GMP等级血小板裂解液添加肝素的目的

本研究中使用的HPL是Stemulate公司两款人源血小板裂解液（NH和H)是在工业规模(很小批量为20L)生产的，具备高度的批间一致性。将脂肪来源的间充质干细胞在DME/F-12中添加10%Stemulate-NH或10%FBS进行传代培养11代。在DME/F-12中分别添加5、7.5或10%Stemulate-NH，并与10%胎牛血清进行比较。羊膜来源间充质干细胞也在2.5或5%Stemulate中培养，与10%胎牛血清相比。牙髓来源的骨髓间充质干细胞在DME/F-12中添加不同浓度的Stemulate-NH或Stemulate-H，并与添加10%FBS的培养基进行比较。在所有实验中，每天都监测细胞，每次传代结束时，收获细胞，并使用台盼蓝和一个自动细胞计数器计数然后继续传代。用血液里的血小板浓缩物反复冷冻，解冻和超声处理可制备成人血小板裂解液。GMP等级血小板裂解液添加肝素的目的

细胞培养基制备1.比较好在4°C下解冻ELAREMPrime血小板裂解液过夜或在37°C水浴中解冻1小时。2.通过将10%ELAREMPrime血小板裂解液添加到基础培养基（即MEMα、GlutaMAX补充剂、无核苷）和1%的青霉素/链霉素作为**终浓度来制备完整的细胞培养基。3.应在完全细胞培养基中加入肝素以抗凝。我们建议添加肝素的**终浓度为2IU/mLPLSUPPLEMENT(货号PL-SUP-500)or0.024mg/mLPLSUPPLEMENT-XF(货号PL-SUP-500-XF).4.完整细胞培养基可在4°C下储存，并稳定约4周储存和稳定性ELAREMPrime在标签上注明的失效日期之前是稳定的。ELAREMPrime在使用前在-20°C（或在-80°C进行长期储存）冷冻储存时稳定。解冻后，建议将未使用的ELAREMPrime样品分装并在-20°C下重新冷冻。应避免ELAREMPrime的重复冻融循环，因为这会导不溶性颗粒形成的增加。使用时，只需预热一份完整的细胞培养基，并将剩余的培养基冷藏在4-8°C。Helios血小板裂解液等级血小板裂解液是由富含血小板的血浆纯化萃取而成,其中包含很多不同的细胞生长因子。

间充质间质细胞(MSCs)体外扩增的培养基一般添加胎牛血清FBS，但是考虑到异种ganran及免疫反应的风险，监管机构并不鼓励使用。人血小板裂解液除了不存在异种免疫反应或牛病原体ganran的风险，有助于增强间充质干细胞的扩增，也相对容易地根据良好的生产规范程序生产，并已用于临床应用，因此现如很多资料显示血小板裂解液已被证明是扩增MSCs一种非常有效的FBS替代方法（参考文献1）。血小板裂解液由血浆组成，含有纤维蛋白原和凝血因子，对于一般细胞培养中涉及的含钙培养基来说通常需要加入抗凝剂（常用肝素、Rivaroxaban利伐沙班、argatroban阿加曲班等）来防止凝胶形成，其中肝素很为常用。

血小板裂解液解冻后请立即进行培养基的配制，配置好的培养基在2-8°C环境下保存并尽快使用，不建议超过21天。如解冻后的原瓶无法全部使用，建议按需分装成合适的小瓶中进行-20°C保存一旦产品瓶或袋经过初始解冻过程，建议尽快将产品置于基础培养基中。尽管对于储存在2-8°C的准备好的含有hPL的培养基，Sexton的内部测试有效期为21天，但建议客户进行内部验证研究，以确定其基于血小板裂解液的完整培养基的有效期，使用的基础培养基和添加剂等变量可能会缩短或延长完整培养基产品的有效期。血小板裂解液中的沉淀在使用前是不是需要过滤掉？

现在咱们已经了解到肝素对于血小板裂解液使用浓度优化的必要性，小编继续福利大放送，现给大家带来德国PLBioscience公司的ELAREM系列的高性价比人源血小板裂解物，据说有不到千元便可买到50ml的XENO-FREEN无动物源MSCs细胞培养补充剂hPL，用户根据自己的实验需求选择需要添加肝素版本和不需要添加肝素版本。并且考虑到用户从科研到临床的过渡需求，我们曼博生物为各位用户提供各种研究级、GMP/临床级的hPL以支持学术研究、工业生产以及体外诊断行业中的细胞扩增应用。血小板裂解液是由富含血小板的血浆纯化萃取而成，包含很多不同的细胞生长因子。血小板裂解液作用原理

血小板裂解液是由富含血小板的血浆纯化萃取而成，包含很多不同的细胞生长因子.GMP等级血小板裂解液添加肝素的目的

细胞zhi liao的生产是一项费时又昂贵的工程。优化生产工艺通常会涉及优化培养参数去减少时间、降低成本，同时提供呈现预期疗效的表型。细胞增长所需的培养基补充剂也是整个细胞生产工艺中的一个较关键的因素。胎牛血清（FBS）一直以来被作为是细胞培养的常用补充剂，但因涉及伦理和安全问题，如今从加工过的血液中提取的人源培养基补充剂已经得到越来越多的使用。血小板因其在血栓形成中的作用而闻名，很近，血小板被认为是伤口部位再生过程的关键介质。血小板裂解过程中释放的生长因子和细胞因子可调节局部免疫应答，并启动局部组织的加速恢复(图1)。考虑到血小板在人类生物学中这些作用，也就不难理解为什么处理过的血小板裂解液能够给细胞培养基提供可靠的促生长特性了。GMP等级血小板裂解液添加肝素的目的

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