无血清细胞冻存液

通用细胞冻存液(无血清)的简介：随着实验室细胞培养的发展，除了原代培养之外，人工开发出来的细胞系的保存越来越重要。细胞冷冻的原理在于尽可能降低细胞内的晶体形成，减少细胞内水凝固所形成的高浓度溶质对细胞造成的低温损伤，从提高细胞复苏时的存活率。细胞冻存的数量应保证复苏时低温保护剂获得稀释，稀释后的细胞浓度扔高于正常传代的细胞浓度为宜，这是因为当低温保护剂稀释以后，该浓度一般不会对细胞造成毒性损伤。通用细胞冻存液(无血清)主要由培养基、DMSO等组成，不含血清，是一种经典的无菌冻存液。用于各种哺乳动物原代细胞、传代细胞系、杂交瘤细胞等的冻存。血清批次、品质间差异导致冻存液的批次间差异。无血清细胞冻存液

细胞冻存秘籍：1.在倒置相差显微镜上每隔几分钟检查酶处理的进展情况。一旦细胞变圆，轻轻敲击细胞瓶使其脱离塑料表面。加入5mL含血清的生长培养基灭活胰酶。可能需要剧烈的移液操作来使培养容器底部的剩余细胞脱落，或将细胞团块分解成单细胞悬浮液。胰酶的去除或失活对于冷冻细胞至关重要。如果游离试剂不能直接灭活，可以通过下一步的离心去除。2.用15ml离心管收集细胞。取出样本进行细胞计数，剩余的细胞悬液以约100×g离心5分钟以获得细胞沉淀。离心时，用细胞计数板对细胞进行计数。使用台盼蓝染液检查细胞的活性。南昌正规无血清细胞冻存液厂家推荐细胞冻存可以分为程序降温冻存与非程序降温冻存。

胞冷冻保存方法：选择冻存处于对数生长期的细胞有助于提高复苏细胞存活率。1.按照常用方法收集悬浮细胞或贴壁细胞于试管中。2.按照培养细胞密度和所用细胞冻存管的尺寸计算所需冻存细胞数。（参考：5×105至5×106cells/ml）。3.取相当于所需细胞数的细胞悬浮液量，置于离心管中，离心收集培养细胞（参考离心条件：1,000~2,000rpm，4℃，3~5min）。移去离心管中的上清液。4.加入适量的无血清型细胞冻存液于离心管中，使细胞浓度为5×105至5×106cells/ml。缓慢地混合均匀，制成细胞混合液。5.将离心管中的细胞混合液分装于已标示完全的冷冻保存管中。6.直接将含细胞混合液的冻存管放入-80℃冰箱，长期冷冻保存。7.若研究者需要液氮保存时，可将完全冻结的冻存管（放入-80℃冰箱后至少一昼夜）移至-196℃液氮罐。

随着细胞治理以及细胞储存产业发展，细胞冻存也面临从科研应用走向产业转化。冻存要求发生改变，因为冻存细胞要进行临床应用，所以冻存液成分由原来血清变为无血清，无动物源成分，冻存液中使用的所有原料均应符合临床或药物需求。随着细胞冻存数量增加，冻存流程简化也成为必然趋势，因此无血清非程序降温冻存液应运而生。目前针对细胞治理领域，推出一款即用型的无血清细胞冻存液，这款产品是细胞冻存研究的革新，主要具有几大特点，冻存液无血清成分、无需配制直接使用、无需程序降温盒、不需分步降温、即用型细胞冻存液。该款冻存液适用于脐带、脂肪、等间充质干细胞，免疫细胞以及大多数细胞系冻存。同时该款所有成分均使用药用级原料配制而成，完全适应细胞储存，细胞治理以及科学研究等不同场景使用无血清细胞冻存液产品特色：各批产品之间有更高的产品质量一致性。

无血清细胞冻存液对比含血清细胞冻存液的优势：传统的细胞冻存液是使用培养基、血清和DMSO按照一定的比例混合，其中DMSO的含量是10%，血清的含量是10%，统称为含血清细胞冻存液。含血清细胞冻存液的一般的冻存方法是梯度降温冻存法，如先将冷冻管置于4℃冰箱10分钟，然后移至-20℃冰箱30分钟，再移至-80℃冰箱保存16-18个小时（或隔夜），较后才移至液氮罐中进行长期的储存。（其中需要注意的是-20℃条件下不可超过1个小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量的死亡。）无血清细胞冻存液，含多种保护剂成分。温州正规无血清细胞冻存液厂家批发价

无血清细胞冻存液：一些保护剂不能穿透细胞，但可以在冰晶形成之前，优先结合细胞外的水分子。无血清细胞冻存液

细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存，可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来，这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞，可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种，起到了细胞保种的作用。为什么要进行细胞冻存？连续培养的细胞系容易发生遗传漂变，有限细胞系较终会发生衰老，所有培养的细胞都易受到微生物污染，即使运转情况较好的实验室也会遇到设备故障的问题。由于已建立的细胞系是一种宝贵资源，更换细胞系成本高昂，而且耗费时间，因此，十分有必要将细胞冷冻起来长期保存。除此之外，还可以利用细胞冻存的形式来购买、寄赠、交换和运送某些细胞。无血清细胞冻存液