苏州快速PCR荧光探针法

PCR检测技术以灵敏度高，稳定性强为优势深受兽医师的青睐，以常见的猫传腹为例：猫传腹是由猫肠冠状病毒的突变引起。猫传腹为分干性和湿性两种。如果不用PCR技术的话，干性和湿性传腹均不好确诊。但如果采用PCR技术，抽取患猫腹腔或胸腔积液进行检测，约45分钟就可以确诊是否是湿性猫传腹。而针对于干性传腹，大多数病猫会呈现淋巴结肿大。所以也可以通过PCR技术检测淋巴结的穿刺液来确诊。PCR技术在猫传腹方面的应用极大缩短了确诊的时间，从而争取到更多的诊疗时间，患猫生存的机会也就更大。巧亦捷核酸一体机的检测项目范围很广，像猫瘟、猫鼻气管炎、猫上呼吸道的各类症状、犬流感、犬瘟、犬细小、犬呼吸道和肠道的疾病、狂犬病等多种疾病均可以快速确诊，为诊疗争取了更多的时间。微流控PCR技术是一种通过将PCR反应微型化来实现PCR反应的高通量、低成本和快速的方法。苏州快速PCR荧光探针法

在宠物医院，往往没有专业的实验环境与PCR分区，样本中病原体污染、PCR反应后产物污染都是会很影响PCR结果，导致假阳性的出现，其中PCR产物污染是导致化验室环境污染**主要的因素（PCR反应中DNA的复制是指数级的增长）。而选择不善于处理低浓度样本与复杂样本的提取方法，导致核酸提取不完全或者在**1后PCR反应中存在抑制物，污染PCR反应，则会导致漏检，产生假阴性。这些都是在核酸检测过程中需要注意的点。巧亦捷PCR反应系统采用磁珠法核酸提取纯化加荧光探针PCR方法，整机一体化，实现一机提取加扩增，减少人工操作与培训时间，轻松上手。避免污染。苏州快速PCR荧光探针法国外已将PCR技术广泛应用于犬瘟、犬细小、弓形虫等致病菌的检测，从根本上突破了免疫学间接检测的局限。

巧亦捷核酸一体机采用的探针法荧光PCR与常规PCR的不同之处在于：在上、下游引物外还加入了具有序列特异性的探针（探针本身具有荧光标记），该探针根据需要扩增的靶序列设计因此只能与待检测序列结合，与染料法相比提高了实验的特异性。目前市场上的探针主要种类有：TaqMan、MolecularBeacon、Scorpions、Hybirdization等，其中以TaqMan探针应用宽泛。TaqMan探针的结构：长度与普通PCR引物类似，大约20bp左右。在5’与3’端各标记有一个荧光基团，5’的荧光基团称为报告基团（Report），3’的荧光基团称为淬灭基团（Quencher）。TaqMan探针的性能：在探针结构完整的情况下用特定的波长激发报告基团，由于报告基团与淬灭基团的空间位置很近，因此报告基团能够通过FRET（FluorescenceResonanceEnergyTransfer）将接受的能量转移到淬灭基团，使后者以发射荧光或热量的方式释放能量，而报告基团并不发射特定波长的荧光信号。

PCR(PolymeraseChainReaction)是一种复制核酸片段并提高DNA产量的技术，即所谓的聚合酶链式反应，这种技术可以在数小时内大量复制特定的基因片段。由于其高敏感性和高特异性的特点，PCR技术被应用在宠物疾病分子的诊断上，将从疑似患病宠物（血液、眼鼻分泌物、粪便，尿液或腹水）中采样的极微量病原(细菌、病毒或寄生虫)特定核酸片段样本，透过PCR的方式大量被复制，再以核酸电泳的方式判读结果，从而获得早期、快速、稳定和准确的诊断结果.常用的qPCR方法有荧光染料法（SYBR Green I）和探针法（TaqMan）。

经过多年的科研，PCR技术应用于动物疫病的检测和诊断中，具有特异性高和便于操作等特点，得到了宽泛的临床应用。该技术能够在比较短的时间内使基因进行快速的扩增，从而使微量的基因检测在临床中得到应用实践。在PCR技术实际应用的过程中，其优点主要包括以下几方面。首先，操作性较强，技术能够简单的应用于实际的工作中。其次，高效的扩增结果，能够实现成果的转化。***，特异性较高，技术性较强。现阶段，该技术能够在很短的时间内实现快速扩张的形势使微量基因得到快速的检测。巧亦捷采用的薄膜微流控技术与核酸检测技术相结合，特别适用于基因表达和病原体检测等领域。江苏猫PCR检测方法

宠物IVD检测是宠物医院必备手段，其中PCR检测目前是ZUI准确的检测方法。苏州快速PCR荧光探针法

现如今，大多数宠物医院还是使用胶体金方法对宠物疾病病原体进行检测，而此种检测方法准确性低，灵敏度不高，通常出现检测结果不准确而导致宠物误诊。如果是误诊，宠物则无法得到很好的诊疗，甚至会死亡。巧亦捷在宠物病原体核酸检测试剂系列中应用了PCR-荧光探针法，在PCR反应体系中加入特异的荧光探针，在实验条件下对宠物病原体特异性基因片段进行扩增，根据荧光强度的变化进行检测，并针对各种样品进行了反应体系的优化，灵敏度可达1000个拷贝，具防污染功能，特别适合在宠物医院使用。本产品操作简便，简单培训即可掌握操作方法。苏州快速PCR荧光探针法