盐城游离酸D-荧光素钾盐活题成像原理
萤光素酶(英文名称:Luciferase)是自然界中能够产生生物荧光的酶的统称,其中**有代表性的是一种学名为Photinuspyrali'的萤火虫体内的萤光素酶,萤火虫发光的腹部或海洋的蓝色发光波浪将大自然中生物发光奇迹呈现于世。在生物化学和分子生物学的早期,这一现象被认为是发展生物分析的有力平台。1991年,Promega发布了***代萤光素酶分析产品,并启动了基于萤光素酶的进一步创新计划,通过持续致力于研究和创新生物发光系统建立了各种不同的分析技术。Promega萤光素酶技术发光史里程碑AGlo-ingHistoryofInnovationandDiscovery1990年12月,Promega***提出萤火虫萤光素酶(Luc)作为一种新兴报告基因技术的应用可能性。当时的人们认为,萤火虫萤光素酶具备的生物发光特性、极高的灵敏度和快速简单的检测流程等特点,可能会对分子生物学家的研究产生重要的影响。几个月后,***代萤火虫萤光素酶报告基因载体和检测试剂在Promega诞生,使这项新技术正式并更***地为全球研究人员服务。随后30年里,Promega不断在萤光素酶实验工具领域推陈出新,保持技术***的地位。这里提到的萤光素酶即荧光素酶。[1]1991萤光素酶检测系统。D-荧光素钾盐应立即使用,或分装于-20℃避光保存,避免反复冻融。盐城游离酸D-荧光素钾盐活题成像原理
荧光素也就是FDAFDA可透过细胞膜并作为荧光素积蓄在活细胞内。由于荧光素较BCECF或Calcein的亲水性低,因此荧光素从细胞中渗漏的量也高。FDA也可用于流式细胞仪。荧光素的激发和发射波长分别为488nm和530nm。荧光素酶(英文名称:Luciferase)是自然界中能够产生生物荧光的酶的统称,其中更有代表性的是一种学名为Photinuspyralis的萤火虫体内的荧光素酶。在相应化学反应中,荧光的产生是来自于萤光素的氧化,有些情况下反应体系中也包括三磷酸腺苷(ATP)。没有荧光素酶的情况下,萤光素与氧气反应的速率非常慢,而钙离子的存在常常可以进一步加速反应(与肌肉收缩的情况相似)。[1]荧光生成反应通常分为以下两步:萤光素+ATP→萤光素化腺苷酸(luciferyladenylate)+PPi萤光素化腺苷酸+O2→氧荧光素+AMP+光这一反应非常节省能量,几乎所有输入反应的能量都被转化为光。与之形成鲜明对比的是人类使用的白炽灯,只有越10%的能量被转化为光,剩余的能量都变为热能而被浪费。荧光素或荧光素酶不是特定的分子,而是对于所有能够产生荧光的底物和其对应的酶的统称,虽然它们各不相同。不同的能够控制发光的生物体用不同的荧光素酶来催化不同的发光反应。连云港荧光素钠盐D-荧光素钾盐试剂ATP作用下的D-荧光素钾盐什么样。
可运用荧光素酶报告系统分析其相对活性。c.验证特定转录因子同其调控序列的作用,将该序列(通常为启动子区域)插入报告基因载体,同时在实验细胞***转过表达该转录因子,可分析转录因子过表达是否提高荧光素酶活性。d.可以分析信号通路是否***,将该信号通路的下游响应原件序列构建入报告基因载体,在不同上游信号条件下,荧光素酶活性**了通路的下游响应。例如在GPCR研究中,将cAMPresponseelement(CRE)载入报告基因载体,构建稳定表达细胞株后,可以用于分析GPRC的***与6b7a976f-99ae-4c48-8159-4bd筛选。又如,将HIF1α的响应原件hypoxia-responsiveelement(HRE)插入luciferase报告载体构建稳转细胞株,可以用于低氧相关通路的研究。e.验证microRNA的靶序列,将待测的3’UTR序列插入报告基因载体,再共转入该microRNA,如果荧光素酶活性下降,则提示为其靶序列。Q:在[信诺金达]做荧光素酶报告基因检测,需要提供什么?实验结果包括哪些?您需要提供:1.基因序列或模板,需提供详细的转录因子、目的基因或microRNA信息;2.实验细胞,[信诺金达]默认为使用293T细胞,实验结束后,[信诺金达]会为您提供实验流程及完整报告一份,包括实验原始数据、图片、分析结果等。
