动物细胞转染试剂类型

用LipoFectMax™转染Hela细胞，左图转染GFPcDNA，右图共转染GFPCDNA和GFP靶向siRNA。转染siRNA后可以从右图明显看到基因沉默。4适用于神经细胞的转染图4.用LipoFectMax™和LipoFectamine®2000分别对小鼠神经元细胞进行转染绿色荧光白蛋白（GFP），转染24小时后观察转染效果，LipoFectMax™转染效率（左图）比LipoFectamine®2000（右图）高5倍。LipoFectMax™转染试剂转染试剂操作流程细胞毒性低图2.LipoFectMax™，LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分别对A549细胞进行转染操作，通过计算转染后的细胞存活率比较细胞毒性.用于基因编辑的RNP转染试剂.动物细胞转染试剂类型

用LipoD293™体外DNA转染试剂（Ver.II）（上图）和受欢迎的品牌产品Invitrogen公司的293fectin™（下图）转染pEGFP-C1质粒到HEK293细胞中。转染24小时后，细胞的尼康Eclipse荧光显微镜DIC成像图（左侧）和荧光成像图（右侧）。对悬浮HEK293F产生蛋白质效率的比较30毫升的293F细胞分别使用LipoD293™试剂、293fectin、Xfect和Fugene6等转染试剂按照生产商的标准转染步骤将pEGFP-6xHis质粒导入细胞表达，用量为LipoD293™试剂，20微克，所有其他三种转染试剂均使用30微克质粒DNA。电转染试剂供应商转染是将核酸导入真核细胞中的过程，是细胞生物学、基因表达和基因***实验中的关键步骤。

转染 48 小时后，使用尼康荧光显微镜 GFP 荧光进行成像（左侧四幅图），A：LipoD293； B：293fectin；C：Xfect 和 D：Fugene 6.  带有 6xHis 标记的 GFP 荧光蛋白使用 Ni-NTA 亲和柱技术实现分离。5 微升洗脱液载入 SDS-PAGE 凝胶电泳分离并进行 Coomassie 亮蓝染色（右上图 E），道 1 为 LipoD293293、道 2 为标准蛋白分子、道 3 为 Xfect、道 4 为 293fectin 和道 5 为 Fugene 6。这四种转染试剂产生蛋白质的效率被进一步定量（见右下图 F）。产生慢***的比较

通过 LipoD293™ 试剂（升级版）和 Lipofectamine LTX（LTX）试剂将三个 cDNAs 共转染进 293T 细胞。一个 GFP 载体，pHR-SIN-cppt-CMVEWP 被用来测定慢***的滴度。在 24 孔板中每孔加入 1x10^5 293T 细胞，其次是分别添加不同量的慢定都上清液，1 微升（上图）和 10 微升（下图）。

图7.对注射了Invivofectamine3.0试剂的小鼠样品进行血液化学分析。将Invivofectamine3.0试剂与靶向FVII的AmbioninvivosiRNA的复合物分别以1mg/kg[1],3mg/kg[3],或未处理[U]的剂量注射入小鼠体内。在注射后2、24及48小时收集血液样品，并通过临床化学检测方法对数个生物标志物(Antech)进行评估。结果表明在使用Invivofectamine3.0试剂进行转染的每个个体间所检测的生物标志物的水平与未注射该试剂的个体相比并没有***差异。除了以上两种于siRNA的转染试剂，还有通用型转染试剂Lipofectamine™2000，Lipofectamine™3000和Neon™转染系统也可以用于siRNA转染研发合成的针对siRNA、microRNA、mimic、inhibitor、mRNA和shRNA等RNA的转染试剂。

胞因素用低代数的细胞293T细胞非常重要！！当然也要保证细胞状态特别好，没有细微污染，铺板均匀。饱满状态好的细胞才可以产生较高滴度的***哦！载体系统在实验中**常见的慢***载体系统有三质粒系统、四质粒系统，当然使用三质粒系统的小伙伴居多，一定要选择成熟商业化的载体系统！载体构建和质粒抽提纯化我们要注意是否构建时导致质粒载体重组或某个部件缺失，或污染别的质粒、杂物?中抽纯化是否污染?要养成同时做阴性对照的习惯：建议目的基因载体和阴性对照GFP载体是同一批，且建议每次包装都如此操作，要保证目的基因的表达载体构建纯化良好，质粒间比例得当，并且对质粒进行酶切验证。3.0试剂进行转染的每个个体间所检测的生物标志物的水平与未注射该试剂的个体相比并没有***差异。体内转染试剂多少钱

转染后6h观察细胞状态，并更换培养基，继续培养24 h后收取细胞，用PBS洗涤3次以上，以备RNA抽提。动物细胞转染试剂类型

确定希望输送的运载物

（如DNA、RNA或蛋白质）

根据不同实验类型，我们可能需要将不同的运载物输送到细胞内部，包括**常见的DNA，用于基因编辑的siRNA，能够更快表达蛋白的mRNA，CRISPR-Cas9甚至是体内转染。正确的了解您希望输送的运载物是选择可靠转染产品的第一步。

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希望转染的细胞类型

转染的细胞类型可简单分为两大类，连续细胞系和原代细胞。

连续细胞系具有无限增殖的潜能，通常要比原代或有限细胞更易处理。但由于此类细胞经历过基因改变而变得具有无限增殖能力，它们在培养过程中的表现可能无法必然地反映体内状态。 动物细胞转染试剂类型

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