羟基荧光素
附录ⅧB),与标准硫酸钾溶液制成的对照液比较,不得更浓()。干燥失重取本品,在105℃干燥至恒重,减失重量不得过%(附录ⅧL)。锌盐取本品,加氯化钠的饱和水溶液10ml溶解后,加稀盐酸2ml,摇匀,滤过,滤液中加亚铁**钾试液1ml,不得发生浑浊。5鉴别方法编辑(1)取本品的水溶液(1→2000)1滴,点于滤纸上,即生成黄色斑点,趁湿置溴蒸气中,1分钟后再使与氨蒸气接触,斑点即变为深粉红色。(2)本品的水溶液显强烈的荧光,用大量的水稀释后仍极明显;但加酸使成酸性后,荧光即消失;再加碱使成碱性,荧光又显出。(3)本品炽灼灰化后显钠盐的鉴别反应(附录Ⅲ)。6含量测定编辑取本品约,精密称定,加水20ml溶解后,加稀盐酸5ml使荧光素析出,用丁醇-氯仿(1:1)提取4次,每次20ml,合并提取液,用水10ml洗涤,洗液再用异丁醇-氯仿(1:1)5ml振摇提取,合并提取液,置105℃恒重的容器中,在水浴上通风蒸发至干,残渣用乙醇10ml溶解后,再置水浴上蒸干,并在105℃干燥至恒重,精密称定,残渣重量与相乘,即得供试量中含有C20H10Na2O5的重量。荧光素钠是一种有机化合物,分子式为C20H10Na2O5,橙红色粉末,无气味,有吸湿性;易溶于水,溶液呈黄红色,并带极强的黄绿色荧光。做D-荧光素钾盐测试品牌有哪些?羟基荧光素
而发出不同颜色的荧光。萤火虫有2000多种,而叩甲总科(包括萤火虫、叩头虫和相关昆虫)则有更多,因此它们的荧光素酶对于分子系统学研究很有用。目前研究得更透彻的荧光素酶是来自Photinini族萤火虫中的北美萤火虫(Photinuspyralis)。荧光素酶报告基因(Luc)是指以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。荧光素酶可以催化luciferin氧化oxyluciferin,在luciferin氧化的过程中,会发出生物荧光(bioluminescence)。荧光素酶是能够催化不同底物氧化发光的一类酶,哺乳细胞无内源性荧光素酶。更常用的荧光素酶有细菌荧光素酶、萤火虫荧光素酶和Renilla荧光素酶。细菌荧光素酶对热敏感,因此在哺乳细胞的应用中受到限制。萤火虫荧光素酶灵敏度高,检测线性范围宽达7~8个数量级,是更常用于哺乳细胞的报道基因,用荧光比色计即可检测酶活性,因而适用于高通量筛选。随着具有膜通透性和光裂解作用的萤火虫荧光素酶的应用,无需裂解细胞即可检测酶活性。Renilla荧光素酶催化肠腔(coelenterazine)氧化,产物可透过生物膜,可能是更适用于活细胞的报告分子。将荧光素酶报告基因载体转染到细胞中。常州体外研究D-荧光素钾盐生物公司D-荧光素钾盐长期保存条件是-20℃干燥避光。
可用荧光素酶检测系统灵敏方便地测定荧光素酶基因的表达。荧光素酶报告基因有许多优点:①非放射性;②比CAT及其他报告基因速度快;③比CAT灵敏100倍;④荧光素酶在哺乳细胞中的半衰期为3小时,在植物中的半衰期为3.5小时。由于半衰期短,故启动子的改变会即时导致荧光素酶活性的改变,而荧光素酶不会积累。相反,CAT在哺乳细胞中的半衰期为50小时。荧光素酶浓度在10—16mol/L(10pS/L)到10-8mol/L(1mg/L)范围内,荧光信号强度与酶浓度成正比。在理想条件下,可检测到l0-20mol/L的荧光素酶。检测步骤:1.用生物信息学方法分析并预测启动子区可能的转录因子结合位点。2.设计引物用PCR法从基因组DNA中克隆所需的靶启动子片段,将此片段插入到荧光素酶报告基因质粒(pGL3-basic)中。3.筛选阳性克隆,测序。扩增克隆并提纯质粒备用。4.扩增转录因子质粒,提纯备用。同时准备相应的空载质粒对照,提纯备用。5.培养293(或其它目的细胞),并接种于24孔板中,生长10-24小时(80%汇合度)。6.将报告基因质粒与转录因子表达质粒共转染细胞。7.提取蛋白并用于荧光素酶检测。8.加入底物,测定荧光素酶的活性。9.计算相对荧光强度,并与空载对照比较。
