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神经疾病研究作为近几年的热点研究,其研究集中点主要在于神经退行性疾病(阿尔兹海默症AD、帕金森综合症PD……)、早期认知障碍(MCI)、抑郁、毒瘾等方向。神经退行性疾病,传统通过影像学技术拍片观测脑部淀粉样堆积情况评估疾病进程,但模型动物或病人脑部出现淀粉样堆积往往在疾病发生中晚期。通过检测Biomarker,可以更早的预测疾病发生,更好的评估药物疗效和毒副作用。从研究指标上看,从神经退行性指标(Aβ、Tau、NFL等)到神经炎症,再到相关生物标志物的检测,都是相应研究者热捧的对象;从检测样本看,CSF脑脊液、血清血浆、细胞上清等,都有囊括。研究手段多因子检测作为高效的检测手段,被广泛应用在神经疾病研究中,LabEx可以提供包括MSD、Luminex、CBA以及抗体芯片在内的多因子检测服务。细胞因子检测是一个强大的工具,通过定制识别产生积极反应的细胞因子的独特组合。jak-stat信号通路检测服务
Q:ELISA实验预实验的目的?A:确认一下样本的稀释比例,虽然试剂盒给出了一些建议,但是不同客户的样本处理方式不同,可能会出现高出标准曲线的情况,那就要预实验测试看下B、降低客户的预期,如果预实验反馈出,客户的结果在检测下限附近,可以让客户更换样本,节省试剂盒Q:ELISA实验预实验是如何安排的?A:会做整条标准曲线,比较好由客户自己挑选的有代表性的预实验样本,至少2个(高值与低值各一,各4个稀释梯度),**少耗费16个孔;若客户吝惜试剂,可只做标准曲线的两个点(比较高点和背景点,确认预实验样本的浓度是否在背景点以上或者是附近),预实验样本做几个稀释度测试(至少2个样本各3个稀释度),**少耗费8个孔;为避免样本反复冻融或正式实验样本不够,预实验样本需要另外准备;jak-stat信号通路检测服务LabEx现有MSD、Luminex、CBA,抗体芯片、多色流式及ELISA等实验室技术平台。
LUMINEX常见问题及解答(二)6)客户自己提供抗体,是否可以进行LUMINEX检测?Luminex和ELISA检测试剂都需要两个配套的特异性抗体。我们公司具有开发Luminex试剂盒的经验。但是,需要一系列的开发工作才能保证结果的特异性、重复性和可靠性。7)除了蛋白,LUMINEX技术是否还可以用于其它指标的检测?可以用于基因表达,基因多态性和HLA配型分析。8)如何判定LUMINEX数据表达水平差异有无意义?表达差异主要取决于标本的性质和数量,我们公司为客户提供专业的数据统计服务。9)LUMINEX实验和流式细胞仪的优劣比较?Luminex技术是流式细胞仪和微球相结合的蛋白、核酸检测技术,检测对象是蛋白质、DNA等大分子。普通流式细胞仪主要用于检测整体细胞表面或细胞内的蛋白表达情况。Luminex检测蛋白和标本数目大,是一种高通量检测技术。普通流式细胞仪每次只能检测几种蛋白分子,而且检测速度较慢,不适合高通量分析。由此可见,两种方法应用方向有很大差别。
多重荧光免疫组化,主要的技术原理来自TSA技术,TSA即酪酰胺信号放大技术(Tyramidesignalamplification),是一类利用辣根过氧化酶(HRP)对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。该技术可与高性能染料AlexaFluor、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。简单来说,用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的HRP(而不是直接偶联荧光素),来催化后续添加入体系的非活性荧光素。荧光素在HRP和过氧化氢的作用下被活化,跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联,使得蛋白样品与荧光素稳定结合。然后微波处理,前一轮非共价结合的抗体被洗掉,共价结合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第二轮孵育,周而复始。等到所有抗体孵育结束,荧光素都结合好后,然后去检测结果。LabEx年多因子检测样本量达20w+!
问:因子检测技术有哪些?答:Array抗体芯片、CBA、luminex、MSD。问:多因子实验适用的样本类型有哪些?答:Serum(血清)、Plasma(血浆)、Cell/Tissuelysate(细胞/组织裂解液)、CerebrospinalFluid(脑脊液)、支气管肺泡灌洗液、鼻腔灌洗液、腹腔液等等。问:如何计算96孔板可做多少样本?答:标曲16孔,预实验8孔,剩余72孔,单孔可做72样本,复孔可做36样本;问:多因子实验的正式实验,是否可以分批次检测?答:可以,但是有如下要注意:(1)CBA:试剂盒须在一个月内用完,否则标准曲线要重做,重做就要用到试剂,那样本就样减少。(2)Luminex:每次都必须要做标准曲线,会浪费试剂和孔板,同时试剂也要在一个月内用完,防止试剂过期。(3)MSD:每次都必须要做标准曲线,会浪费试剂和孔板,同时试剂在一个月内用完,防止试剂过期,每次送样+标准曲线的数量,建议是4的倍数,否则会造成浪费。LabEx多因子检测技术(包括luminex、MSD等),所需样本量少,检测指标丰富。酶联免疫斑点服务检测服务
PCR Array:用于检测生物学功能相关的一系列基因的表达量变化,发现变化比较明显的标志性基因。jak-stat信号通路检测服务
抗体蛋白质芯片技术(Sengenics)优势1、包被蛋白具有正确折叠的空间结构/芯片表面水凝胶保护2、特异性蛋白质阵列上正确折叠的蛋白质可确保构象表位,可用于自身抗体结合(90%的抗体表位是非线性的)。与显示低信噪比的其他阵列相比,这会带来特定的命中和低背景噪音。3、检测限<10pg/ml蛋白质阵列可用于以极高的灵敏度检测自身抗体,只需要1-10μL血清。检测限在10pg/ml范围内,线性动态范围至少为5个数量级。4、高重复性Sengenics蛋白质阵列使用多个阳性和阴性对照来测量研究和批次内和之间的重复性。下图显示在比较两个不同批次中的6524个蛋白质数据点的自身抗体水平时,0.97以上的近乎完美的Pearson相关性。5、一致性高SengenicsKREXTM蛋白质折叠技术用于创建具有一致性的蛋白质阵列。下图显示了Immunome蛋白质阵列的蛋白质内复制变异系数(CV%)百分比。Immunome的平均CV%为7.2%。jak-stat信号通路检测服务
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