流式细胞仪分析

酶联免疫斑点技术（Elispot）技术优势(1)单细胞水平，活细胞功能检测：弥补了体液中CK半衰期短的不足，当体液中某CK含量较低时,用ELISPOT法检测具有较高灵敏性。(2)操作简便经济，可以进行高通量筛选：既可检测自发分泌细胞，又可检测抗原特异性CK分泌细胞，具有较高特异性，并可观察药物治疗反应，且使对CSF中T、B细胞研究成为可能，对神经免疫疾病发病机制研究及临床疗效观察均有重要价值。(3)灵敏度高：在一百万个阴性细胞中只要有一个分泌细胞因子的阳性细胞即可被检测出来。灵敏度比传统ELISA方法高2-3个数量级。LabEx 流式平台：BD C6，BD celesta，BD calibur，12色流式检测分析。流式细胞仪分析

Q：ELISA实验预实验的目的？A:确认一下样本的稀释比例，虽然试剂盒给出了一些建议，但是不同客户的样本处理方式不同，可能会出现高出标准曲线的情况，那就要预实验测试看下B、降低客户的预期，如果预实验反馈出，客户的结果在检测下限附近，可以让客户更换样本，节省试剂盒Q：ELISA实验预实验是如何安排的？A：会做整条标准曲线，比较好由客户自己挑选的有代表性的预实验样本，至少2个（高值与低值各一，各4个稀释梯度），**少耗费16个孔；若客户吝惜试剂，可只做标准曲线的两个点（比较高点和背景点，确认预实验样本的浓度是否在背景点以上或者是附近），预实验样本做几个稀释度测试（至少2个样本各3个稀释度），**少耗费8个孔；为避免样本反复冻融或正式实验样本不够，预实验样本需要另外准备；elisa服务检测服务LabEx多因子检测：luminex平台**pannel，筛选验证同步进行，省时省力。

抗体芯片技术服务包括：1.样品蛋白质抽提:a.实验对象为组织样品，取适量（250~500mg）新鲜组织样品或正确保存的组织样品，加1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂，匀浆后抽提总蛋白。b.实验对象为细胞样品，每份样品取1×106～1×107细胞，PBS清洗细胞，去PBS加0.1ml-1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂抽提总蛋白。c.实验对象为血清，则直接进入步骤3。2.蛋白质定量：按蛋白质定量试剂盒操作说明操作，测定样品浓度。3.细胞因子抗体芯片封闭和抗体孵育a.细胞因子抗体芯片封闭后加入50－500ug蛋白质（若标本为血清，通常取100ul血清）与抗体芯片4℃孵育过夜。b.加入标记好的抗体室温孵育1小时。4.抗体芯片检测5.提供实验报告:包括详细的实验方法和芯片实验结果的各种图表和数据比较。您只需提供保存完好的标本（血清、组织或细胞、细胞上清或其他非常规液质生物样本），本公司专业的技术服务人员就可替您完成实验操作与数据分析。

Q：样本保存要求和保存时间?A：保存要求：<-20℃保存，-80℃保存更佳，避免反复冻融，冻融超过两次的样本不可使用。保存时间：越短越好，不超过3个月为佳Q：什么样的样本会比较容易测出？A：根据我们统计的数据来看，并没有这样的说法，需要做实验才可以确认，并且每个客户的样本模型都是不一样的，并没有参考性Q：裂解液有什么要求？A：不含SDS和NP40等离子去垢剂成分的裂解液，比较建议爱必信产品（abs47047636）Q：样本量需求？A：可登陆试剂盒官方网站查询，一般在试剂盒详情页面中都有，或直接查看说明书。通常用量在50-200ul。实验室打包服务为100ul/孔LabEx提供 细胞因子与信号通路蛋白多指标检测。

基于流式平台CBA：CBA（CytometricBeadArray），即微量样本多指标流式蛋白定量技术是一个基于流式细胞检测系统的多重蛋白定量检测方法，它能够同时对单个样品中的多个指标进行检测。CBA的原理通过利用一系列带有荧光标记的微小、分散的微球连接特定的捕获抗体以捕捉溶液系统中的待测物，通过对应各种不同检测物的特异微球上所带有荧光强度不同从而同时测定分析样本中多种可溶性成分的数量。CBA的特点：1.能够同时对单个样本进行多种检测。2.较传统检测节省样本量9倍。3.灵敏度高、重复性好。4.所有分析只需一组标准曲线。5.避免酶联反应所致人工假象。6.节省操作和检测时间。电化学发光，一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应，是电化学和化学发光两个过程的完美结合。luminex 技术原理

多因子实验的正式实验，可以分批次检测。流式细胞仪分析

免疫组化，是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。LabEx提供IHC/ICC（免疫组化/免疫荧光）实验服务，提供样本细胞涂片、细胞爬片、组织冰冻切片、组织石蜡切片；或组织、蜡块均可。一抗（可帮忙提供，费用另计）。流式细胞仪分析

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