8.取剩余裂解液测定LacZ的活性,其读数作为内标用以矫正荧光素酶的读数。9.用矫正后的读数作图,分析数据。注:荧光素见光易氧化,已稀释未用的荧光素应丢弃。注意事项:1.荧光素酶检测试剂需在15-25℃条件下预平衡后再进行反应,而后依据具体条件进行自动或手动检测。当用液闪计数仪时,加入荧光素酶检测试剂后立即轻轻混匀。2.如果细胞裂解后不能立即对提取物进行检测,样品可以在冰上保存大约5h,在-70℃可保存数月。不要反复冻融以避免酶活性的降低。3.利用上述方法检测冷的样品时,其信号强度将下降5-15%。4.在荧光素酶活性较高的情况下,导致信号超出线性范围(信号溢出)可用裂解液将样品进行稀释。5.不要储存稀释过的样品。如果必须保存,要在稀释的样品中加入BSA至终浓度为,这样可以保持样品的稳定性。6.一些荧光仪在进行检测前需要1-2s的稳定,因此建议在开机后过一段时间再进行检测操作。荧光素酶报告基因检测主要有哪些用途?a.启动子结构分析,将启动子区域序列(通常2k左右)进行分段截短,或对特定位点进行突变,再分别构建入luciferase报告载体,检测其启动子活性。b.启动子SNP分析,一些基因的启动子区域存在单核苷酸多态性。D-荧光素钾盐一般都是使用什么技术。
经HE染色后观察细胞的病理形态学。活题动物成像技术是近期发展起来的一种新型稳定可靠,是检测动物体内分子及细胞事件的影像检测技术,强有力手段。利用生物发光成像(BLI)可以对活题病灶的大小进行无损伤直观准确检测。我们有自己的独自有机合成实验室,可以生产合成各种化学发光试剂,我们可以提供化学发光试剂、化学发光底物、发光标记物、发光增强剂、染料探针类、微生物和酶的显色底物以及体外诊断试剂。相关列表鲁米诺/3-氨基苯二甲酰肼/发光氨异鲁米诺/4-氨基邻苯二甲酰肼吖啶酯DMAE-NHS吖啶酰肼NSP-SA-ADH吖啶酯ME-DMAE-NHS哌嗪-N,N'-二(2-乙磺酸)PIPES磷酸烯醇丙的酮酸三(环已胺)盐PEP0c835bf4-aae2-43c1-be81-e57液肝素锂乙二胺四乙酸二钾/EDTA二钾血清分离胶/血液分离胶肝素抗凝剂乙二胺四乙酸三钾/EDTA三钾血液促凝剂高效促凝粉高效硅化剂水溶性硅化剂草酸钾钙离子螫合抗凝剂弱效抗凝剂吖啶酯己二酰阱NSP-DMAE-ADH吖啶酯-T4结合物吖啶酯-T3结合物吖啶磺酰胺盐-N-乙胺基马来酰亚胺吖啶磺酰胺盐-T4结合物吖啶磺酰胺盐-T3结合物生物素-T4结合物化学发光分析试剂及标记物生物素-T3结合物生物素-NHS活性酯吖啶磺酰胺NSP-SA-ADH吖啶酯NSP-DMOAE-NHS吖啶酯NSP-DMOAE-PE。D-荧光素钾盐的活题成像技术。常用的荧光素
D-荧光素钾盐适用于哪些领域?盐城游离酸D-荧光素钾盐活题成像原理
荧光素钠[1],橙红色粉末,无气味,有吸湿性;易溶于水,溶液呈黄红色,并带极强的黄绿色荧光,酸化后消失,中和或碱化后又出现,微溶于乙醇;比较大吸收波长(水)。基本信息药品名称荧光素钠拼音名Yingguangsuna英文名FLUORESCEINSODIUM来源(分子式)与标准本品为9-(邻羧基苯基)-6-羟基-3H-吨-3-酮二钠盐。按干燥品计算,含C20H10Na2O5不得少于。类别诊断用药。剂量滴眼2%溶液贮藏密封保存。制剂荧光素钠注射液2化学性质编辑中文名称:荧光素钠中文别名:荧光黄钠;荧光橙红钠;荧光素二钠英文名称:FluoresceindisodiumsaltCAS号:518-47-8[2]荧光素钠分子式:C20H10Na2O5分子量:等级:BSMDL号:MFCD00167039Beilstein号:3833041EC号:208-253-0荧光素钠[1]3性状描述编辑本品为橙红色粉末;无臭,几乎无味;有引湿性。本品在水中易溶,在乙醇中略溶。橙红色粉末,无气味,有吸湿性;易溶于水,溶液呈黄红色,并带极强的黄绿色荧光,酸化后消失,中和或碱化后又出现,微溶于乙醇;比较大吸收波长(水)。4检查资料编辑氯化物取本品,分取溶液10ml,依法检查(附录ⅧA),与标准氯化钠溶液制成的对照液比较,不得更浓()。硫酸盐取上述氯化物项下剩余的溶液25ml,依法检查。盐城游离酸D-荧光素钾盐活题成像原理
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