培养基消毒 培养基制备仪安装调试

消毒与灭菌的区别：消毒指使用较为温和的物理或化学方法单杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。消毒方法常用煮沸消毒法，巴氏消毒法（对于一些不耐高温的液体）还有化学药剂（如酒精、氯气、石炭酸等）消毒、紫外线消毒。灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。灭菌方法：①接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法；②玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法，所用器械是干热灭菌箱；③培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法，所用器械是高压蒸汽灭菌锅。④表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法，所用器械是紫外灯。要根据不同微生物的营养需求选择适宜的营养物质，配制针对性强的培养基。培养基消毒 培养基制备仪安装调试

培养基的制备原则和要求：培养基是根据各类微生物生长繁殖的需要，用人工方法把多种物质混合而成的营养物。一般用来分离、培养菌类。常用的培养基有基础培养基、增菌培养基、选择培养基、鉴别培养基和厌氧培养基。在制备培养基时，应掌握如下原则和要求：(一)培养基必须含有细菌生长繁殖所需要的营养物质。所用的化学药品必须纯净，称取的份量务必准确。(二)培养基的酸碱度应符合细菌生长要求。按各种培养基要求准确测定调节pH值。多数细菌生长的适宜pH值为7.2～7.6，呈弱碱性。培养基灭菌 培养基制备仪半组合培养基指一类主要以化学试剂配制，同时还加有某种或某些天然成分的培养基。

培养基的验收：购买的培养基到货后，应有专人做好培养基接受和培养基验收工作，应仔细核对生产企业提供的关于培养基资料、培养基名称、规格数量、外观特征、批号、保质期是否符合要求。每批培养基到货物后都应对培养基的质量进行检测，满足检测方法规定的要求后方可投入使用。培养基是液体、半固体或固体形式的，含天然或合成成分，用于保证微生物繁殖或保持其活力的物质。保存是否得当、配制使用是否正确等都直接影响到检测结果的准确性。

马铃薯培养基的分装：1.根据需要将培养基分装于不同容量的三角烧瓶、试管中。分装的量不宜超过容器的2/3以免灭菌时外溢。2.琼脂斜面分装量为试管容量的1/5，灭菌后须趁热放置成斜面，斜面长约为试管长的2/3。3.半固体培养基分装量约为试管长的1/3，灭菌后直立凝固待用。4.高层琼脂分装量约为试管的1/3，灭菌后趁热直立，待冷后凝固待用。5.液体培养基分装于试管中，约是试管长度的1/3。6.琼脂平板：将灭菌(或加热融化)后的培养基冷至50℃左右，以无菌手续倾人灭菌平皿内，内径225px的平皿倾注培养基约13～15ml，轻摇平皿底，使培养基平铺于平皿底部，待凝固后即成，倾注培养基时，切勿将皿盖全部启开，以免空气中尘埃及细菌落入新制成的平板培养基(简称平板)，表面水分较多，不利于细菌的分离，通常应将平皿倒扣搁置于37℃培养箱内约30分钟待平板平面干燥后使用。配制培养基的原则：根据培养目的需要选择适宜的营养物质。

干粉培养基有哪些注意事项：①熔化培养基制备必须在玻璃容器中进行，如果使用铜或铁器皿，会影响细菌的生长。②注意按照先加水再加颗粒干粉培养基顺序，反之则不利于培养基溶解。③单在必要时进行加热溶解操作，其加热温度也不要过高时间不要过长，主要原因是高温会破坏琼脂和培养基中的一些营养成分。④生产的干粉培养基和颗粒培养基都经过pH校准，使用时无需特殊验证。因为高压会影响pH值，则应在高压后验证pH值。⑤液体培养基通常是预先包装好的，分装时应注意每管的用量不得高于试管的三分之二。⑥高压后冷却至五六十度环境，再导入平板，否则会形成更多的水蒸气，导致细菌分离数量。对一些需严格灭菌的培养基（如组织培养基），较长时间的贮存，必须放在3~6℃的冰箱内。北京全自动培养基制备仪

低渗溶液则使细胞吸水膨胀易破裂，因此，配制培养基时要掌握营养物质的浓度。培养基消毒 培养基制备仪安装调试

培养基的分装：大批量配制时使用的自动分配器须经校准和确认。每次使用前后，均要对分配器的管道系统进行冲洗，在分装无菌培养基前，则要采用无菌硅胶管。固体培养基一般分装在250ml、500ml锥形瓶中，高压灭菌后根据需要分装平皿或试管。平皿：倾注平皿，应在无菌室中放置3—4h，如用塑料平皿须在35℃培养箱中倒置30—60min。让水蒸汽自然蒸发。斜面：制备低层斜面分装于试管，约占容积1/5，灭菌后趁热斜放在细玻璃棒和木杆上，使成斜度，分装使注意管口和瓶塞上勿沾有培养基，如沾有培养基应用布抹去，以避免污染。培养基消毒 培养基制备仪安装调试

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