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免疫组化(IHC)技术服务根据抗原抗体反应和化学显色原理,组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合,再利用一抗与标记生物素、荧光素等的二抗进行反应,前者再用标记辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(AKP)等的抗生物素(如链霉亲和素等)结合,***通过呈色反应或荧光来显示细胞或组织中化学成分,在光学显微镜或荧光显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产物,从而能够在细胞爬片或组织切片上原位确定某些化学成分的分布和含量。应用领域在人类步入新世纪后,免疫组化技术在liu研究中的应用也进入了一个新时代,随着越来越多新型、实用型抗体的出现及各种抗体新用途不断被发现,免疫组化技术已进入多标记和定量研究的阶段,使得该技术不**是liu学研究和诊断的重要方法,它已经日益***地应用于医学各领域中,其结果已成为疾病诊断的依据或诊断标准的重要内容。迈杰转化医学针对药物研发过程中靶点、适应症及PD研究中生物标志物等研究的进行方案开发设计。云南提供dMMR抗体检测试剂推荐咨询
对细胞表面和细胞内的各种抗原成分进行定位研究。免疫酶标技术是目前*常用的技术。本方法与免疫荧光技术相比的主要优点是:定位准确,对比度好,染色标本可长期保存,适合于光、电镜研究等。免疫酶标方法的发展非常迅速,已经衍生出了多种标记方法,且随着方法的不断改进和创新,其特异性和灵敏度都在不断提高,使用也越来越方便。目前在病理诊断中广为使用的当属***法、ABC法、SP法等。3、免疫胶体金技术免疫胶体金技术是以胶体金这样一种特殊的金属颗粒作为标记物。胶体金是指金的水溶胶,它能迅速而稳定地吸附蛋白,对蛋白的生物学活性则没有明显的影响。因此,用胶体金标记一抗、二抗或其他能特异性结合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作为探针,就能对组织或细胞内的抗原进行定性、定位,甚至定量研究。由于胶体金有不同大小的颗粒,且胶体金的电子密度高,所以免疫胶体金技术特别适合于免疫电镜的单标记或多标记定位研究。由于胶体金本身呈淡至深红色,因此也适合进行光镜观察。如应用银加强的免疫金银法则更便于光镜观察。四、免疫组化技术的优点1、特异性强免疫学的基本原理决定了抗原与抗体之间的结合具有高度特异性,因此。云南提供dMMR抗体检测试剂推荐咨询迈杰转化医学同时拥有符合GMP和ISO 13485的要求的GMP生产车间及仓储,可以充分满足客户的需求。
中位PFS分别为(P=),中位OS分别为(P=)。表1:CRYSTAL研究结果提示在RAS野生型的**患者中,通过将西妥昔单抗添加到FOLFIRI方案中,ORR、PFS与OS均有***获益。而出现任一**RAS基因突变(KRAS外显子2+新RAS)患者中,给予西妥昔单抗添加到FOLFIRI方案不管在ORR,还是在PFS和OS均无获益。TRICOLORE研究比较了S-1+CPT-11+Bev(实验组)*****mCRC在PFS上不劣于甚至优于mFOLFOX6或CapeOX联合Bev(对照组)的Ⅲ期研究。结果显示,试验组与对照组的中位PFS分别为,,亚组分析显示,对照组和试验组WTRAS(RAS野生型)中位PFS分别为;两组MTRAS(RAS突变型)中位PFS分别为,具体见下表。表2:TRICOLORE研究结果、PRIME、PEAK研究FIRE-3研究使用西妥昔单抗+FOLFIRI对比贝伐珠单抗+FOLFIRI,PRIME研究使用帕尼单抗+FOLFOX4对比FOLFOX4,PEAK研究应用帕尼单抗+mFOLFOX6对比贝伐珠单抗+mFOLFOX6,三项研究结果均表明相较于KRAS外显子2野生型患者,扩展RAS分析后的RAS野生型患者的***疗效更好。基于RAS基因状态筛选的患者,并进行靶向用***案的制定,才能符合患者的**大利益,同时符合对靶向药物***评估的新标准。表3:FIRE-3、PRIME、PEAK研究结果二、BRAF基因RAF是RAS的下游基因。
