宿迁荧光素钠盐D-荧光素钾盐活题成像原理
luciferyladenylate)+PPi萤光素化腺苷酸+O2→氧荧光素+AMP+光这一反应非常节省能量,几乎所有输入反应的能量都被转化为光。与之形成鲜明对比的是人类使用的白炽灯,只有越10%的能量被转化为光,剩余的能量都变为热能而被浪费。分析荧光素或荧光素酶不是特定的分子,而是对于所有能够产生荧光的底物和其对应的酶的统称,虽然它们各不相同。不同的能够控制发光的生物体用不同的荧光素酶来催化不同的发光反应。更为人所知的发光生物是萤火虫,而其所采用不同的荧光素酶与其他发光生物如荧光菇(发光类脐菇,Omphalotusoleariu')或许多海洋生物都不相同。在萤火虫中,发光反应所需的氧气是从被称为腹部气管(abdominaltrachea)的管道中输入。一些生物,如叩头虫,含有多种不同的荧光素酶,能够催化同一荧光素底物,而发出不同颜色的荧光。萤火虫有2000多种,而叩甲总科(包括萤火虫、叩头虫和相关昆虫)则有更多,因此它们的荧光素酶对于分子系统学研究很有用。目前研究得更透彻的荧光素酶是来自Photinini族萤火虫中的北美萤火虫(Photinuspyrali')。应用荧光素酶可以在实验室中用基因工程的方法生成,并被用于多种不同的实验。D-荧光素钾盐测试比较好的公司有哪几个?宿迁荧光素钠盐D-荧光素钾盐活题成像原理
产品描述D-荧光素(D-Luciferin)是荧光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍应用于整个生物技术领域,特别是体内***成像技术。其作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下,荧光素底物能够被氧化发光。当荧光素过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性(见下图)。将携带荧光素酶编码基因(Luc)的慢病毒转染入细胞后构建稳定表达细胞株,构建原位**模型,之后注入荧光素底物,通过IVIS系统来检测光强度变化,从而实时监测疾病发展状态或进行药物药效评价等。也可以利用ATP对此反应体系的影响,根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。注:在抗**药物药效评价试验中,由于生物自发光检测需要根据荧光素表达标定**大小,受**生长所发生的**内部坏死影响,生物自发光并不能很***的评价**生长,在抗**药效评价有较高要求的实验中,建议使用小动物核磁成像系统检测**生长。D-荧光素也常用于体外研究,包括荧光素酶和ATP水平分析;报告基因分析;高通量测序和各种污染检测。目前有三种产品形式:D-荧光素(游离酸),D-荧光素盐(钠盐和钾盐)。主要差别在于溶解特性:前者的水溶性以及缓冲体系的溶解性都较弱,除非溶于弱碱如低浓度NaOH和KOH溶液。可溶于甲醇和DMSO。 罗丹明b-聚乙二醇-生物素南京D-荧光素钾盐测试公司哪家便宜。
其中更有代表性的是一种学名为Photinuspyralis的萤火虫体内的荧光素酶。在相应化学反应中,荧光的产生是来自于萤光素的氧化,有些情况下反应体系中也包括三磷酸腺苷(ATP)。没有荧光素酶的情况下,萤光素与氧气反应的速率非常慢,而钙离子的存在常常可以进一步加速反应(与肌肉收缩的情况相似)。[1]荧光生成反应通常分为以下两步:萤光素+ATP→萤光素化腺苷酸(luciferyladenylate)+PPi萤光素化腺苷酸+O2→氧荧光素+AMP+光这一反应非常节省能量,几乎所有输入反应的能量都被转化为光。与之形成鲜明对比的是人类使用的白炽灯,只有越10%的能量被转化为光,剩余的能量都变为热能而被浪费。荧光素或荧光素酶不是特定的分子,而是对于所有能够产生荧光的底物和其对应的酶的统称,虽然它们各不相同。不同的能够控制发光的生物体用不同的荧光素酶来催化不同的发光反应。更为人所知的发光生物是萤火虫,而其所采用不同的荧光素酶与其他发光生物如荧光菇(发光类脐菇,Omphalotusolearius)或许多海洋生物都不相同。在萤火虫中,发光反应所需的氧气是从被称为腹部气管(abdominaltrachea)的管道中输入。一些生物,如叩头虫,含有多种不同的荧光素酶,能够催化同一荧光素底物。
