宁波哺乳动物悬浮和贴壁细胞的培养基

胎牛血清的保存方法：1、需要长期保存的胎牛血清须储存于-20℃-70℃低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月。切勿将血清在37℃放置太久，否则血清会变得浑浊，同时血清中的有效成分会被破坏，而影响血清质量。如果一次无法用完一瓶，可将40～45ml分装于无菌50ml离心管中。由于血清结冰时体积会增加约10%，因此，血清在冻入低温冰箱前，必须预留一定体积空间，否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。2、一般厂商提供的血清为无菌，无需再过滤除菌。如发现血清有悬浮物，则可将血清加入培养液内一起过滤，切勿直接过滤血清。3、胎牛血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃至-70℃低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温，待全部溶解后再分装，一般以50ml无菌离心管可分装40～45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻，这样因温度改变太大，容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。有些胎牛血清没有预老化，储存在2－8℃时，血清中的各种蛋白和脂蛋白可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。宁波哺乳动物悬浮和贴壁细胞的培养基

血清和血浆均来自全血，通过离心去除包括红细胞在内的成分。血浆和血清之间的区别在于，凝血蛋白存在于血浆中，但已从血清中去除。血浆一般是通过在离心前向血液中加入抗凝剂来制备的，但不会去除凝血蛋白。通过在离心前使血液凝固或通过普遍/渐进离心来制备血清。因此，与凝血相关的纤维蛋白原和蛋白质不存在于血清中。在人类中，以下22种蛋白质占血清和血浆总蛋白质含量的99%：白蛋白、总IgG、转铁蛋白、纤维蛋白原、总IgA、α-2-巨球蛋白、总IgM、α-1-抗胰蛋白酶、C3补体、结合球蛋白、α-1-酸性糖蛋白、载脂蛋白-B、载脂蛋白-A1、脂蛋白(a)、因子H、铜蓝蛋白、C4补体、补体因子B、前白蛋白、C9补体、C1q补体和C8补体。剩下的1%包括数百种蛋白质。更丰富的血清蛋白白蛋白，浓度为50mg/ml，约占总蛋白质量的一半。温岭Bouin's固定液进口的胎牛血清：过滤分装前很少会反复冻融，生产后的成品也是清澈的。

使用胎牛血清的注意事项：注意解冻的方法，再高质量的胎牛血清也要在使用的时候坚持谨慎的原则，因此在解冻血清的时候，要细心地考虑到其解冻时体积一般会增大的特点，事先为血清预留出能够容纳膨胀体积的空间。如此一来，便不会发生污染或者容器冻裂的情况。另外更好采用分步解冻的方式解冻血清，即先利用冰箱或冷库将其溶解满几天，之后在室温下全溶后再进行分装。胎牛血清的灭活，一般是用水浴加热的方式来加热已经完全解冻的血清，那么需要注意的是，加热的过程中一定要规则地将血清摇晃均匀。而之所以这么做，是为了能够让血清中的补体成分去活化。不过胎牛血清的灭活并不是强制的要求，客户可以自行选择是否进行灭火处理。

不少小伙伴对于血清的挑选、使用和储存等方面，都有不少疑惑，我们汇总了一些常见问题，并且针对这些问题，给出了相应的建议供大家参考。先来看看关于血清挑选的部分：如何挑选胎牛血清？1、胎牛血清的标准采集血液时间是5-8月龄的未出生胎牛。2、选购时询问是否有检测报告，并注意检测报告中的各类指标。3、注意血清有效期，尽量不买过期血清。4、留心观察相关人员是否专业：血清是否全程冷链运输；是否严格储存在-20℃冰箱中；工作人员对待血清态度如何；能否提供同一批次血清。胎牛血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。

什么是优良的胎牛血清？外观，好的血清应是透明清亮，土黄色或棕黄色，无沉淀或极少沉淀，比较粘稠。如发现血清浑浊，不透明，含许多沉淀物，说明血清污染或血清中的蛋白质变性；若棕红色，说明血清中的血红蛋白含量太高，有溶血现象。总蛋白含量，胎牛血清一般范围是30-40mg/ml，数值偏高，说明采集血液的牛龄偏大，不是胎牛；数值偏低，表明血清可能掺水了。血红蛋白，标准为不高于20mg/dl，颜色越红，数值越高；反之，数值越低。pH，国产血清，大多高于7.5，进口胎牛血清，大多低于7.5，具体原因未知，可能和牛龄有关，这也能用来初步鉴别血清的来源。胎牛血里的生长因子适合牛体内各种细胞生长，通常在8个月胎龄后慢慢消失。温岭Bouin's固定液

胎牛血清分装冻存时，须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均。宁波哺乳动物悬浮和贴壁细胞的培养基

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