安徽细胞外泌体载药实验服务

天然来源的外泌体含有众多内源性脂质、蛋白及核酸类物质,其自身句有一定的成药潜力,例如间充质干细胞来源的外泌体在组织修复领域获得了巨大成功。当外泌体用作递送载体时,一般还需人为装载药物。理想的载yao方法不jin要实现较高的载药效率,还应保留外泌体和药物的功能和完整性。目前,在不破坏外泌体膜完整性的情况下将药物有效载入到外泌体中仍是一个巨大挑战。现有的载yao方法可分为分泌前载药法和分泌后载药法。分泌前载药法通常将亲代细胞与药物共孵育(一般需要加转染试剂),使药物进入细胞质,细胞质中的药物通过主动或被动的方式被分选到外泌体中,然后通过合适的提取方法即可获得载药的外泌体。分泌后载yao方法是目前常用的外泌体载药策略,通常需要先分离提纯外泌体,再将药物载入其中。可以利用小鼠神经胶质瘤模型来验证CD—UPRT载入外泌体后在体内的抗中流作用。安徽细胞外泌体载药实验服务

间充质干细胞（MSC）的外泌体成为有潜力的天然药物递送载体的优势：与其他来源外泌体的产生机制一致，即首先由细胞质膜内陷形成内体，然后内体向内出芽形成多泡体，而多泡体具有两种命运，一种是移动到细胞表面与质膜融合，以胞吐的方式将外泌体释放到细胞外;另一种是与溶酶体结合，将内容物降解。MSC-Exo具有外泌体的共同特征，即富含四跨膜蛋白CD9、CD63、CD81，整合素，主要组织相容性复合物Ⅰ、Ⅱ，热休克蛋白，多泡体合成相关蛋白(ALIX、TSG101)，核酸，胆固醇、磷酸甘油酯、鞘磷脂等。此外，MSC-Exo还具有特异性标志物，例如，CD29、CD90、CD73和CD44等。MSC-Exo具有与MSCs相似的生物学功能，而且避免了细胞移植的风险，易于获取、储存和管理;可控性高、免疫原性低、安全性好。江苏外泌体载药的方法外泌体装载小分子药物的方法有很多,主要有被动孵育、超声、电穿孔及供体细胞载药等。

疏水性的小分子药物如紫杉醇、紫衫酚、阿霉素（DOX）、姜黄素等可以通过与分离纯化的外泌体共孵育，将药物负载到外泌体中。这种方法的载药量往往较低，通过高效液相色谱检测紫衫醇的载药量一般为7.2％，DOX的载药量一般为11.2％。为了达到高效负载药物的目的，研究人员采用了电穿孔、挤出、辅助超声、低渗透析等一系列载yao方式将疏水性卟啉化合物载入到外泌体中。研究结果显示，电穿孔法、挤出、超声、低渗透析等一系列载yao方式都可以提高卟啉化合物的载药量。尤其是超声和低渗透析方法可以提高卟啉化合物的载药量到11倍。

间充质干细胞外泌体（MSC-Exo）在外泌体载药中作为药物递送的载体具有独特优势。目前临床上普遍使用MSCs的原代细胞，虽然其可以产生大量的外泌体，但是对于大规模生产来说，它的增殖能力有限，产生的外泌体可能具有批次间的差异。Chen等人发现，使用c-myc转染人胚胎干细胞衍生的间充质干细胞(hESC-MSC)，能够在不影响外泌体生产质量的前提下，提高MSCs的增殖率，缩短生产时间。转染的hESC-MSC能够供应毫克范围内的外泌体，为生产具有生物学效益的外泌体提供了一定的可行性。此外，还可以对外泌体进行功能化修饰，进一步增强外泌体的作用优势。外泌体的功能化修饰能够延长外泌体的循环时间、增强外泌体在细胞质的递送效率和促使外泌体具有更强的靶向性。姜黄素装载在牛奶来源的外泌体经口服方式可以有效地调控靶细胞。

休眠性乳腺ai细胞会促使间充质干细胞（MSCs）释放含有不同miＲNA(如miＲ-222/223)的外泌体，从而促进一部分ai细胞处于静止期，并赋予抗药性。有研究发现，间充质干细胞外泌体（MSC-Exo）能够通过递送miＲNA-142-3p抑制剂在体外和体内降低乳腺ai的致瘤性。在体外，MSC-Exo可有效递送miＲ-142-3p抑制剂，降低miＲ-142-3p和miＲ-150水平，增加调控靶基因APC和P2X7Ｒ的转录。在体内，MSC-Exo能够将抑制性寡核苷酸递送到中流组织中以下调miＲ-142-3p和miＲ-150的表达水平。此外，MSC-Exo递送的miＲ-100能够通过调节乳腺ai细胞中mTOＲ/HIF-1α/VEGF信号轴，抑制体外血管生成，从而影响乳腺ai细胞的行为。利用成纤维细胞样干细胞来源的外泌体装载靶向KRAS的siRNA，可以抑制胰腺ai的生长。河北动物血液样本外泌体载药实验咨询问价

分泌作为药物载体的外泌体的母代细胞主要有干细胞类、中流细胞类、树突细胞类以及其他细胞(HEK293细胞)。安徽细胞外泌体载药实验服务

外泌体也可作为蛋白类药物的载体用于疾病的zhiliao。Haney等人将包载过氧化氢酶的外泌体用于帕金森疾病的zhiliao。实验结果表明，超声是将过氧化氢酶包载到外泌体中的jia方式，能有效地避免过氧化氢酶的降解。体内研究结果显示，包载过氧化氢酶的外泌体能明显地降低大脑黑质致密部中炎症因子CD11b的表达，该组中多巴胺神经的数量比对照组高3倍，说明它能有效地保护多巴胺神经，防止其退化。目前已有研究报道，外泌体自身携带的蛋白类物质同样可以用于疾病的zhiliao。安徽细胞外泌体载药实验服务