抗体芯片 作用

多重荧光免疫组化，主要的技术原理来自TSA技术，TSA即酪酰胺信号放大技术(Tyramidesignalamplification)，是一类利用辣根过氧化酶（HRP）对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。该技术可与高性能染料AlexaFluor、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。简单来说，用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的HRP（而不是直接偶联荧光素），来催化后续添加入体系的非活性荧光素。荧光素在HRP和过氧化氢的作用下被活化，跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联，使得蛋白样品与荧光素稳定结合。然后微波处理，前一轮非共价结合的抗体被洗掉，共价结合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第二轮孵育，周而复始。等到所有抗体孵育结束，荧光素都结合好后，然后去检测结果。LabEx提供 mTOR、JNK、EGFR、STAT等磷酸化率测定。抗体芯片 作用

抗体芯片实验室服务思考留给科研，实验外包出去！抗体芯片是蛋白芯片的一种，具有微型化、集成化、高通量化的特点，可以用于检测某一特定的生理或病理过程相关蛋白的表达丰度，目前主要用于信号转异、蛋白质组学、肿块物及其他疾病的相关研究。抗体芯片检测的样本类型包括提取物、细胞培养上清、血清血浆等，检测的方式通过生物素标记的方法完成样本标记，然后芯片孵育，样本中相关蛋白与芯片上特异性抗体结合，通过荧光的方式使用芯片扫描仪检测。实验获得的数据将通过标准的数据处理流程进行分析。抗体芯片检测的优点：灵敏度高、特异性好、重复性佳、准确性高抗体芯片的检测内容包括：抗体芯片主要用于蛋白表达谱、蛋白质磷酸化及蛋白质相互作用等检测抗体芯片 作用流式细胞术(flow cytometry，FCM)是一项新型的、发展迅速的生物医学分析技术。

Luminex液相芯片检测实验技术服务原理：Luminex：应用微球和流式细胞仪的原理，微球内部含有三种免疫荧光，通过荧光不同的比例可以区分500种不同的微球。每种微球可以用来检测一种不同的蛋白或基因。因此，利用微球技术，可以同时检测高达500个蛋白或基因。Luminex技术的测量结果在准确度、精确度、灵敏度方面与ELISA均可达到相似的水平。Luminex应用的荧光编码微球带有针对不同目标分子的特异性抗体，不同的微球在一定程度上可以自由组合，这样在一次实验中可以同时完成多个目标分子的分析。多目标分子的同时测定可以减少生物样品的消耗量，节省成本和测定时间，并且使多种目标分子之间相关性的分析更加准确。目前，Luminex试剂盒已经可以检测500多种蛋白质分子，包括细胞因子、自身抗体、肿块物标志物等。

免疫组化染色呈阴性结果的原因有哪些？1)、抗体浓度和质量问题以及抗体来源选择错误。不知抗体是进口的还是国产的工作液，怎么这么高稀释度也没能做出阳性结果？另外，不是抗体浓度越高就越易出现阳性结果，抗原抗体反应有前带和后带效应，必须摸索比较好浓度。2)、抗原修复不全，对于甲醛固定的组织必须用充分抗原修复来打开抗原表位，以利于与抗体结合；建议微波修复用高火4次*6min试试。有人做过实验，这是比较好的时间和次数。若不行，还可高压修复。3)、组织切片本身这种抗原含量低；4)、血清封闭时间过长。5)、DAB孵育时间过短。6)、细胞通透不全，抗体未能充分进入胞内参与反应。7)、开始做免疫组化，我建议你一定要首先做个阳性对照片，排除抗体等外的方法问题。生物标志物检测--加速推动免疫学研究进展！

酶联免疫吸附实验(ELISA)即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。基本原理：它采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接，然后通过酶与底物产生颜色反应，用于订量测定。测定的对象可以是抗体也可以是抗原。测量时，抗原（抗体）先结合在固相载体上，但仍保留其免疫活性，然后加一种抗体（抗原）与酶结合成的偶联物（标记物），此偶联物仍保留其原免疫活性与酶活性，当偶联物与固相载体上的抗原（抗体）反应结合后，再加上酶的相应底物，即起催化水解或氧化还原反应而呈颜色。其所生成的颜色深浅与欲测的抗原（抗体）含量成正比。这种有色产物可用肉眼、光学显微镜、电子显微镜观察，也可以用分光光度计（酶标仪）加以测定。其方法简单，方便迅速，特异性强。LabEx流式染色服务：现可进行流式celesta 12色染色，细胞培养加染色一条龙。pi3k信号通路

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基于MSD平台的电化学发光超敏多因子检测技术MSD（MesoScaleDiscovery)原理：MSD电化学发光技术主要基于超敏多因子电化学发光分析仪MESOSector600或QuickplexSQ120。通过点阵技术，在96孔石墨电极板里可实现10个指标每孔的检测。也可在24孔板里定制实现100指标/孔的筛选检测。特点:1、更高灵敏度与更宽的线性范围：灵敏度可达0.05pg/ml，有效线性范围达6log。2、节省样本用量，可实现多重检测：上样量≤25ul，为珍稀样本的研究提供了更多的数据。3、均一性、重复性高：板内CV<6-8%,板间<10%,批间<15%。同时MSD试剂盒有效期长达30个月，为长时间研究项目，提供了使用同一批号试剂的可能性。4、样本兼容度高，基质效应小5、实验流程简便、快速、多元化6、信号稳定且不受显色顺序影响7、开放性平台，高载量的石墨电极，多样化实验方案，更节省的包被用量。抗体芯片 作用

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