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本研究利用水稻转录因子文库筛选，绘制了水稻转录因子和菌根共生相关基因之间的调控网络。该网络受到保守的磷感应途径统一控制，以磷酸盐饥饿响应因子（PHR）为中心。PHRs 是菌根共生所必需的，通过 P1BS 顺式作用元件调控菌根共生相关基因表达。高磷条件下，SPX蛋白抑制 OsPHR2 介导的对菌根共生相关基因表达的调控，进而抑制菌根共生。过表达 OsPHR2 可以部分拮抗磷介导的对菌根共生的抑制作用。本研究发现，植物直接营养吸收和通过菌根共生的间接营养吸收，都受到相同的磷信号网络统一调控。本研究将有助于高效用磷植株的培育。酵母文库文库构建筛选欧易生物。重庆实力酵母文库

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酵母双杂交还可以这么用？Y2H-seq 揭示不老松年龄。***小欧又给大家带来了一篇酵母双杂交结合高通量测序技术的应用文章。北京林业大学钮世辉老师团队，在传统的酵母双杂交技术流程基础上，巧妙的结合了NGS技术，优化建立了Y2H-seq技术，**缩短了常规的筛库后测序验证周期，节约了实验成本。文章中应用Y2H-seq技术，对不老松年龄密码进行了有趣的研究，其中所用酵母双杂交文库由欧易生物协助完成。众所周知，酵母双杂交技术是研究蛋白相互作用的利器。目前已知的蛋白质相互作用至少有一半是通过酵母双杂交技术发现的。但是做过酵母杂交实验的小伙伴也都知道蛋白筛选较容易，但是筛选后，想知道获得的阳性克隆都对应的是啥基因，所花费的人力物力相当不小。有困难解决困难，勇敢牛牛不怕困难。

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进行了酵母双杂交文库的筛选，结果显示钙依赖的种子特异性蛋白激酶SPK可以与OsNF-YB9相互作用，分段截取互作验证显示OsNF-YB9的N端是互作所必须的（图a-b），并通过双荧光分子互补实验、BiFC、体外GST-pulldown实验得以证实（图c-e）。亚细胞定位显示SPK主要在细胞质中表达，OsNF-YB9在细胞质和细胞核中都有表达，共表达SPK和OsNF-YB9***促进了OsNF-YB9的入核（图f），表明SPK和OsNF-YB9的相互作用可能促进了OsNF-YB9从细胞质向细胞核的运输。RT-PCR显示SPK在发育中的种子中高表达，在5DAF开始***，并在10-30DAF维持高表达水平（图a-b）。spk敲除突变体种子中垩白率的增加（图c-e），但粒形和粒重与野生型没有***差别。酵母单杂交文库筛选选欧易生物技术可靠服务高效。湖南酵母文库使用

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单杂交筛选为了挖掘影响ALA诱导苹果黄酮醇积累的关键性调控因子，作者以Y1HGold[proMdFLS1-AbAi] 为诱饵，通过酵母单杂交筛选了ALA处理后的苹果愈伤组织cDNA文库。结果显示筛选出的蛋白质主要参与光合作用调控、碳糖代谢、氧化/渗透胁迫响应、***信号转导、木质素生物合成、果实成熟发育等过程，以及一些功能未知的蛋白质。其中， MdSCL8转录因子，由于其在草莓中的同源基因已被报导与黄酮的合成有关，引起了研究者的注意。进一步通过Y1H assay验证确认了MdSCL8可以与MdFLS1启动子互作（图2A）。通过双荧光素酶实验和GUS检测，发现MdSCL8可以负向调控MdFLS1启动子活性（图2B-D）。重庆实力酵母文库

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