发明人还提供上述任一所述的抗msh6蛋白单克隆抗体,在msh6蛋白免疫检测中的用途。进一步地,所述免疫检测包括免疫组织化学法,免疫印迹法和酶联免疫法。区别于现有技术,上述技术方案依据msh6蛋白、抗原性、组成氨基酸的亲疏水性以及二级结构,选择msh6蛋白第1-100位氨基酸序列与gst蛋白融合表达,其dna编码序列为seqid**,用大肠杆菌进行表达,得到免疫原。对小鼠进行免疫,经细胞融合、筛选和亚克隆,获得高效分泌抗msh6蛋白单克隆抗体的单克隆细胞系abm58060-20a2-pu,以及由该细胞系所分泌的抗msh6蛋白单克隆抗体。本方案得到的抗体具有高特异性、敏感性,可以特异性识别表达msh6蛋白的细胞,适用于免疫学检测,特别是免疫组化检测。化染色结果图(左为abm58060-20a2-pu分泌的msh6,右为市售msh6)。具体实施方式实施例1重组msh6蛋白片段的制备一、抗原片段选择依据uniprot中登录号为p52701的蛋白质序列进行序列和二级结构分析,全长为1360个氨基酸长度的msh6蛋白含有muts超家族区域,其分子量约为152kda左右,依据通过在线服务器测的蛋白的二级结构(secondarystructure)和表面可及性(surfaceaccessibility)参数,并通过对其抗原性指数(jamesonba,:(1):181-6.)的分析结果。迈杰转化医学拥有3D HISTECH Pannoramic MIDI数字化病理扫描仪及91360远程病理系统。
dMMR(MSH6/MLH1/PMS2/MSH2)抗体检测试剂错配修复〈MismatchRepair,MMR)发生于DNA复制、重组及损伤修复过程,能够识别和修复错误的插入、缺失和整合。人体内常见的4种错配修复蛋白,即hMLH1、hMSH2、hMSH6、hPMS2协同发挥DNA错配修复功能。MMR系统任何一种蛋白缺失,都会导致DNA错配修复功能缺陷(MismatchRepairDeficiency,dMMR),产生复制错误或微卫显不稳定(MicrosatelliteInstability,MSI),进而诱导liu发生。
迈杰转化医学的dMMR抗体检测试剂采用免疫组织化学法(IHC)检测liu组织中MLH1、MSH2、MSH6和、PMS2四种蛋白的表达。
备案号
PMS2抗体试剂苏苏械备20180570号
MSH6抗体试剂苏苏械备20180569号
MSH2抗体试剂苏苏械备20180568号
MLH1抗体试剂苏苏械备20180519号
产品特点**使用北欧免疫组化质控中心NordiQC推荐的IHC抗体组合。精确经多平台平行验证(MSI-PCR、MSI-NGS),一致性高,特异性好普适覆盖多个主流IHC自动染色平台,适用范围广便捷方法简单易行,医保覆盖。 迈杰转化医学严格按照IS013485标准规定建立质量体系。云南提供dMMR抗体检测试剂推荐咨询
迈杰转化医学为全球合作伙伴提供包括生物标记物挖掘、药物靶点验证、伴随诊断开发等一体化解决方案。云南提供dMMR抗体检测试剂推荐咨询
3)阳性细胞核是否为liu细胞(图2)。通常MLH1功能缺陷会合并PMS2表达缺失,而MSH2缺陷则常合并MSH6表达缺失,反之则不然。如果检测结果出现MLH1、MSH2单独缺失或MLH1/PMS2、MSH2/MSH6以外的联合表达缺失,解释结果时需格外谨慎。对免疫组织化学结果的判读绝大多数文献均采用“任何liu细胞核表达即判为该错配修复蛋白阳性”的标准,但新近有文献报道发现少数MSI-Hliu表现为MSH6散在或小灶状表达(<5%)而MSH2完整表达(图2)。出现这一现象的病例有两种情况,其一为病例同时存在MLH1和/或PMS2表达丢失,这是由于MSH6基因编码区内本身即有一个含8个核苷酸的微卫星重复序列,在其他错配修复蛋白功能缺陷时可继发引起MSH6基因体细胞突变而出现多数细胞失表达现象;另一种情况见于新辅助***后切除标本,此时其他错配修复蛋白均完整表达且术前活检标本中MSH6也完整表达,推测该现象可能与新辅助***导致MSH6发生继发突变或liu细胞在缺氧环境下下调了MSH6的表达有关。这一现象提示:(1)即使仍有少数liu细胞(<5%)表达错配修复蛋白,liu仍可表现为MSI-H;(2)对于MSH6免疫组织化学染色中出现的这种特殊现象需结合临床病史和其他错配修复检测的结果判断。云南提供dMMR抗体检测试剂推荐咨询
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