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    图7IHC检测FGF-19过表达（左：正常胆囊组织(阳性对照)；右：肝细胞*组织(弱阳性)）➤➤方案4：RNAscope法评估FGFR1/2/3/4的mRNA表达水平此外，RNAscope在细胞原位评估mRNAs水平方面，能够更直接精细地确定基因的扩增状况。迈杰转化医学在数字病理平台上已经建立了检测FGFR过表达的RNAscope的方法，可以原位检测FGFR1-4mRNAs表达水平，为FGFR抑制剂的生物标志物检测和研究提供了更多可能（图8）。图8RNAscope检测肺*总FGFR1/2/3/4的mRNA表达水平除以上示范，迈杰转化医学还可提供其他类型（如PD/PK生物标志物）解决方案并已有相关经验（表7）。References:[1]HelstenT,ElkinS,ArthurE,[J].ClinicalCancerResearchAnOfficialJournaloftheAmericanAssociationforCancerResearch,2016,22(1):259.[2]TurnerN,.[J].NatureReviewsCancer,2010,10(2):116-129.[3]PetersKG,MarieJ,WilsonE,[J].Nature,1992,358(6388):678-681.[4]KangS,ElfS,DongS,.[J].MolecularandCellularBiology,2009,29(8):2105-2117.[5]BabinaIS,[J].NatureReviewsCancer,2017,17(5):318.[6]NataliaPorębska,Marta,.[J].JournalofClinicalMedicine。 迈杰转化医学利用新一代智能技术补充传统医学的检测模式，赋能医疗健康建设，更好地为临床和患者服务。浙江标准迈杰转化医学NGS平台共同合作

02FGFR通路的异常调控FGF/FGFR通路的异常调控由多种因素介导，包括：基因改变（扩增、突变和染色体易位）；自分泌和旁分泌信号；血管生成以及上皮间质转化（EMT），进而促进细胞增殖、上皮间质转化和血管生成，并推动**的发***展、侵袭、转移等（图2），其中主要的三种调控途径为：a.FGFR基因扩增导致的蛋白过表达；b.***性突变,该突变通常会导致配体亲和力的提高或受体二聚化的增加及活化（配体不存在的情况下），或激酶结构域的组成性***；c.由染色体易位导致的基因融合。图2FGFR异常调控的致*机制[5]图2FGFR异常调控的致*机制[5]03FGFR异常形式以及在不同**中的分布FGFR常见变异形式包括基因扩增/过表达、***突变、基因融合等，此外还有重排、激酶结构域重复及自分泌***等。FGFR的异常表达已在多种实体瘤肿中检测到，如过表达常发生在肺*、脑*、头颈*、前列腺*等，融合常发生在骨髓增生综合征、T细胞淋巴瘤、膀胱*和肝内胆管*等（表1）。安徽专业迈杰转化医学NGS平台创新服务迈杰转化医学为创新药企开展全球多中心临床试验研究，提供中心实验室检测及伴随诊断开发服务。

    降低引物的扩增效率，也需要重新设计并合成引物。3、初次复合扩增时，各个引物在反应体系中的浓度均为μm；之后对引物浓度进行调整，获得进行pcr扩增时各个引物的**佳浓度。经过上述步骤，获得引物组合。引物组合由120条引物组成，用于检测68个基因座。各个基因座的名称、扩增基因座对应的引物名称和引物的核苷酸序列依次见表1中第1列、第2列和第3列。进行pcr扩增时各个引物的**佳浓度见表1中第5列。表1各个基因座对应的引物在hg38人类参考基因组(hg38人类基因组的信息见网址./goldenpath/hg38/bigzips/)中的pcr扩增产物的长度和核苷酸序列详见表2。各个str基因座的pcr扩增产物的长度范围分布见图1。表2三、基于二代测序技术检测68个基因座的试剂盒的制备基于二代测序技术检测68个基因座的试剂盒包括引物混合物；引物混合物由步骤二制备的120条引物混合而成。实施例2、实施例1制备的试剂盒检测标准品2800m的str分型及其应用一、实施例1制备的试剂盒检测标准品2800m的str分型1、dna样本准备取标准品2800m，用超纯水稀释，获得浓度为1ng/μl的标准品2800m水溶液。2、pcr扩增以标准品2800m水溶液为模板，采用实施例1步骤三制备的引物混合物进行pcr扩增，得到pcr扩增产物。

