湖州单细胞测序数据分析可视化

时间:2022年08月04日 来源:

针对单细胞测序的细胞数量判断环节:主要是对细胞数量、基因表达量、测序质量进行整体描述。过滤标准:由于细胞破碎后游离RNA会释放到环境或孔中,并且测序中也会存在一些死细胞,导致数据存在background值。因此,我们需要设定一定的标准来过滤掉假细胞或死细胞。以10×Genomics为例,细胞数量判断主要通过分析UMICounts-Barcode曲线斜率拐点,当存在多个斜率拐点的时候,结合预期UMI=500时的细胞数量进行过滤。当斜率拐点低于UMI=500的时候,选择UMI=500作为细胞的判断的标准;否则,选择和预期细胞数量接近的拐点作为细胞判断的位置。这样我们能够有效获得真实的并且在基因数量上可以分析的数据。搭建多种测序数据的生物信息分析平台,5000+项目检验,真实可信赖。湖州单细胞测序数据分析可视化

为什么需要单细胞分辨率?生物学就像宇宙一样。它非常复杂,有许多独特的单体,也就是细胞。这些细胞相互作用并扮演不同的角色,在更大的体系中构建并驱动多个过程。就像伽利略探索宇宙的努力一样,发现和定义这些细胞也需要高分辨率的工具,才能解开促成生物学复杂性的基因表达异质性。单细胞测序能够在以一个细胞为功能单位中开展生物学研究,阐明具体细节,构建出一幅更大、更精细的图谱,说明导致产生某种外在表型的不同类型的分子和细胞之间是如何相互作用的:患者为什么会复发?是什么让这种疫苗能够有效防止传染等等诸多问题。广州高通量测序单细胞测序服务烈冰科技已建立了多种国际和国内主流的高通量测序实验平台。

10X Genomics单细胞转录组测序是利用单细胞水平上的高通量测序分析基因表达谱的技术,也是目前国内和国际上公认的单细胞测序大规模实验平台技术,该平台基于动态微流控原理,突破传统高通量测序的局限性,组织解离后,单个样本一次上机能捕获500-20000个细胞, 基于每个细胞分别建库测序,获得单个细胞的基因结构和基因表达状态,并鉴定细胞的类型,可以在不同样本间从细胞类型的组成和丰度角度进行比较,反映细胞间的异质性,提供足够灵活的定制测定法以满足多种实验需要,并有效缩短实验是时间和降低测序成本。

细胞中基因的表达是严格按照时间和空间顺序发生,因此细胞类型和基因表达具有时间特异性和空间特异性。时间特异性可以通过收集不同时间点的样本进行单细胞转录组测序来分析。但是单细胞转录组测序(scRNA-Seq)在单细胞悬液制备的过程中破坏了细胞的空间结构,无法给出固态异质化组织中细胞空间排布信息。而空间转录组可以解决这个问题,其以点阵形式记录组织切片细胞的空间信息,在保留组织形态结构的基础上,获得细胞/基因的空间表达特异性。全线搭建10x Genomics单细胞测序平台。

单细胞测序结果动辄上百G数据量,庞大的数据对于分析平台和分析能力有着很高的要求,首先针对下机数据的质控环节:单细胞测序产生数亿的结果序列,不可避免的会出现低质量的测序结果,存在各种情况的序列污染。因此序列过滤及质量评估就会变得极为重要。序列质量主要通过测序质量值Q20/Q30的占比来表征,即碱基测序结果的错误率在1%/0.1%以下的比例。理想的测序结果reads的碱基质量均高于30。保证数据获得后的处理结果的准确性,为后续细胞类型鉴定和功能分析打下坚实基础。助力探索生命时空多维度的动态变化的生物学信息;助力医疗健康时代!湖州单细胞测序数据分析可视化

烈冰测序数据分析平台,不依赖已有物种信息,可研究非模式物种,针对不同平台的数据,制定多套流程;湖州单细胞测序数据分析可视化

关于10XGenomics单细胞平台的样本类型和样本制备:10X平台在上机前需要注意细胞消化后的细胞团块,获得分离良好的细胞悬液、无细胞随便、极少的细胞团块,且细胞活力高(>70%);此外,了解您所研究细胞的大小范围也很重要。细胞大小通常与细胞表达的转录本数量有关。各种尺寸不同的细胞(一般直径不大于50μm)均可与我们基因表达解决方案中使用的10XGenomics平台兼容。一般来说,细胞制备方案将根据组织来源和细胞类型而变化。每种组织类型都是独特的,因此,必须在开始任何单细胞实验之前优化样本制备,烈冰多年样本解离消化经验,累积10+物种、50+组织的消化protocol,若您的样本为组织,且尚未成功将组织样本消化成单细胞悬液,烈冰将尽可能提供技术及实验上的帮助。湖州单细胞测序数据分析可视化

上海烈冰生物医药科技有限公司致力于医药健康,以科技创新实现高质量管理的追求。公司自创立以来,投身于单细胞测序,生物大数据云分析平台,空间转录组测序,单细胞多组学测序,是医药健康的主力军。烈冰生物继续坚定不移地走高质量发展道路,既要实现基本面稳定增长,又要聚焦关键领域,实现转型再突破。烈冰生物始终关注医药健康市场,以敏锐的市场洞察力,实现与客户的成长共赢。

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