扬州荧光素钠盐D-荧光素钾盐活题成像原理
短期保存:4℃干燥避光长期保存:-20℃干燥避光母液保存:-20℃避光有效期长期保存:有效期一年工作液:先用现配使用方法1.体外生物发光检测1)用无菌蒸馏水溶解D-荧光素钾盐,配制成30mg/mL的储存液(100-200×),混匀。立即使用,或分装于-20℃避光保存,避免反复冻融。2)用预热好的组织培养基将储存液稀释至mg/mL的工作液浓度。3)去除细胞培养基。作者:思存链接:zhuanlan./p/来源:知乎著作权归作者所有。商业转载请联系作者获得授权,非商业转载请注明出处。高斯荧光素酶近年来,其他荧光素酶(例如高斯荧光素酶)的使用有所增加,因为这些报告基因较小,并且不需要ATP的存在。高斯荧光素酶是一种20kD的蛋白质,可通过氧气催化腔肠素氧化,产生光。来自于海洋足类高斯氏菌的生物发光酶在表达后可有效地从哺乳动物细胞中分泌出来。Amplite™高斯荧光素酶报告基因检测试剂盒(#AAT-12530)使用专有的发光配方来定量细胞培养基中的荧光素酶活性。当该试剂与高斯荧光素酶相互作用时,产sheng发光产物,该发光产物提供强发光。Amplite高斯荧光素酶报告基因测定试剂盒特点:提供了与HTS液体处理仪器兼容的所有基本组件它们具有高灵敏度。做D-荧光素钾盐测试价格是多少。扬州荧光素钠盐D-荧光素钾盐活题成像原理
故根据荧光反应的情况可以检测样品中的微生物含量。APT荧光检测仪***用于食品、饮用水、餐饮器具等的微生物快速检测。1970年,科学家***次测定了萤火虫荧光素酶的结构;1985年,科学家***克隆了一种萤火虫荧光素酶基因,并在大肠杆菌中表达,从而得到了具有活性的荧光素酶;1986年,科学家们测定了该种萤火虫荧光素酶的基因序列。随后,各种萤火虫荧光素酶基因相继克隆成功,荧光素酶的研究和应用不断发展。目前,荧光素酶发光系统的分析技术已经广泛应用到医学、生命科学、环境科学、微生物学等许多领域。以医学领域为例,**们将荧光素酶基因嵌入到*细胞中,再注入荧光素,使*细胞发光,通过探测荧光,就能监测*细胞的扩散和转移。同理,用这种方法能对致病基因、***免疫机制等进行研究,对某些疾病进行诊断,监测疫苗、药物和治疗方法的效力。扬州萤火虫荧光素酶D-荧光素钾盐应用光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性。
luciferin)的分子结构如右图所示:,在氧气、ATP存在的条件下和荧光素酶发生反应,生成氧化荧光素(oxyluciferin),分子结构如右图所示,并产生长发生光现象。但是该底物荧光素以前大多依赖进口,产品价格昂贵。而且由于该产品容易降解、受潮影响使用效果。所以,需要国产化的方式生产,一方面可以降低成本,一方面可以增强使用效果。作者:科远迪链接:zhuanlan./p/来源:知乎著作权归作者所有。商业转载请联系作者获得授权,非商业转载请注明出处。D-luciferin,potassiumsalt荧光素产品说明书发光原理哺乳动物生物发光,一般是将Fireflyluciferase基因(由554个氨基酸构成,约50KD)即荧光素酶基因整合到预期观察的细胞染色体DNA上以表达荧光素酶,培养出能稳定表达荧光素酶的细胞株,当细胞分裂、转移、分化时,荧光素酶也会得到持续稳定的表达。基因、细胞和活题动物都可被荧光素酶基因标记。将标记好的细胞接种到实验动物体内后,当外源(腹腔或静脉注射)给予其底物荧光素(D-luciferin,potassiumsalt,以下均简称荧光素),即可在几分钟内产生长发生光现象。所发的光波长在540-600nm。这种酶在ATP,氧存在的条件下,催化荧光素的氧化反应才可以发光。
