北京BD Rhapsody单细胞服务机构

时间:2022年07月07日 来源:

关于单细胞测序实验样本制备,这与流式细胞术用户熟悉的步骤完全一致,也就是通过酶促或机械消化、细胞分选或其他细胞分离技术从整个样本中制备生成活的单细胞悬液。随后是细胞计数和质量控制步骤,以确保您的样本有适当浓度的活细胞,并且不含细胞团块和死细胞碎片。如有必要,您还可以使用抗体对样本进行染色,标记细胞表面蛋白或其他生物分析物,或者通过FACS来富集感兴趣的细胞类型。解离样本时采取的具体步骤将根据您的起始材料和实验目标而定。也许需要额外的制备步骤,具体取决于组织质量、样本丰度、细胞大小,以及是否需要提取出细胞核进行染色质可接近性分析。无论具体的考虑因素如何,所有样本类型都遵循同一个基本原则,那就是生成高质量的单细胞悬液。个性化制定测序项目方面,满足从检测基因到蛋白的多组学测序要求。北京BD Rhapsody单细胞服务机构

您的珍贵样本,可以放心依赖烈冰生物BD Rhapsody单细胞捕获系统,首先,该系统的技术原理是基于cyto-seq的微孔技术,因此不会因为样本细胞体积太大或悬液背景太杂等问题导致捕获通道的堵塞进而导致样本的损失;其次,BD RhapsodyTM单细胞捕获系统无电子元件,便于携带,当您的样本需及时实验时,我们可以“拎包上门”,快速的完成细胞捕获部分,不至于珍贵样本因细胞活性快速下降带来的损失;在这,BD Rhapsody单细胞捕获系统对细胞数量包容性较好,细胞悬液上样量高达575ul,针对样本中细胞数量较少的组织类型,也能完成整个项目的细胞捕获工作。温州BD Rhapsody单细胞平台烈冰单细胞多组学测序助您探究细胞类型特异性和基因调控网络特征。

针对单细胞测序的细胞上样数,为什么不建议捕获到的细胞数量越高越好?一味地追求高数量的细胞捕获可能会存在一些问题。例如在上机细胞悬液浓度固定时,如果目标细胞捕获数增加到8000甚至10000,上样细胞悬液体积势必增加,在细胞悬液质量不是很理想(细胞活性<90%、碎片率>5%、结团率均>5%)的情况下,引入的背景信号会增加,分析结果不理想的直接体现包括:cell、non-cell无法有效区分和Fraction reads in cells偏低。当cell和non-cell无法有效区分时,会使得数据出现假阳性和假阴性结果!当目标细胞捕获数很大时,多细胞率会增加,数据分析时,此部分“cell”表现为基因检测数和UMI检测数是正常cell的N倍(N是一个GEM包裹的细胞数),导致所有细胞的统计数据(单个细胞基因检测中位数、单个细胞UMI检测中位数)虚高。此部分“cell”虽然可以通过设置数据分析阈值进行过滤,但是容易会有此类数据的残留和正常高基因检测细胞的人为去除!

根据烈冰多年单细胞测序服务经验,为什么不建议您一味的追求高细胞数量的捕获:单细胞测序所有的分析都是基于细胞聚类进行,而细胞聚类是在区分cell和non-cell后,获得细胞基因表达谱,通过降维(pca),无监督聚类以及可视化(t-SNE)得到的。进行细胞聚类时需要考虑到每个细胞的基因表达模式,因此即使是相同的数据,在剔除几个细胞的情况下,前后获得的聚类图也会出现明显不同。而当细胞捕获数过多时,无论是假阴性和假阳性数据还是多细胞数据,都会对正常细胞聚类产生影响,造成聚类结果失真。这也是很多文章,特别是很多高分文章,为什么单个样本捕获细胞数在2000-3000的原因了。烈冰建议单个样本捕获细胞数在3000-5000个时,数据量在100G左右时,可以满足分析和文章发表的多重需求。对于消化背景杂,样本初始数量少,关注粒细胞的项目,推荐您使用烈冰BD 单细胞测序平台。

什么时候要用到去死细胞的操作呢?跟进烈冰生物多年单细胞测序服务经验来看,当细胞悬液进行质量和活性检测后,考虑对细胞活性在50%-70%的悬液进行去除死细胞的操作。而太低活性的悬液(小于30%),悬液中细胞大量死亡,可能已经丢失了原组织内的细胞比例和状态,失真严重,建议重新收集样本进行新的实验,保证数据的高质量和实验结果的准确性。但需要注意到,去除死细胞的操作会损失一定的细胞数量,因此希望您在提供样本时,尽可能提供足量的细胞,以备实验过程中可能存在的细胞死亡的问题,BD Rhapsody单细胞捕获平台对样本起始细胞量的要求较低,一般提供10万个细胞以上均可满足需求,特殊样本可详细咨询烈冰生物。此外,烈冰开展了单细胞转录组、单细胞多组学以及空间转录组等多种产品在内的全套科研解决方案,欢迎垂询。陕西BD单细胞测序

BD单细胞测序平台同时兼容单细胞蛋白组测序(Ab-seq)和免疫组库测序等工作。北京BD Rhapsody单细胞服务机构

如行家预判,服务型发展即将步入黄金时代,众多企业围绕医药产业、商业领域及新兴的互联网医药等领域正在进行厮杀。在我国政策的支持下,在社会资本的推动下以及技术升级的带动下,互联网巨头、科技巨头、地产巨头等企业纷纷跨界进入服务型。从世界范围来看,美、欧、日等发达地区的销售产业发展历史悠久,无论是销售产品制造业还是销售服务业,都处于全球优先地位。而泰国、印度等东南亚及南亚地区,销售产业虽然起步晚,但是发展较快,已成为经济社会发展重要组成部分。服务型项目新市场加入通常耗资巨大,单一的资本进入往往会形成极大的资本压力,因此一些重大的服务型项目往往都会通过数家有实力的资本进行组合资本。在项目的加入上可以进行分摊,每一家集团的资本压力都会得到较大的减轻,这种具有组合资本优势的服务型项目也是很多资本重点关注的资本项目。北京BD Rhapsody单细胞服务机构

上海烈冰生物医药科技有限公司致力于医药健康,以科技创新实现***管理的追求。公司自创立以来,投身于单细胞测序,生物大数据云分析平台,空间转录组测序,单细胞多组学测序,是医药健康的主力军。烈冰生物始终以本分踏实的精神和必胜的信念,影响并带动团队取得成功。烈冰生物始终关注自身,在风云变化的时代,对自身的建设毫不懈怠,高度的专注与执着使烈冰生物在行业的从容而自信。

信息来源于互联网 本站不为信息真实性负责