江阴Anti-Flag Magnetic Beads/Anti-Flag（磁珠）

目前，大部分直接靶向STAT3的抑制剂是靶向SH2结构域的化合物，因为SH2结构域在STAT3活化中的发挥关键作用。鉴于STAT1在瘤细胞增殖抑制中具有一定重要性，因此STAT3抑制剂应该不会对与STAT1密切相关蛋白的活性产生影响，且STAT1和STAT3的SH2结构域具有很大的相似性。由于只靶向SH2结构域并不能完全抑制STAT3活性，因此开发同时靶向STAT3的DBD、LD、CCD等结构域以克服靶向SH2结构域小分子的局限是重要的STAT3抑制剂开发方向。除了直接抑制STAT3活性，降解STAT3蛋白也是另一个有效的瘤治理方案，然而，开发靶向STAT3的PROTACs相比于小分子抑制剂更具挑战性。酪氨酸激酶受体抑制剂能通过抑制酪氨酸激酶受体，从而阻断瘤生长所需的血液和营养物质供给。江阴Anti-Flag Magnetic Beads/Anti-Flag（磁珠）

CCK-8试剂盒使用注意事项：1、CCK-8试剂盒可以检测，但不能检测酵母细胞。向100μL培养液中加入10μLCCK-8溶液，并培养1-4小时或过夜。2、CCK-8试剂对细胞的毒性非常低。它和活细胞内的脱氢酶持续反应使溶液颜色不断加深，OD值不断增加(注：活细胞内的脱氢酶是持续产生的)。3、要测定细胞的具体数量，建议同时做标准曲线。4、建议采用多通道移液器，以减小平行孔间的差异。5、以下方法可以终止CCK-8反应(96孔板)：(a).在显色反应后，将培养板放置4°C冰箱内。(b).每孔加10μL0.1MHCl溶液。(c).每孔加10μL1%(w/v)的SDS(十二烷基硫酸钠)溶液。注意：反应停止后，应在24小时内测定。Anti-Flag Magnetic Beads/Anti-Flag（磁珠）厂家直供蛋白酶抑制剂能通过抑制炎症反应而降低自由基的产生。

CCK-8实验注意事项：若暂时不测定OD值，可以向每孔中加入10 μL 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定，吸光度不会发生变化。如果待测物质有氧化性或还原性的话，可在加CCK8之前更换新鲜培养基（除去培养基，并用培养基洗涤细胞两次，然后加入新的培养基），去掉药物影响。当然药物影响比较小的情况下，可以不更换培养基，直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。当使用标准96孔板时，贴壁细胞的至小接种量至少为1000 个/孔 (100 μl 培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低，因此推荐接种量不低于2500 个/孔 (100 μl 培养基)。酚红和血清对CCK8法的检测不会造成干扰，可以通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去。CCK8可以检测大肠杆菌，但不能检测酵母细胞。在细胞增殖实验每次测定的过程中需要避免细菌污染，以免影响结果。CCK-8在0-5℃下能够保存至少6个月，在-20℃下避光可以保存1年。

CCK-8试剂盒细胞增殖试验：1.接种细胞悬液100µl(2000个/孔)于96孔板，预先置于37℃，5%CO2饱和湿度的培养箱内培养。2.加入10μLCCK-8，由于每孔加入CCK-8量比较少，有可能因试剂沾在孔壁上而带来误差，建议在加完试剂后轻轻敲击培养板以帮助混匀，同时要注意不要在孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数。3.把培养板放培养箱内1-4小时。由于细胞种类不同，形成的Formazan的量也不一样。如果显色不够的话，可以继续培养，以确认条件。特别是血液细胞形成的Formazan很少，需要较长的显色时间（5-6小时）。4.测定450nm吸光度，建议采用双波长进行测定，检测波长450-490nm，参比波长600-650nm。CCK-8试剂盒是是一种应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。

STAT2是I型干扰素(IFN-α/β)信号传导通路的关键转录因子，在介导抗病毒免疫和抗增殖信号中发挥重要作用。STAT4和STAT6可分别受到IL-12和IL-4的唤醒，是免疫应答调控的中心调节因子。除了调节免疫应答作用外，STAT1也能抑制瘤细胞增殖，并促进瘤细胞凋亡。与STAT1相反，STAT3和STAT5蛋白都是JAK-STAT信号通路的下游致病介导因子，而该通路能够促进细胞增殖和存活。STAT3控制着细胞周期进程和抗细胞凋亡，因此，常与多种人类病症的发展和不良预后有关。除了参与病症进程，STAT3也参与类风湿性关节炎、克罗恩病和炎症性肠病等自身免疫和炎症疾病进展。因此，STAT3已成为具有吸引力的免疫以及炎症疾病治理靶点，开发抑制剂作为STAT3相关的疾病治理成为重要的药物研究方向。大部分直接靶向STAT3的抑制剂是靶向SH2结构域的化合物。常州ML385

随着科技的发展，诞生了不同作用性的抑制剂。江阴Anti-Flag Magnetic Beads/Anti-Flag（磁珠）

内源蛋白的产生和降解一般都维持在一个平衡状态，因此在稳定的环境因素下细胞内的蛋白含量是也是稳定的。但是在体外研究中，蛋白合成过程终止，而降解增强,从而影响蛋白得率。因此我们建议使用多种小分子组成的抑制剂混合物来抑制蛋白酶的功能，阻止蛋白降解情况的发生。应用领域：蛋白纯化，蛋白免疫印迹, 免疫(共)沉淀，蛋白质pull-down实验，免疫荧光，免疫组织化学，激酶测定等。为什么要用蛋白酶抑制剂Cocktail？ 蛋白酶抑制剂Cocktail是低毒，多方面的蛋白保护试剂，大限度地保护蛋白，使其免于被蛋白酶降解。目前生物学研究日渐深入，更多地将目标锁定为细胞中较为微量的蛋白，如信号通路蛋白、受体蛋白，采用coIP,Pull-down等方法获得样品。对于这些微量的珍贵样品，Cocktail能取得很好的保护效果，比单一的抑制剂（如PMSF）更为可靠。江阴Anti-Flag Magnetic Beads/Anti-Flag（磁珠）

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