可运用荧光素酶报告系统分析其相对活性。c.验证特定转录因子同其调控序列的作用,将该序列(通常为启动子区域)插入报告基因载体,同时在实验细胞***转过表达该转录因子,可分析转录因子过表达是否提高荧光素酶活性。d.可以分析信号通路是否***,将该信号通路的下游响应原件序列构建入报告基因载体,在不同上游信号条件下,荧光素酶活性**了通路的下游响应。例如在GPCR研究中,将cAMPresponseelement(CRE)载入报告基因载体,构建稳定表达细胞株后,可以用于分析GPRC的***与6b7a976f-99ae-4c48-8159-4bd筛选。又如,将HIF1α的响应原件hypoxia-responsiveelement(HRE)插入luciferase报告载体构建稳转细胞株,可以用于低氧相关通路的研究。e.验证microRNA的靶序列,将待测的3’UTR序列插入报告基因载体,再共转入该microRNA,如果荧光素酶活性下降,则提示为其靶序列。Q:在[信诺金达]做荧光素酶报告基因检测,需要提供什么?实验结果包括哪些?您需要提供:1.基因序列或模板,需提供详细的转录因子、目的基因或microRNA信息;2.实验细胞,[信诺金达]默认为使用293T细胞,实验结束后,[信诺金达]会为您提供实验流程及完整报告一份,包括实验原始数据、图片、分析结果等。做D-荧光素钾盐测试品牌有哪些?
后者能够易溶于水或缓冲液中,使用方便,溶剂无毒性,特别适合体内实验。配成溶液后的这三种产品,在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。产品性质运输和保存运输条件:4℃冰袋运输;短期保存:4℃干燥避光长期保存:-20℃干燥避光母液保存:-20℃避光有效期长期保存:有效期一年工作液:先用现配使用方法1.体外生物发光检测1)用无菌蒸馏水溶解D-荧光素钾盐,配制成30mg/mL的储存液(100-200×),混匀。立即使用,或分装于-20℃避光保存,避免反复冻融。2)用预热好的组织培养基将储存液稀释至mg/mL的工作液浓度。3)去除细胞培养基。4)待图像分析前,向细胞内添加荧光素工作液,37℃孵育5-10min,然后进行图像分析。2.***成像分析1)用无菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的荧光素的储存液,混匀。2)用µm滤膜过滤除菌。立即使用,或分装于-20℃避光保存,避免反复冻融。3)腹腔注射(.),按照150mg/kg的荧光素/体重浓度进行注射,以小鼠为例,每只小鼠体重假定20g,每只小鼠用量3mg;4)注射入体内10-15min(待光信号达到更强稳定平台期)后进行成像分析。注:建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线,从而确定更高信号检测时间和信号平台期。 D-荧光素钾盐测试方法是体外生物发光检测。徐州专业做D-荧光素钾盐使用说明
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荧光素钠[1],橙红色粉末,无气味,有吸湿性;易溶于水,溶液呈黄红色,并带极强的黄绿色荧光,酸化后消失,中和或碱化后又出现,微溶于乙醇;比较大吸收波长(水)。基本信息药品名称荧光素钠拼音名Yingguangsuna英文名FLUORESCEINSODIUM来源(分子式)与标准本品为9-(邻羧基苯基)-6-羟基-3H-吨-3-酮二钠盐。按干燥品计算,含C20H10Na2O5不得少于。类别诊断用药。剂量滴眼2%溶液贮藏密封保存。制剂荧光素钠注射液2化学性质编辑中文名称:荧光素钠中文别名:荧光黄钠;荧光橙红钠;荧光素二钠英文名称:FluoresceindisodiumsaltCAS号:518-47-8[2]荧光素钠分子式:C20H10Na2O5分子量:等级:BSMDL号:MFCD00167039Beilstein号:3833041EC号:208-253-0荧光素钠[1]3性状描述编辑本品为橙红色粉末;无臭,几乎无味;有引湿性。本品在水中易溶,在乙醇中略溶。橙红色粉末,无气味,有吸湿性;易溶于水,溶液呈黄红色,并带极强的黄绿色荧光,酸化后消失,中和或碱化后又出现,微溶于乙醇;比较大吸收波长(水)。4检查资料编辑氯化物取本品,分取溶液10ml,依法检查(附录ⅧA),与标准氯化钠溶液制成的对照液比较,不得更浓()。硫酸盐取上述氯化物项下剩余的溶液25ml,依法检查。宿迁荧光素钠盐D-荧光素钾盐活题成像原理
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