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非特异性条带 抗体（一抗或二抗）浓度过高 降低抗体浓度。 SDS可能引起对固定蛋白条带的非特 转膜后，振荡洗涤 异性结合 在操作过程中不使用SDS。 条带扩散 抗体（一抗或二抗）浓度过高 降低抗体浓度。 在凝胶上载入过多蛋白 减少蛋白上样量。 黑色印迹，白色条带， 抗体（一抗或二抗）浓度过高 减少抗体浓度，特别是HRP偶联的二抗。 或信号快速减少 免疫沉淀 采用抗体-抗原沉淀(又叫免疫沉淀(IP))的方法将特异性蛋白从细胞或组织裂解液中分离出来。上海益启订购抗体的服务电话是多少？长宁区标签抗体抗体报价

例如，磷酸特异性抗体可能只与活化的磷酸化蛋白发生反应。如果您的蛋白定位在胞内，则必须对细胞进行裂解。流式细胞实验可能要选择识别细胞表面分子的抗体。如果您的蛋白有三级结构，且掩盖了抗原表位，则必须对样本进行变性，因为有些抗体无法识别自然状态的蛋白。一些抗体只在冷冻或非固定组织中起效，而有些抗体只对经抗原修复后的石蜡切片起效。 目标蛋白的物种来源 比较好选择明确标有目标蛋白种属的抗体。参考抗体说明书或网站信息。金山区Sigma抗体抗体哪家优惠正规科研抗体品牌零售代理商家。

免疫沉淀(又叫免疫沉淀(IP)) 免疫沉淀是很有价值的研究工具，目的是研究某一特定蛋白的关键信息，包括：小规模蛋白纯化用于功能研究，N-端序列分析，蛋白-蛋白相互作用的研究，细胞或组织中蛋白相对丰度和分布的测定。免疫沉淀分析法的成功取决于两个主要因素：原始样品中抗原的丰度和抗体对该抗原的亲和力(一般需要108 M-1或以上的亲和力)。在开始免疫沉淀之前，确保特定的步骤有适当的实验对照。对照抗体在性质上尽可能与该特异性抗体类似。

除非您正在研究组蛋白和组蛋白修饰，否则您应采用X-ChIP方案，以使您的靶蛋白与DNA的连接稳定。增加交联时间。
蛋白G磁珠能结合更大范践的执体，包括小鼠单克境抗体，为达到抗体选择的比较大灵活性，我们推荐使用蛋白A/G混合物（目录号16-663）。检测PCR引物的效果。加入相应的时维物，必要时重新设计引物。 关于ChIP中关键步骤的详细讨论及实验问题解答，请参考默克密理博染色质免疫沉淀指南（ChIP实验指南）。 酶联免疫吸附实验（ELISA）上海益启生物的科研抗体询价公司电话。

问题 可能的原因 处理方法 印迹上出现条纹 在凝胶的蛋白负荷过量。 准确测量蛋白浓度，载入较少的蛋白。 印迹有污染或模糊 凝胶平衡不当，或在实验过程中收缩 检查凝胶平衡时间。 采用丽春红S染色时， 转膜无效 转膜时，小心除去气泡。 印迹染色较差 确保在电转过程中因为温度过高而产生气泡或凝胶/膜变形 采用丽春红S染色时， 在转膜过程中蛋白没有转移 检查设备（转膜盒、盒盖、电源）。 印迹没有染色 检查在转膜过程中凝胶和膜的顺序是 确保膜位于凝胶的右侧。 否正确上海H3抗体哪家靠谱？嘉定区WB抗体抗体哪家好

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无信号 在检测之前，转印膜在贮藏过程中发 生蛋白降解 二抗选择错误 曝光时间太短 抗原上样量不足 抗原可能被破坏 检测系统 一抗的亲和力较低 化学发光底物已丧失活性。 已从膜上剥离抗体并再次杂交。 处理方法 使用新转的膜进行实验。 检查是否使用适当的二抗。 增加曝光时间。 在凝胶上载入更多的抗原，或在载入之前使用超滤管浓缩样品， 或使用免疫沉淀，以增加凝胶中的目标蛋白量。 检查确保电泳处理未破坏抗原性。 增加（和优化）一抗的浓度和培养时间、温度。长宁区标签抗体抗体报价