厦门药理学膜片钳电生理技术供应商
膜片钳实验的细胞膜型:一个完整的细胞膜电学模型包含几个基本组分:膜电容,膜电阻和膜电势。这三个电学组分形成的原因各不相同:1、膜电容(membranecapacitance,Cm)的形成是由于生物膜为磷脂双分子层,对离子和其他水溶性物质均不通透,遂使细胞膜成为了电的不良导体,进而导致细胞外液-磷脂双分子层-细胞内液构成了细胞膜电容。Cm的大小与细胞膜表面积成正比,与磷脂双分层的厚度成反比。膜电容在这里的作用,主要为完成细胞的充放电过程。2、膜电阻(membraneresistance,Rm)的形成是由于细胞膜上的蛋白质通道,也就是离子通道的存在。离子和小的极性分子只有通过通道才能进出细胞膜,因此膜电阻在这里的作用,主要就是控制离子的进出。3、膜电势(membranepotential,Vm)又称膜电位,源自膜内外离子浓度的差异,离子浓度的差异又源于细胞膜对离子的选择透过性。膜电位一般可分为静息电位、动作电位和等级电位(不懂的自己去查,此处不赘述)。膜电位的作用主要是维持神经元的兴奋性,并改变离子通道的状态。全自动膜片钳系统技术指标:实验迅速,通量高。一般每天可达到50个实验数据左右。厦门药理学膜片钳电生理技术供应商
一种提高膜片钳实验效率的方法与流程:膜片钳技术是一种记录通过离子通道的离子电流来反映细胞膜上离子通道分子活动的技术。是用来研究单个离体的活细胞、组织切片或细胞膜片离子流的电生理实验技术。这项技术在可兴奋细胞如神经元、心肌细胞、肌纤维和胰腺细胞的研究中起至关重要的作用,也可用于研究特殊制备的巨型球状体中的细菌离子通道。传统膜片钳技术对实验人员的技术要求非常高,一般地,实验人员需要经过严格的长期的训练,才能准确且快速的操作。温州神经生物学膜片钳成像供应商膜片钳的应用:心肌细胞通过各种离子通道对膜电位和动作电位稳态的维持而保持正常的功能。
膜片钳芯片技术是继细胞芯片之后的又一种崭新的分析细胞电生理参数的芯片技术.由于该芯片除了具有传统膜片钳的高分辨和高准确性特点外,还具有高通量、自动化以及细胞多通道参数和细胞网络参数在线和实时检测等优点.因此,该芯片技术将很大促进细胞离子通道、细胞网络传导以及药物筛选的研究和应用.文中具体介绍了膜片钳芯片技术的发展及其应用,结合作者的研究工作,着重介绍了膜片钳芯片技术在味觉细胞研究的比较新进展,并结合神经芯片研究细胞网络的方法,对采用膜片钳芯片技术在细胞和分子水平上研究味觉的敏感机理和传导机制的应用前景进行了展望。
膜片钳的数据如何处理:穿孔膜片(perforated patch)是为克服常规全细胞模式的胞质渗漏问题,有学者将与离子亲和的制霉菌素或二性霉素b经微电极灌流到含有类甾醇的细胞膜上,形成只允许一价离子通过的孔,用此法在膜片上做很多导电性孔道,借此对全细胞膜电流进行记录。由于此模式的胞质渗漏极为缓慢,局部串联阻抗较常规全细胞模式高,所以钳制速度很慢,也称为缓慢全细胞模式。它适合于小细胞的电压钳位,对于直径大于30μm的细胞很难实现钳位。不足之处是由于电极与细胞间交换快,细胞内环境很容易破坏,因此记录所用的电极液应与胞浆主要成分相同,如高k+,低na+和ca2+及一定的缓冲成分和能量代谢所需的物质。膜片钳实验要从一大批的实验数据中,经过处理和分析,得出有意义、有价值的结果和结论。
全自动膜片钳系统技术指标:1)操作简单,全过程可自动化。2)实验迅速,通量高。一般每天可达到50个实验数据左右。3)药液交换迅速。细胞内、外液的交换是在平面芯片上进行,所以药液交换非常迅速,作用时间快,外灌流时间常数:~200ms内灌流时间常数:~2s。4)药物消耗极低。每次更换的外液只需十几微升。5)信号准确,噪声少。使用了先进的微型“法拉第板”替代传统的“法拉第笼”,极大的减少了噪声源,记录数据的电噪音很低(小于300fA/500MΩ)。6)扩展功能多。配套扩展设备丰富,如内灌流系统、温度控制系统、脂质体制备器等等。7)软件强大。软件的功能全部,可按照操作者设定的参数方案自动执行实验,进行细胞吸附、封接和维持全细胞记录模式;并兼容常规膜片钳放大。膜片钳使用的注意事项:在放大器打开时不能用手、金属物品或其它导电的物品接触电极丝。东莞全自动膜片钳技术技术
膜片钳使用操作注意:在仪器使用以前及使用之后按按照使用时长做好登记工作。厦门药理学膜片钳电生理技术供应商
膜片钳使用的注意事项:1.为了防止尘埃、静电伤害机器,每天做实验前请用清水拖地。2.拉制仪使用前需预热15-30min。3.银丝电极及地线发白时,请先用砂纸轻微打磨,再浸入新鲜的次氯酸钠溶液镀氯化银,如果银丝电极30min未变黑,则考虑更换次氯酸钠。4.先开放大器,后开软件;先关软件,后关放大器。5.非必须用到汞灯时请不要打开汞灯电源,打开后至少需1个小时才可关闭。6.在放大器打开时不能用手、金属物品或其它导电的物品接触电极丝(包括地线),在取放细胞片时请关闭放大器。膜片钳技术用特制的玻璃微吸管吸附于细胞表面,使之形成10~100MΩ的高阻封接,被孤立的小膜片面积为微米数量级,因此封接范围内细胞膜光有少数离子通道。厦门药理学膜片钳电生理技术供应商
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