北京全自动培养基制备器

培养基制备操作步骤：(一)准确称量试剂根据不同的菌类和用途，选择适宜的培养基，培养基所需试剂必须纯净。(二)校正pH值将称量好的培养基各种成分放入容器内，标记划线，加热溶解，补充水分，测定酸碱度，常用pH6.8～8.0的精密试纸或酸度计测定。用1NNaOH和1NHCl调节pH值到适宜范围内。(三)过滤将玻璃漏斗置铁架上，再用纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中，将上述培养基倒入其中过滤至透明。(四)分装将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内(试管内每支装5mL;三角瓶中装100～150ml)，塞好棉塞用牛皮纸包扎好，准备灭菌。(五)灭菌培养基的灭菌，常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死，但细菌的芽胞有较强的抗热性，须经高压蒸汽灭菌才能达到彻底灭菌的目的。培养基通常采用高压蒸汽灭菌。北京全自动培养基制备器

培养基制备器：1.多功能蠕动泵：该仪器的明显特征是高精密度和高速度。可选择从0.1到999ml不等的剂量量配器，实现培养基定量分装，系统运行的精确度达到±0.5﹪。系统自动调整供给样品剂量保证了重现性结果。2.自动管阀：经济的分配法。在培养基器皿中事先选好一定的轻微的余压来推动样品流动。MediaPreo控制阀门开关。容量一达到所需，MediaPrep就会开始运行样品量配器并根据培养基的黏度调整样品剂量。3.其他系统：可直接连接标准、通用的蠕动泵和稀释、充填培养皿系统。重庆Systec培养基制备器培养基制备器利用与外部水连接的盘状热交换器，能够使内部迅速冷却。

培养基各成份的混合和溶化:培养基所用化学药品均应是化学纯的。使用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅，以防有微量铜或铁混入培养基中，使细菌不易生长。好好使用不锈钢锅加热溶化．也可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在锅中溶化时、可先用温水加热并随时扰动，以防焦化、如发现有焦化现象、该培养基即不能使用，应重新制备。待大部分固体成分溶化后，再用较小火力使所有成分完全溶化．迄至煮沸。如为琼脂培养基，应先用一部分水将琼脂溶化，用另一部分水溶化其它成分，然后将两溶液充分混合。在加热溶化过程中，因蒸发而丢失的水分，较后必须加以补足。

培养基的分装，应按使用的目的和要求，分装于试管、烧瓶等适当容器内。分装量不得超过容器装盛量的2/3。容器口可用垫有防湿纸的棉塞封堵，其外还须用防水纸包扎（现试管一般多有用螺旋盖者）。分装时较好能使用半自动或电动的定量分装器。分装琼脂斜面培养基时，分装量应以能形成2/3底层和1/3斜面的量为洽当。分装容器应预先清洗干净并经干烤消毒，以利于培养基的彻底灭菌。每批培养基应另外分装20ml培养基于一小玻璃瓶中，随该批培养基同时灭菌，以为测定该批培养基较终pH之用。在配制培养基时应尽量利用廉价且易于获得的原料作为培养基成分。

培养基的实验室制备：1.过滤灭菌:过滤灭菌可以在真空负压或正压条件下进行。使用无菌设备和0.2um孔径的滤膜。将过滤装置的各个部分消毒灭菌,或使用预消毒设备。一些滤膜上附着蛋白质或其他物质()。为达到有效过滤,应事先将滤膜用无菌水润湿。2.监测:应对经湿热或过滤灭菌的培养基进行监测,尤其要对pH、色泽、灭菌效果和均匀度等指标进行监测。添加剂的制备:制备含有有毒物质(生素）时应小心操作，避免因粉末的扩散造成实验人员过敏或发生其他不良反应。采用适当的预防措施并小心按照产品使用说明操作。培养基的分装：培养基的分装，应按使用的目的和要求，分装于试管、烧瓶等适当容器内。北京全自动培养基制备器

培养基制备器放入烧杯或瓷缸中，慢慢加入少量所需水，边加入边用玻璃棒搅拌。北京全自动培养基制备器

在制备培养基时，通常要考虑以下因素：(1)pH值多数细胞系在pH=7.4下生长得很好。尽管各细胞株之间细胞生长*pH值变化很小，但一些正常的成纤维细胞系以pH=7.4～7.7，转化细胞以pH=7.0～7.4更合适。据报道，上皮细胞以pH=5.5合适。为确定*佳pH值，做一个简单的生长实验或特殊功能分析酚红常用作指示剂，pH=7.4呈红色，pH=7.0变橙色，pH=6.5变黄色，而pH=7.6呈红色中略带蓝色，pH=7.8呈紫色。由于对颜色的观察有很大的主观性，因而必须用无菌平衡盐溶液和同样浓度的酚红配一套标准样，放在与制备培养基相同的瓶子中。(2)缓冲能力碳算盐缓冲系统由于毒性小、成本低、对培养物有营养作用，因此比其他缓冲系统用得多。在pH值条件下的缓冲能力差。(3)渗透压多数培养细胞对渗透压有很宽的耐受范围，一般常用冰点降低或蒸汽压升高测定。如果自己配培养基，可通过测定渗透压防止称量和稀释等造成的误差。北京全自动培养基制备器