齐齐哈尔培养基制备器

培养基配制：配制用水，培养基的大部分是水，所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准，水的电阻应为200万欧姆，一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。培养基：培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基，以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3（或HCl）调pH至7.2-7.4，若pH值超过7.6或远低于6.8，则大多数细胞不能生长。RPMI-1640不耐高压灭菌，使用前需经灭菌0.22μm孔径滤膜滤过处理。血清：培养中常使用小牛血清（或胎牛血清）。血清亦不能高压灭菌，无菌的小牛血清需在56℃水浴30分钟灭活补体，置4℃冰箱存放待用。配制时含量视培养细胞种类、时间而定，一般用10—15%。由于血清成分复杂、条件不易控制，可选用无血清培养基。培养基配成后一般需测试并调节pH，还须进行灭菌，通常有高温灭菌和过滤灭菌。齐齐哈尔培养基制备器

培养基配置原则：在配制用于观察和定量测定微生物生长状况的合成培养基时，常需在培养基中加入少量螯合剂，避免培养基中产生沉淀，常用的螯合剂为乙二胺四乙酸。还可以将含钙、镁、铁等离子的成分与磷酸盐、碳酸盐分别进行灭菌，然后再混合，避免形成沉淀；高压蒸汽灭菌后，培养基pH会发生改变（一般使pH降低），可根据所培养微生物的要求，在培养基灭菌前后加以调整。在配制培养基过程中，泡沫的存在对灭菌处理极不利，因为泡沫中的空气形成隔热层，使泡沫中微生物难以被杀死。因而有时需要在培养基中加入消泡沫剂以减少泡沫的产生，或适当提高灭菌温度。齐齐哈尔培养基制备器培养基的分装：培养基的分装，应按使用的目的和要求，分装于试管、烧瓶等适当容器内。

简单制作培养基，需要完成以下几个主要步骤：需要选择培养基配方，同一种培养基，其表达方式往往存在着差异。所以，除了应当严格按照标准方法的规定编制之外，我们一般应尽可能收集有关数据，加以比较和核对，然后根据自己的目的选择和记录数据来源。需记录培养基的制备，培养基的制备记录包括培养基的名称、配方及其来源、pH值、灭菌温度、时间、配制日期、制备人等，并且要复印记录和保存原始记录备查。对副本的记录应该和培养基一起保存，以防出现混乱。需称重培养基的成分，培养基成分要准确称量，并注意防止混淆。每一种成分称量完毕后，都要在分装的一面打上记号，然后将分装的药物一起放在左边。每一个成分称量完之后，都会向右移动。全部称量完毕，应再次检查。

天然培养基是指来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基，如血浆、血清、、鸡胚浸出液等。组织培养技术建立早期，体外培养细胞都是利用天然培养基。但是由于天然培养基制作过程复杂、批间差异大，因此逐渐为合成培养基所替代。较广使用的天然培养基是血清，另外各种组织提取液、促进细胞贴壁的胶原类物质在培养某些特殊细胞也是必不可少。血清种类：目用于组织培养的血清主要是牛血清，培养某些特殊细胞也用人血清、马血清等。选择用牛血清培养细胞的原因：来源充足、制备技术成熟、经过长时间的应用考验人们对其有比较深入的理解。牛血清对绝大多数哺乳动物细胞都是适合的，但并不排除在培养某种细胞时使用其他动物血清更合适。牛血清是细胞培养中用量很大的天然培养基，含有丰富的细胞生长必须的营养成份，具有极为重要的功能。全自动培养基制备仪主要特点：仪器盖设计保护锁，超过100度自动加锁，使实验环境更安全。

简单制作培养基，需要完成以下几个主要步骤：需要对其进行消毒处理，普通介质使用121℃高压蒸汽灭菌15分钟。本发明适用于各种介质的制备，如无特殊要求，可用于灭菌。一些热成分，如碳水化合物，应该单独制备20%或更多的浓缩液，过滤或间断杀菌，然后通过无菌操作技术加入到培养液中。在低温下，明胶培养基也能杀菌。血、体液及素应经无菌处理后，加至约50℃冷却培养基中。需要对培养基的质量进行检测。每次处理完培养基，都要仔细检查，如破损、浸渍、颜色异常、棉塞污染等，要进行筛选和弃置，才能确定 pH值。培养基培养一晚，若有细菌生长，培养基将被丢弃。常规菌株接种1×2管或瓶培养基，24 h培养，对生长不良或无菌的菌株进行培养，追踪其产生原因，并反复接种。如不发生变化，应丢弃培养基，禁止使用。培养基可以选择使用水浴模式预先溶解。齐齐哈尔培养基制备器

对一些需严格灭菌的培养基（如组织培养基），较长时间的贮存，必须放在3~6℃的冰箱内。齐齐哈尔培养基制备器

培养基在使用前通过高压或过滤灭菌。防止污染应该注意以下事项：确认工作细胞库是否被污染，确认毒种工作种子批是否被污染，确认所用培养基及其添加成分（如小牛血清、NaHCO3等）是否被污染，均可用细菌、及支原体无菌试验来确认并排除。同时要对无菌试验培养基的灵敏度进行验证。实际生产中，可以从配制好的培养液中取少量加入营养琼脂于恒温培养箱内培养，48小时即可观察有无污染。其它：高压灭菌设备、过滤除菌设备均应进行验证，确保灭菌和除菌效果;前者应在投产前及其后的每6个月进行验证，后者应在每次除菌前、后进行验证工作（至少应在除菌后进行一次）。另外，应将有毒区与无毒区严格分开，并有各自独自的空气净化系统及孵室，有毒区对无毒区应保持相对负压，防止病毒对培养细胞（尤其是细胞库）的污染。齐齐哈尔培养基制备器