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时间:2022年05月13日 来源:

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内生菌共生于植物内部,要获得内生菌首先需要破碎植物组织。植物组织和内生菌在形态、硬度等性质上均有差异,想要获得更多内生菌基因组DNA,对裂解介质的选择是难点。2、相对于植物基因组,虽然内生菌包括细菌,***,放线菌等不同类型微生物,但其基因组*占微小部分单独提取内生菌DNA比较困难,提取到的是混合DNA,通过PCR才能鉴定。内生菌DNA提取思路:STEP1破坏植物释放菌体;STEP2破坏菌体释放核酸;STEP3提取DNA。有没有合适的益启生物提供专业的土壤DNA提取。

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12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,加入500 ul漂洗液,12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,加入500 ul漂洗液,12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,12000rpm离心3分钟,将离心柱转移至新的离心管中,70℃加热3分钟;加入20 ul洗脱液,70℃加热3分钟;12000rpm离心1分钟,丢弃离心柱,离心管中液体即为DNA溶液。 2)PCR扩增及电泳 PCR扩增使用Identifiler Plus试剂盒,10 μl扩增体系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,扩增程序为,95℃,11分钟;94℃,20 秒,59℃,3分钟,30个循环;60℃,10分钟;4℃保存;电泳在ABI 3500XL仪器中进行;电泳上样体系为,1 μl PCR产物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 实施例4 以石英膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表层土壤,烘干,土壤DNA提取是良好的科学仪器。上海土壤微生物DNA土壤DNA提取哪家好

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