四川高通量测序方法
全基因组测序要注意的事项:全基因组测序是对未知基因组序列的物种进行个体的基因组测序。技术路线:提取基因组DNA,然后随机打断,电泳回收所需长度的DNA的片段(0.2~5Kb),加上接头,进行DNA簇(Cluster)制备,后利用Paired-End(Solexa)或者Mate-Pair(SOLiD)的方法对插入片段进行测序。然后对测得的序列组装成Contig,通过Paired-End的距离可进一步组装成Scaffold,进而可组装成染色体等。组装效果与测序深度与覆盖度、测序质量等有关。常用的组装有:SOAPdenovo、Trimity、Abyss等。测序深度(Sequencingdepth)是指测序得到的碱基总量(bp)与基因组大小的比值,它是评价测序量的指标之一。测序深度与基因组覆盖度之间是一个正相关的关系,测序带来的错误率或假阳性结果会随着测序深度的提升而下降。测序的个体,如果采用的是双末端或Mate-Pair方案,当测序深度在50X~100X以上时,基因组覆盖度和测序错误率控制均得以保证,后续序列组装成染色体才能变得更容易与准确。测序的完成程度,决定着基因组的下游应用。四川高通量测序方法
高通量基因组测序中,测序深度和覆盖度指的是:测序深度是指测序得到的总碱基数与待测基因组大小的比值。假设一个基因大小为2M,测序深度为10X,那么获得的总数据量为20M。覆盖度是指测序获得的序列占整个基因组的比例。由于基因组中的高GC、重复序列等复杂结构的存在,测序终拼接组装获得的序列往往无法覆盖有所的区域,这部分没有获得的区域就称为。例如一个细菌基因组测序,覆盖度是98%,那么还有2%的序列区域是没有通过测序获得的。四川高通量测序方法病毒全基因组测序基于PCR技术和抗原抗体技术的售后验证平台,致力于解决临床的每一个疑问。
病毒基因组测序:病毒基因组测序包括完成图测序、扫描图测序和重测序三个层面,通过二代/三代测序平台,获得病毒的基因组的序列信息,并在结构基因组学、比较基因组学层面通过差异分析、同源基因分析、共线性分析、物种进化分析等手段探究病毒的毒力系统、基因组的进化与演变历程等。对疑似传染标本采集提取后直接进行高通量测序,通过病原微生物专门用的数据库比对和智能化算法分析,获得疑似致病微生物种属信息,并提供全方面深入的报告,为疑难危重传染提供快速准确诊断依据,促进药物的合理应用。
发现病例的要尽快对病毒进行全基因组测序的原因是:通过对病毒全基因组高通量测序可以在较短时间内获取病毒的全部基因信息,解释病毒的来源、传播、变异演化等科学问题,为后续流行病学调查指明方向,为相关病例的追踪溯源提供重要依据,目前对病毒溯源分型主要检测手段就是高通量测序技术。高通量测序技术如何进行病毒溯源?先对获得的早期病例标本开展病毒全基因组高通量序列测定,通过与本地流行病毒及全球其他地区测定过序列的病毒比较,如果该病例传染的病毒在基因组上和北美流行株更接近,比如在全长接近3万个碱基的序列上,两者只相差几个碱基,相似度为99%以上,这就是为我们推断该病例携带病毒为北美流行株提供依据。Sanger测序准确度高,读长很长。
新一代测序中基因从头测序和重测序有什么区别?从头测序的原理是生成互相分离的若干组带放射性标记的寡核苷酸,每组寡核苷酸都有固定的起点,但却随机终止于特定的一种或者多种残基上。可以区分长度只差一个核苷酸的不同DNA分子的条件下,对各组寡核苷酸进行电泳分析,只要把几组寡核苷酸加样于测序凝胶中若干个相邻的泳道上。全基因组重测序是对已知基因组序列的物种进行不同个体的基因组测序,并在此基础上对个体或群体进行差异性分析。SBC将不同梯度插入片段的测序文库结合短序列、双末端进行测序,帮助客户在全基因组水平上扫描并检测与重要性状相关的基因序列差异和结构变异,实现遗传进化分析及重要性状候选基因预测。探普生物进行了大量有针对性的研发和测试,开发了全套的实验和分析流程用于对病毒的全基因组进行测序。四川高通量测序方法
病毒全基因组测序具有的特点:独有的一定定量技术,实现病原定量分析。四川高通量测序方法
探普生物进行病毒基因组测序的流程:在探普生物进行病毒基因组测序非常简单,简而言之,客户只需要说清楚样品情况,准备样品即可,其他事宜都由探普来进行安排。大致流程如下:1)与销售人员沟通项目需求和样本情况;2)探普生物工作人员拟定项目合同,双方协商合同内容后签字盖章;3)按样本准备指南准备好样本,填写信息单后通知销售人员预订干冰,安排样本寄运输;4)客户支付项目启动款,探普生物启动项目实验和分析并提供测序报告;5)客户支付项目尾款,探普生物提交测序数据和分析结果;6)售后问题处理,项目结题。四川高通量测序方法
上海探普生物科技有限公司主要经营范围是医药健康,拥有一支专业技术团队和良好的市场口碑。公司业务分为病毒测序,病毒全基因组测序,病毒宏基因组测序,未知病原鉴定等,目前不断进行创新和服务改进,为客户提供良好的产品和服务。公司从事医药健康多年,有着创新的设计、强大的技术,还有一批**的专业化的队伍,确保为客户提供良好的产品及服务。上海探普生物秉承“客户为尊、服务为荣、创意为先、技术为实”的经营理念,全力打造公司的重点竞争力。
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