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CCK-8试剂盒操作说明:细胞增殖-毒性检测。1、在96孔板中配制100μL的细胞悬液。将培养板放在培养箱预培养24h(37℃,5%CO2)。2、向培养板加入10μL不同浓度的待测物质。3、将培养板在培养箱孵育一段适当的时间(例如:6、12、24或48h)。4、向每孔加入10μLCCK-8溶液(注意不要再孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。5、将培养板在培养箱内孵育1-4h。6、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。7、若暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10μL0.1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24h内测定,吸光度不会发生变化。注意:如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加CCK-8之前更换新鲜培养基(除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的培养基),去掉药物影响。当然药物影响比较小的情况下,可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。CCK-8试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化的反应。Lipopolysaccharides ( 脂多糖)生产公司
CCK-8实验注意事项:若暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10 μL 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定,吸光度不会发生变化。如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加CCK8之前更换新鲜培养基(除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的培养基),去掉药物影响。当然药物影响比较小的情况下,可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。当使用标准96孔板时,贴壁细胞的至小接种量至少为1000 个/孔 (100 μl 培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此推荐接种量不低于2500 个/孔 (100 μl 培养基)。酚红和血清对CCK8法的检测不会造成干扰,可以通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去。CCK8可以检测大肠杆菌,但不能检测酵母细胞。在细胞增殖实验每次测定的过程中需要避免细菌污染,以免影响结果。CCK-8在0-5℃下能够保存至少6个月,在-20℃下避光可以保存1年。MHY1485厂家直供Dexamethasone (Hexadecadrol) 是一种糖皮质受体激动剂。
STAT3介绍:信号转导和转录唤醒因子(SignalTransducerandActivatorofTranscriptionSTAT)属于细胞质转录因子家族蛋白,负责胞外细胞因子和生长因子信号转导以及基因转录的唤醒。STAT具有信号转导和转录唤醒双重功能,当细胞因子或生长因子唤醒相应受体后,STAT蛋白被唤醒,将胞外信号转入细胞核内,从而调控相关基因的转录与表达。在哺乳动物细胞中有7个STAT家族成员,包括STAT1,STAT2,STAT3,STAT4,STAT5α,STAT5β,STAT6,它们具有20-50%的同源性。细胞周期控制、细胞存活和免疫应答等许多相关基因受到STAT蛋白的调控。
CCK-8试剂盒优点:使用方便,省去了洗涤细胞,不需要放射性同位素和有机溶剂;CCK-8法能快速检测;CCK-8法的检测灵敏度很高,甚至可以测定较低细胞密度;CCK-8法的重复性优于MTT法,MTT实验生成的formazan不是水溶性的,需要使用DMSO等有机溶剂溶解;而本方法产生的formazan是水溶性的,不只省去了溶解步骤,更因此而减少了该操作步骤带来的误差;CCK-8法对细胞毒性小,可以多次测定选取测定时间,与MTT方法相比线性范围更宽,灵敏度更高;CCK-8细胞活性检测试剂中为1瓶溶液,毋需预制,即开即用。蛋白酶抑制剂在抑制蛋白酶分解蛋白过程中起到了重要作用。
Chloroquine phosphate是什么?杭州昊鑫生物科技股份有限公司小编介绍,Chloroquine phosphate是一种用于疟疾和类风湿性关节炎的抗疟疾药剂。Chloroquine phosphate 是 autophagy 和 toll-like receptors (TLRs) 的抑制剂。Chloroquine phosphate 有效抑制 SARS-CoV-2 (COVID-19) 传染 (EC50=1.13 μM)。chloroquine这种化合物可在微摩尔浓度有效阻断2019-nCoV传染,EC50值为1.13 μM;选择指数(selectivity index,用于判断药物效果的安全范围,指数越大安全范围越大)较高。在医学上常见的抑制剂药物有蛋白酶抑制剂、免疫抑制剂。靖江Laduviglusib
蛋白酶抑制剂可以与昆虫体内消化道中的蛋白酶作用形成酶-抑制剂复合物,干扰其正常代谢进而导致其死亡。Lipopolysaccharides ( 脂多糖)生产公司
CCK-8试剂盒操作说明:制作标准曲线(测定细胞具体数量)。1、先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞到培养板内。2、按比例(例如:1/2比例)依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度,一般要做3-5个细胞浓度梯度,每个浓度建议3-6个复孔。3、接种后培养2-4h使细胞贴壁,然后加CCK-8试剂培养一定时间后测定OD值,制作出一条以细胞数量为横坐标(X轴),OD值为纵坐标(Y轴)的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量(使用此标准曲线的前提是实验的条件要一致,便于确定细胞的接种数量以及加入CCK-8后的培养时间。)Lipopolysaccharides ( 脂多糖)生产公司
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