南京单细胞TCR测序平台

时间:2022年06月06日 来源:

RNA测序(RNA-seq)是转录组学研究的重要工具,也是生命科学领域常用的技术之一。相比于传统通路研究低维度、低通量的局限性,转录组学有以下优势:1)能够动态考察细胞基因组的表达,多维度地反映差异变化;2)可用于研究占RNA绝大部分的非编码RNA,研究其结构以及在细胞生命活动中的重要调控作用;3)与蛋白组学研究相互补充,多角度呈现细胞水平的变化信息。作为转录组学研究的技术基础,RNA测序技术也在不断地更新迭代,现如今更大通量、更深精度的测序为众多科研和医学工作者提供了丰富的工具和探索真理的手段。附加流式分选细胞表面Marker,对于较低分辨率的标志物也能有效鉴定,助力高要求测序项目。南京单细胞TCR测序平台

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单细胞测序实验再样本细胞上机分选签,需要对细胞数量、细胞活性进行准确判断,这对Single Cell分选标记、建库、下机数据的质量都具有着决定性的作用。如若细胞计数偏高,将会影响建库的成功率;计数偏低,则会显著提高双细胞的比例;而细胞活率过低,就会使测序数据的利用率大打折扣,因此把好单细胞悬液质量这一关尤为重要。而在铺板过程中,由于不同操作人员手法具有不可避免的差异,不同的液体流速将直接影响单细胞的入孔效果。因此烈冰生物BD Rhapsody单细胞分选平台配套了专门定制的电动移液器,其具有Prime Treat、Cell Load、Bead Load、Wash、Lysis、Retrieval多种操作模式,来对应各种不同的操作。通过已经设定的程序来控制液体的流速,大幅度降低人为操作习惯带来的差异,保证实验操作的一致性。

10X Genomics和Drop-Seq的技术原理。是利用十字交叉的通道,从横向孔道中逐一输入凝胶微珠,纵向孔道输入细胞,凝胶微珠与细胞碰撞后会吸附在凝胶微珠上,并通过微流控技术,将之输入到油相孔道中。这时候,就形成了一个个油滴后输出并收集在EP管中。每一个油滴中会落入一个细胞以及一个凝胶微珠,那么在每一个凝胶微珠中上长满了不同的Cell Barcode和UMI Barcode连接形成的序列,再加上一端PolyT的抓手,构成我们的捕获凝胶微珠。而这个凝胶微珠抓手就会使用oligo dT抓住mRNA构建文库,进而完成细胞中RNA的捕获过程。烈冰生物为您提供一站式全流程高通量测序服务。

不同类型的细胞或者在不同的条件下,活细胞中染色质的结构是在不断变化的,比如说各种应激反应(stimulus response)和抗逆反应(stress response)等,也就是说染色质的可及性是会随细胞类型和外界刺激的改变而发生变化,而染色质开放区域的定向测序可以帮助我们了解细胞的转录调控过程,确定开放染色质的位置、转录因子的调控差异、核小体的调控区域和染色质状态等信息,确定哪些基因在细胞中具有转录活性。单细胞多组学测序是一种比较强大的表观遗传学研究工具,在开放染色质图谱绘制,细胞分化发育,疾病的致病机制,样本微环境等方面具有极大的应用前景。经验丰富的实验团队,为获得示组织内真实表达水平的高质量冷冻切片提供硬件和技术保障。广州单细胞多组学测序价格

烈冰科技成立10余年,为科研学者提供专注的测序数据分析服务。南京单细胞TCR测序平台

空间转录组测序的数据分析基本分为三个阶段:1. 数据的预处理部分;2. Spot点阵的分群与定义;3. Spot分群的功能与生物学价值。每一个部分都不可或缺,其结果都对后续的分析结果有重要影响。由于空间转录组的序列结构与单细胞转录组测序的左端序列结构是非常接近的,都是Cellbarcode/SpotBarcode + UMI + 捕获区域这样的设计。右端普遍为捕获的RNA序列。因此采用单细胞的原始数据过滤策略即可,左端可以考虑切下捕获区域前的序列区域作为后续分析用的序列以减少分析负荷。随后,采用10X官方的Spatialranger的策略进行后续分析,解析出位于空间位置中的有效的Spot表达矩阵。南京单细胞TCR测序平台

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