多因子流式检测

液态流式技术(Luminex)特点:多重检测：理论上可同时检测100种生物靶标。节省样品：只需低至25μl的样品体积。高灵敏度：精确定量下限低至0.1pg/mL。应用范围应用领域：免疫、炎症、心血管疾病、肿块物研究、肾、代谢、神经、细胞间作用。分析物类型：细胞因子、炎症因子、趋化因子、粘附因子、脂肪因子、血管生成蛋白、肿块物标记物、基质金属蛋白酶、基质金属蛋白酶抑制剂。其他应用：信号通路、重大疾病相关、Biomarker开发、临床应用。液态流式技术(Luminex)，流式荧光,又称悬浮阵列、液相芯片等。多因子流式检测

液相悬浮芯片技术产品多因子技术可同时检测多个样本的多个指标，如通路中多个相关蛋白的共检测。虽然液相蛋白定量检测的技术很多，但是大多数的技术能对样本进行单一指标的检测，同时检测多个指标时则需要提供大量的样本分批检测，操作繁琐，且各指标间差异性较大。对于样本量较少或需要对比各指标的用户，传统的技术无法满足需要。日常实验中，常需对溶液体系中的可溶性蛋白进行定量检测，如细胞培养上清或血清中的细胞因子含量的定量分析，由于这些因子的含量较少，低于一般常规方法的检测下限，使用常规的蛋白检测方法如WesternBlot等很难检测。而多因子技术样本需求量少（25~60μL/孔），检测指标多，可兼容血清/血浆，细胞上清，细胞/组织裂解液，脑脊液等多种生物学体液。其灵敏度高（部分panel可达到亚fg/ml），宽线性范围（达到6个log），具有高重复性（板内CV<6-8%，板间<10%，批间<15%），适宜多类型指标的同时测定（炎症，趋化，代谢……）。pcr array 服务MSD平台由于其独特的电化学发光原理，可将许多非特异信号予以排除，对于各类生物学样本的兼容度高。

细胞因子在肿块物医治中的作用Il-2：增强NK细胞和CD8T细胞功能；增加血管通透性IL-3：增强肿块物抗原呈递IL-4：增强嗜酸性粒细胞功能和T细胞活化IL-6：增强T细胞和B细胞功能；抑制IL-6可减少淋巴增生IL-7：增强T细胞功能IL-10：抑制肿块物抗原呈递IL-12：增强Th1免疫和细胞毒性；抑制血管生成IL-13：抑制对病毒性肿块物的细胞毒性IL-15：增强细胞毒性IL-18：增强Th1免疫和细胞毒性；抑制血管生成M-CSF：增强巨噬细胞功能GM-CSF：增强肿块物抗原呈递IFN-α：增强肿块物抗原呈递和细胞毒性IFN-γ：增强肿块物抗原呈递和细胞毒性TNF-α：诱导肿块物细胞凋亡TRAIL：诱导肿块物细胞凋亡FLT3ligand：刺激树突状细胞和NK细胞功能Lymphotactin：增强T细胞募集TGF-β：抑制T细胞效应器功能

Luminex液相悬浮芯片是基于高通量微孔板的多重检测抗体芯片技术。其基本原理是将高度特异的捕获单克隆抗体偶联到不同荧光标记的磁珠上，将不同种类磁珠混合后悬浮于96孔微孔板中。在检测时，一束激光照射磁珠上的荧光，识别磁珠标记的捕获抗体，从而获知该磁珠可检测哪种细胞因子，从而实现“定性”作用。进一步，通过加入生物素标记的高亲和配对检测抗体，同步识别磁珠抓取的目标细胞因子，形成“三明治”结构，并加入SA-PE偶联上生物素，通过另一束激光照射进行信号放大检测，实现“定量”作用。多因子实验的正式实验，可以分批次检测。

神经疾病研究作为近几年的热点研究，其研究集中点主要在于神经退行性疾病（阿尔兹海默症AD、帕金森综合症PD……）、早期认知障碍（MCI）、抑郁、毒瘾等方向。神经退行性疾病，传统通过影像学技术拍片观测脑部淀粉样堆积情况评估疾病进程，但模型动物或病人脑部出现淀粉样堆积往往在疾病发生中晚期。通过检测Biomarker,可以更早的预测疾病发生，更好的评估药物疗效和毒副作用。从研究指标上看，从神经退行性指标（Aβ、Tau、NFL等）到神经炎症，再到相关生物标志物的检测，都是相应研究者热捧的对象；从检测样本看，CSF脑脊液、血清血浆、细胞上清等，都有囊括。研究手段多因子检测作为高效的检测手段，被广泛应用在神经疾病研究中，LabEx可以提供包括MSD、Luminex、CBA以及抗体芯片在内的多因子检测服务。LabEx提供 细胞因子与信号通路蛋白多指标检测。流式分析软件flowjo运用

为啥高分的文章用的都在做细胞因子的检测？多因子流式检测

Q：样本处理方案?A：血清：不含抗凝剂的**管**，室温静置2小时（避免震动，防止溶血），离心20min（4℃，2000g），取上清，建议再一次离心和取上清，建议分装后-80℃冻存，避免反复冻存血浆：含抗凝剂（EDTA、肝素，具体采取哪种抗凝剂，参考说明书）的**管**，，离心20min（4℃，2000g），取上清，建议再一次离心和取上清，建议分装后-80℃冻存，避免反复冻存细胞裂解液：收集细胞，PBS清洗后，离心10min（1000g，4℃），弃去上清，加入适量裂解液（107细胞对应200-300ul裂解液），放置于4℃冰箱（20min），离心10min（3000g，4℃），取上清，建议再一次离心和取上清，测定BCA总蛋白浓度，-80℃保存组织裂解液：适量RIPA裂解液加入组织中（10mg对应100-200ul裂解液），组织破碎器处理组织至匀浆（冰上处理），放置于4℃冰箱（20min），离心10min（3000g，4℃），取上清，建议再一次离心和取上清，测定BCA总蛋白浓度，-80℃保存细胞上清：离心，取上清，建议分装后-80℃冻存，避免反复冻存多因子流式检测

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