后者能够易溶于水或缓冲液中,使用方便,溶剂无毒性,特别适合体内实验。配成溶液后的这三种产品,在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。产品性质运输和保存运输条件:4℃冰袋运输;短期保存:4℃干燥避光长期保存:-20℃干燥避光母液保存:-20℃避光有效期长期保存:有效期一年工作液:先用现配使用方法1.体外生物发光检测1)用无菌蒸馏水溶解D-荧光素钾盐,配制成30mg/mL的储存液(100-200×),混匀。立即使用,或分装于-20℃避光保存,避免反复冻融。2)用预热好的组织培养基将储存液稀释至mg/mL的工作液浓度。3)去除细胞培养基。4)待图像分析前,向细胞内添加荧光素工作液,37℃孵育5-10min,然后进行图像分析。2.***成像分析1)用无菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的荧光素的储存液,混匀。2)用µm滤膜过滤除菌。立即使用,或分装于-20℃避光保存,避免反复冻融。3)腹腔注射(.),按照150mg/kg的荧光素/体重浓度进行注射,以小鼠为例,每只小鼠体重假定20g,每只小鼠用量3mg;4)注射入体内10-15min(待光信号达到更强稳定平台期)后进行成像分析。注:建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线,从而确定更高信号检测时间和信号平台期。 做D-荧光素钾盐的哪家便宜。
luciferyladenylate)+PPi萤光素化腺苷酸+O2→氧荧光素+AMP+光这一反应非常节省能量,几乎所有输入反应的能量都被转化为光。与之形成鲜明对比的是人类使用的白炽灯,只有越10%的能量被转化为光,剩余的能量都变为热能而被浪费。分析荧光素或荧光素酶不是特定的分子,而是对于所有能够产生荧光的底物和其对应的酶的统称,虽然它们各不相同。不同的能够控制发光的生物体用不同的荧光素酶来催化不同的发光反应。更为人所知的发光生物是萤火虫,而其所采用不同的荧光素酶与其他发光生物如荧光菇(发光类脐菇,Omphalotusoleariu')或许多海洋生物都不相同。在萤火虫中,发光反应所需的氧气是从被称为腹部气管(abdominaltrachea)的管道中输入。一些生物,如叩头虫,含有多种不同的荧光素酶,能够催化同一荧光素底物,而发出不同颜色的荧光。萤火虫有2000多种,而叩甲总科(包括萤火虫、叩头虫和相关昆虫)则有更多,因此它们的荧光素酶对于分子系统学研究很有用。目前研究得更透彻的荧光素酶是来自Photinini族萤火虫中的北美萤火虫(Photinuspyrali')。应用荧光素酶可以在实验室中用基因工程的方法生成,并被用于多种不同的实验。南京D-荧光素钾盐测试公司有哪几家。扬州D-荧光素钾盐试剂
D-荧光素钾盐检测的安全性如何保障?扬州荧光素钠盐D-荧光素钾盐活题成像原理
并实现了在非常高通量的应用中使用报告基因检测。[1]随着UltraGlo™萤光素酶的发展,现在已经实现了“加样-读数”的ATP检测方法。ATP是细胞健康的重要指标,这使得CellTiter-Glo®能有效测定细胞活力,尤其是在高通量应用中。该检测原理还促进了其它ATP检测平台的诞生,尤其是用于研究ATP酶(如激酶)的Kinase-Glo®(2004年)和ADP-Glo™(2009年)酶检测系统。[1]2003Caspase-Glo®3/7检测除了可以利用萤火虫萤光素酶反应测定样品中萤光素酶或ATP的含量外,还可以检测底物(luciferin)浓度的变化。通过将luciferin与可被不同酶类识别并产生反应的保护基团偶联,能对这些酶进行灵敏的“加样-读数”检测,如半胱天冬酶(caspase)和其它蛋白酶。[1]2007One-Glo™萤光素酶检测系统随着对萤火虫萤光素酶化学反应的进一步了解以及Promega生物学家和化学家团队的建立,一种改进的luciferin面世,能更好地用于典型的报告基因检测应用。这种新的底物——fluoroluciferin,是新型底物开发的一个早期实例。[1]2012NanoLuc®萤光素酶基于定向进化和新型底物开发方面的经验,研究人员从虾的萤光素酶改造设计出一种新型萤光素酶报告基因,即NanoLuc®萤光素酶。扬州荧光素钠盐D-荧光素钾盐活题成像原理
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