北京化学荧光寿命成像要多少钱

时间:2022年07月14日 来源:

荧光寿命成像显微术(FLIM)是一种利用荧光染料固有特性的成像技术。除了具有特有的发射光谱外,每个荧光分子还有特有的寿命,它反映了荧光基团在发射光子之前处于激发态的时间。除了标准的荧光强度测量外,寿命分析还可以提供其他信息。过去,寿命成像一直是一种缓慢、复杂的专业化技术。只有经验丰富的显微镜**或物理学家才会使用这种技术。荧光寿命成像提供了额外的信息,有助提高共聚焦成像的质量。它非常适合用于区分荧光发射光谱重叠的荧光探针,或消除不需要的背景荧光信号。时域和频域技术在各种荧光显微寿命成像平台中都有应用。北京化学荧光寿命成像要多少钱

荧光寿命是荧光团在发射荧光光子返回基态之前保持其激发态的平均时间长度。这取决于荧光团的分子组成和纳米环境。荧光寿命成像将寿命测量与成像相结合:对每个图像像素以测得的荧光寿命进行颜色编码,产生额外的图像反差。因此,荧光寿命成像可以提供关于荧光分子空间分布的信息和有关其生化状态或纳米环境的信息。有很多技术可以在显微镜环境中检测荧光寿命。常见的的是基于供体(受体光漂白,FRET AB)或受体(敏化发射,FRET SE)荧光强度的技术。广东生物荧光寿命成像怎么操作荧光寿命可以在频域或者时间域测量。

受光学衍射极限的限制,荧光显微技术的空间分辨率只能达到200纳米左右,难以满足生命科学研究的需要。而对于荧光寿命成像来说,其空间分辨率受衍射极限的影响尤为严重。荧光寿命成像是一个新兴的研究领域,寻求具有高度原创性的技术原理与方案,并率先解决荧光寿命成像在生命科学应用中存在的难题,具有重大的科学意义与应用价值。一种荧光寿命成像方法,所述方法包括下述步骤:对标记于样品中的光开关染料分子进行稀疏激励;激发样品中被激励的光开关染料分子,收集被激发的光开关染料分子所发射的光子并记录光开关染料分子的荧光图像,对荧光图像中的光开关染料分子进行质心定位;对在质心定位处接收到的光子进行计数,确定被激发的光开关染料分子的荧光寿命;结合得到的光开关染料分子的质心定位结果和荧光寿命,构建荧光寿命图像。

荧光寿命成像FLIM在生物学上的应用根据荧光分子种类可以分为三种:分别为自发荧光FLIM、外源分子探针FLIM和FRET-FLIM。自发荧光FLIM被普遍应用于非标记生物成像领域。所谓自发荧光,即生物细胞本身便包含荧光分子,称为内源性荧光分子团。FLIM通过对自发荧光分子团(如NAD(P)H和FAD)荧光寿命的考察,可以实现细胞代谢的监测。这种方案无需人为对样品加入荧光试剂便可以发射荧光,有效减少了荧光染料对样品的毒性、荧光分子与样品的非特异性结合及染料对生理性能的干扰影响。荧光寿命成像扩展了传统荧光成像的维度,是功能成像的理想工具;

荧光寿命成像在生物医学研究和临床诊断应用中的许多场合都对多光谱分辨提出特殊要求,如在FRET测量中,要求能同时测量供体和受体的荧光强度随时间的衰减,多光谱分辨的荧光寿命成像提供了一种新的定量研究手段.目前,基于门控像增强器的多光谱宽场FLIM 技术一次只能获得至多两个谱段的荧光寿命图像,而基于TCSPC的多光谱分辨FLIM的成像速度又很低,这些都限制了其应用范围.目前的一个研究方向是,发展光谱分辨率高、成像速度快、价格低廉的多光谱分辨荧光寿命成像显微技术。荧光寿命成像可以提供有关电信号变化、离子和氧含量、温度、细胞或其环境中的 pH 值的定量信息。北京化学荧光寿命成像要多少钱

荧光寿命成像(FLIM)可用于测量分子环境参数。北京化学荧光寿命成像要多少钱

荧光寿命成像是一种新型的荧光成像技术,它能够对不同种类或处于不同状态的生物组织提供更好的对比度,并反映荧光团及其所处微环境参数的定量分布。荧光寿命成像一般不受诸如激光或荧光强度扰动、荧光染料分布不均匀、染料的光漂白以及其他有碍荧光强度的因素的影响,是荧光光谱分析法的有效补充。超快激光技术,高速、高灵敏度探测技术,以及图像处理技术的发展,都促进了FLIM 技术的发展.尤其是将荧光寿命成像和共焦显微技术以及多光子激发荧光显微技术结合,进一步拓宽了FLIM在生物学领域的应用范围。北京化学荧光寿命成像要多少钱

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