞质向细胞核的运输。RT-PCR显示SPK在发育中的种子中高表达,在5DAF开始***,并在10-30DAF维持高表达水平(图a-b)。spk敲除突变体种子中垩白率的增加(图c-e),但粒形和粒重与野生型没有***差别。一个专属自己的酵母文库才是正确的打开方式。

酵母双杂交、pulldown和BiFC实验均显示,MdTRB1可以通过其C末端与JAZ1蛋白互作。在苹果叶片和愈伤组织中过表达MdJAZ1,花青素和原花青素的累积受到明显抑制。在苹果叶片和愈伤组织***表达MdJAZ1/MdJAZ1,结果显示过表达MdJAZ1抑制了MdTRB1对花青素和原花青素累积的促进作用。Pull down 实验和荧光素酶互补成像实验结果表明,在 MdJAZ1 存在下,MdTRB1 与 MdMYB9 的结合减弱(图 a-c);外源施加 JA 可以部分恢复 MdTRB1 与 MdMYB9 的结合。对于 MdTRB1 在 JA 介导的花青素和原花青素积累中的作用机制,本研究建立了一个新的模型:MdTRB1 通过与 MdMYB9 互作,增强了 MdMYB9 对下游基因的转录***活性,进而正向调节了 JA 介导的花青素和原花青素累积。在 JA 缺乏的条件下,MdJAZ1 与 MdTRB1 互作,干扰了 MdTRB1 与 MdMYB9 之间的结合;在 JA 存在的条件下,MdJAZ1 被降解,MdTRB1 被释放出来以参与后续过程。酵母结构及功能介绍酵母的应用 。河北发展酵母文库报价

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