上海流式数字PCR如何选型

时间:2021年11月11日 来源:

MicroDrop-100数字PCR有什么优势?

       1.MicroDrop-100数字PCR所产生的微滴数是目前市面微滴式数字PCR里相对较高的产品,可将样品分割为10万份,更符合泊松分布数学模型,可以忽略更多的误差因素;此外,高微滴数在多重数字PCR上的优势也会更大。

       2.数字PCR可选全中文界面,对国内用户十分友好,可以说,拿到即可上手。

       3.数字PCR是一个开放性的平台,在试剂方面除了产品列表上的检测试剂盒,还有通用的反应预混液,客户自行设计引物探针即可进行新项目的检测。此外,永诺非常欢迎进行定制、合作开发检测试剂盒。


数字PCR仪广泛应用于医疗、农业、环境等领域。上海流式数字PCR如何选型

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       数字PCR(Digital PCR-dPCR)技术是一种新的核酸检测和定量方法,与传统定量PCR(qPCR)技术不同,数字PCR采用***定量的方式,不依赖于标准曲线和参照样本,直接检测目标序列的拷贝数。由于这种检测方式具有比传统qPCR更加出色的灵敏度和特异性、精确性,dPCR迅速得到***的应用,这项技术在极微量核酸样本检测、复杂背景下稀有突变检测和表达量微小差异鉴定方面变现出的优势已被普遍认可,而其在基因表达研究、microRNA研究、基因组拷贝数鉴定、**标志物稀有突变检测、致病微生物鉴定、转基因成分鉴定、NGS测序文库精确定量和结果验证等诸多方面具有的广阔应用前景已经受到越来越多的关注。上海流式数字PCR如何选型采用主流可靠的解决方案,由微滴生成仪、微滴检测仪、数据分析软件组成。

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MicroDrop-100系统产品特点


一、适应性广,灵活性高

1、理论上可覆盖qPCR(荧光定量PCR)的所有应用

2、样本多样性,样本通量可达96个样本,支持灵活设定

3、开放式平台,支持用户自行开发试剂、产品。


二、灵敏度高,准确性高

1、***定量——无需依赖标准曲线

2、采用微滴式技术高达100,000个的微滴

3、线性范围达到6个数量级,灵敏度高达万分之一


三、可分析复杂混合物

1、准确度不完全依赖于扩增效率

2、双通道荧光检测,支持EvaGreen染料及探针法

3、支持多重数字PCR


四、操作简单,使用方便

1、全封闭防污染设计,一键式自动化操作。

2、可选全中文分析软件

       数字PCR也叫Digital PCR(dPCR),是近几年发展起来的一种核酸定量分析技术。相较于传统荧光定量PCR来说,数字PCR对结果的判定不依赖于扩增曲线循环Ct值,不受扩增效率的影响,能够直接读出DNA的分子个数,能够对起始样本核酸分子***定量。

       数字PCR基本原理是将一个样本分成几十到几万份,然后再将其分配到不同的反应单元中,使每个微滴单元包含一个或多个拷贝的核酸分子(即DNA模板),每个单元都会对目标分子进行扩增,然后再对每个单元进行荧光信号的统计并计算。相对而言,传统PCR或qPCR反应都是发生于同一体系当中,这也是数字PCR与其比较大的区别。


分辨率——低至0.1倍基因表达差异。

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相对于二代测序、基因芯片和定量PCR而言,数字PCR具备以下优势:

● 灵敏度可达到单个核酸分子:检测限低至0.001%,主要系为数字PCR可以实现靶标DNA/RNA的生物浓缩;

● 无需标准曲线活参照基因进行对比来测定核算量,可对靶分子起始量进行***定量,直接独处DNA分子的个数;

● 适合环境复杂样品的检测:终点PCR检测,不依赖Ct值,不依赖扩增效率,能克服PCR***剂的影响,避免样品间的交叉***问题,适合各类复杂环境中的样本进行***定量,如动血样、粪便、尿液、痰液、水样、土壤、植物等; 20微升体系生成100,000微滴。上海流式数字PCR如何选型

油包水乳化微滴技术,在微管道中利用气压驱动生成十万个微滴,单个微滴体积体积低至皮升级。上海流式数字PCR如何选型

       要了解为什么传统 PCR 存在限制,务必要了解 PCR 反应过程中发生了什么。基本 PCR 运行可以分为三个阶段:

指数期

       每个循环积聚的产物准确加倍(假定 ** 反应效率)。该反应具有高度特异性和精确度。出现指数式扩增,因为所有试剂均新鲜可用,反应的动力学推动反应有利于扩增子加倍。

线性期(高变异性)

       随着反应继续,一些试剂因扩增而被消耗。反应开始减缓,并且每个循环的 PCR 产物不再加倍。

平台期(终点:使用传统方法进行凝胶检测)

       反应停止,不再产生更多产物,并且如果放置时间够长,PCR 产物将开始降解。因为每个样品具有不同的反应动力学,所以每支试管或每个反应将在不同的时间点进入平台期。在平台期可以看到这些差异。在平台期内,传统 PCR 进行测量,又称为终点检测。 上海流式数字PCR如何选型

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