    h1)str分型；(h2)y-str分型；(h3)个体识别；(h4)亲权鉴定；(h5)种族推断。本发明还保护上述任一所述引物组合或上述任一所述复合扩增体系的应用，可为(h1)-(h5)中的至少一种：(h1)str分型；(h2)y-str分型；(h3)个体识别；(h4)亲权鉴定；(h5)种族推断。上述任一所述68个基因座具体可由amelogenin、dys19、dys385a/b、dyf387s1a/b、dys388、dys389-i、dys389-ii、dys390、dys391、dys392、dys393、dyf399s1、dyf404s1a/b、dys437、dys438、dys439、dys443、dys444、dys446、dys447、dys448、dys449、dys456、dys458、dys459a/b、dys460、dys481、dys485、dys504、dys505、dys508、dys510、dys518、dys520、dys522、dys527a/b、dys531、dys533、dys549、dys552、dys557、dys570、dys576、dys587、dys593、dys596、dys612、dys617、dys622、dys626、dys627、dys630、dys635、dys641、dys643、dys644、dys645、dys710、dys720、y-gata-a10和y-gata-h4组成。其中，amelogenin为性别决定基因座。dyf399s1包含三个分型片段。dys385a/b、dyf387s1a/b、dyf404s1a/b、dys459a/b和dys527a/b均包含两个分型片段。本发明提供的试剂盒可以检测68个基因座。 迈杰转化医学与全球品牌药企广f泛展开伴随诊断产品的开发合作，已有多个诊断产品上市。

    染色体STR不属于测序技术的，它是一类分子检测技术，例如Y染色体-STR，一般通过PCR、电泳凝胶结合来分析这段串联重复序列的存在或者多态性，常用来检测性别或亲子鉴定，而不能测出具体的DNA序列信息。测序技术是一代测序（sanger测序）、二代测序（高通量测序）、三代测序（单分子测序）为基础的。二代测序的缺点主要是由其PCR边复制边读取的原理决定的，测序时间长，读长短，末端质量差。三代测序中PacBio实际上就是针对这些缺点的升级，通过巧妙的微孔设计实现单分子读取，而且可以屏蔽游离dNTP的信号，不用每读取一次就要清洗—添加一次dNTP，所以读长比较长，测序速度快。就是样本—提DNA—打成小片段，然后就开始PCR啊末端修复啊加A啊片段选择啊一系列，***得到片段大小为300-500bp的DNA，ok文库搞定。虽然这行真的干的烦死了，不过离开了真的很想念。 迈杰转化医学具体包括全套的Leica组织样本制备系统，Ventana、Leica、DAKO等全自动免疫组化仪。河南Claudin18.2迈杰转化医学NGS平台值得推荐

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    于是，每个反应会产生许多不同长度的DN**段，并在模版的任一核苷酸位置上由其中一种双脱氧核糖核苷酸终止链的延伸。反应混合物可以通过手动灌胶或自动灌胶到用毛细管进入测序机器，再根据DNA分子大小不同用电泳分离DNA。当DNA流过凝胶后，DNA序列可以通过双脱氧核糖核苷酸上发出的荧光来进行分析。当今的Sanger测序仪使用的是毛细管自动上样的凝胶电泳，一般可以同时分析8-96个系列反应。二代测序系统在十年前就是因其可同时进行大量平行测序反应而广为人知。这些系统可以同时分析百万甚至上亿个序列反应。虽然不同的机器生产时会在技术细节上有许多不同，但他们都有以下几个共同点：1,文库建立：所有二代测序的平台都需要一个基因文库，这个基因文库包含通过引申或者连接自定义的接头序列。2,测序仪器：每个文库片段在共阶吸附的DNA连接因子的作用下，以文库适配序列为模版，在固体表面上进行扩增。这步扩增会产生许多DNA蔟，每个来源于一个文库片段，每个基因蔟都会像**的测序反应一样起作用。3,数据输出：每个仪器都会在测序结束后给出原始数据。这个原始数据时每个基因蔟中形成的DNA序列的**。作者：丽舍咨询链接：源：知乎著作权归作者所有。 浙江标准迈杰转化医学NGS平台共同合作