萤火虫荧光素酶(Luciferase)是一种常用的信号分子,可以用来标记肿瘤细胞.一.细胞方法将带有荧光素luc转酶报告基因的真核表达重组质粒pRc/CMV2-7,利用G418筛选,获得稳染人乳腺哎细胞株MCF-7-luc,并在稳定表达荧光素酶基因的细胞克隆MCF-7体外评价其发光能力。通过建立裸鼠移植瘤模型,利用活题生物发光成像系统检测肿大的瘤生长及转移情况,为下一步监测裸鼠移植瘤对药物作用的变化情从而为分析药物对肿大的瘤的治的好效果提供理想的状况.G418筛选浓度的确定:37℃细胞培养箱中常培养,G418按0、200、400、600、800、1000μg/ml设置6个浓度梯度。在细胞接种24h后,加入6孔板中,每个浓度设2个孔在10~14d内全部死亡。每天观察细胞生长情况,死亡更低的G418浓度,即为筛选质粒转染克隆MCF-7细胞的浓度。1)细胞转染取对数生长期的MCF-7细胞,将细胞接种于6孔板内待细胞融合度达到80%~90%孔培养板中,TM即可转染。按照Lipofectamine2000试剂盒操作指南进行转染。在250μl无血清、无双抗的DMEM培培养基中加入luc质粒8μg/ml的pRc/CMV2-在250μl无血清、无双抗的DMEM培养基中加入10μlLipofectamineTM2000,室温培育5min。将上述2种稀释液混匀。光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性。
2-乙磺酸)PIPES磷酸烯醇**酸三(环已胺)盐PEP病毒保存液肝素锂乙二胺四乙酸二钾/EDTA二钾血清分离胶/血液分离胶肝素抗凝剂乙二胺四乙酸三钾/EDTA三钾血液促凝剂高效促凝粉高效硅化剂水溶性硅化剂草酸钾钙离子螫合抗凝剂弱效抗凝剂吖啶酯己二酰阱NSP-DMAE-ADH吖啶酯-T4结合物吖啶酯-T3结合物吖啶磺酰胺盐-N-乙胺基马来酰亚胺吖啶磺酰胺盐-T4结合物吖啶磺酰胺盐-T3结合物生物素-T4结合物化学发光分析试剂及标记物生物素-T3结合物生物素-NHS活性酯吖啶磺酰胺NSP-SA-ADH吖啶酯NSP-DMOAE-NHS吖啶酯NSP-DMOAE-PEG-GT-NHSCy3-NHS酯Cy7-NHS酯5-羧基荧光素-NHS酯6-羧基荧光素-NHS酯5(6)-羧基荧光素-NHS酯6-羧基荧光素D荧光素钠盐D-Luciferin,SodiumSaltD-荧光素钾盐D-Luciferin,PotassiumSaltD-荧光素萤火虫,游离酸D-LuciferinFirefly,freeacid萤火虫荧光素酶fireflyluciferase海肾荧光素酶Renillaluciferase天然腔肠荧光素Coelenterazineh腔肠素hCoelenterazinef腔肠素fCoelenterazineh/腔肠素h腔肠荧光素运输和保存冰袋运输;-20℃干燥避光保存;有效期一年。使用方法1.体外生物发光检测1)用无菌蒸馏水溶解D-荧光素钠盐,配制成30mg/mL的储存液(100-200×),混匀。立即使用。南京翌科生物科技有限公司D-荧光素钾盐比较靠谱。专业做D-荧光素钾盐生物公司
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酸化后消失,中和或碱化后又出现,微溶于乙醇;比较大吸收波长(水)。中文名称:荧光素钠中文别名:荧光黄钠;荧光橙红钠;荧光素二钠英文名FLUORESCEINSODIUM等级:BS物性数据编辑播报1.性状:未确定2.密度(g/cm3,25/4℃):.相对蒸汽密度(g/cm3,空气=1):未确定4.熔点(ºC):3205.沸点(ºC,常压):未确定6.沸点(ºC,8kPa):未确定7.折射率:未确定8.闪点(ºC):未确定9.比旋光度(º):未确定10.自燃点或引燃温度(ºC):未确定11.蒸气压(kPa,25ºC):未确定12.饱和蒸气压(kPa,60ºC):未确定13.燃烧热(KJ/mol):未确定14.临界温度(ºC):未确定15.临界压力(KPa):未确定16.油水(辛醇/水)分配系数的对数值:未确定17.上限(%,V/V):未确定18.下限(%,V/V):未确定19.溶解性:溶于水及乙醇,带有强的绿色荧光,水溶性好。羟基荧光素
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